高效液相色谱法测定生物转化反应液中N,N′-乙二胺二琥珀酸

论文摘要

建立了高效液相色谱测定生物转化反应液中N,N′-乙二胺二琥珀酸（EDDS）含量的分析方法。采用InertSustain AQ-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,以体积分数25%的甲醇水溶液（含有1.0 g/L一水乙酸铜、2.0 g/L四丁基氢氧化铵,以磷酸调节pH至2.80）为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL,检测波长为254 nm。该方法可在8 min内分离EDDS及其生物合成相关物质（苹果酸、柠檬酸、乙二胺四乙酸（EDTA）和富马酸）,且峰形良好。EDDS在0.06～0.6 g/L范围内线性线性关系良好（相关系数（r）为0.999 5）,平均回收率为100.39%（n=9, RSD=1.15%）。EDDS生物合成反应液中EDDS含量为0.25 g/L,大部分底物被转化为苹果酸（36.56 g/L）;而EDDS的水解反应中富马酸产生较少,形成了3.05 g/L的苹果酸。该方法简便快速,灵敏可靠,适用于EDDS生物合成的研究。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 仪器、试剂与材料
•   1.2 实验条件
•     1.2.1 标准溶液的配制
•     1.2.2 供试品溶液制备
•     1.2.3 样品处理
•     1.2.4 色谱条件
•     1.2.5 质谱条件
• 2 结果与讨论
•   2.1 色谱条件的选择
•     2.1.1 检测波长的选择
•     2.1.2 流动相中甲醇体积分数的选择
•     2.1.3 方法的适用性
•   2.2 方法线性范围、检出限、精密度及回收率
•     2.2.1 线性范围和检出限
•     2.2.2 精密度和稳定性
•     2.2.3 回收率
•   2.3 EDDS生物合成和水解反应样品的测定
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吴智超,吴恩国,杨仲毅,陶宇翔,陈潭,钟永军

关键词: 高效液相色谱,反相离子对色谱,生物转化,螯合剂,乙二胺二琥珀酸

来源: 色谱 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,化学

单位: 台州学院,浙江海正药业股份有限公司

基金: 台州市科技计划项目(162gy47,1701ny06),台州市教科规划项目(gg19007)~~

分类号: Q814;O657.72

页码: 1118-1123

总页数: 6

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