导读:本文包含了海藻糖磷酸合成酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:海藻,磷酸,基因,紫菜,定量,荧光,橡胶树。
海藻糖磷酸合成酶基因论文文献综述
何道文,刘小红,赵欢,张咏祀[1]（2018）在《海藻糖-6-磷酸合成酶基因的序列优化与表达研究（英文）》一文中研究指出为了获得一个优良的玉米抗旱育种基因资源,借助于生物信息学手段和分子生物学实验操作技术,从木棉植物中获得了一个编码海藻糖-6-磷酸合成酶的抗旱基因序列。根据玉米对密码子使用的偏爱性,合成了1个可用于玉米转化并提高其耐旱性的新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因,进一步通过DNA分子的酶切和连接等操作将该基因构建成表达质粒,再导入大肠杆菌和酵母细胞以鉴定其是否能在原核和真核细胞中表达。最后该基因被构建到植物表达载体上,并转入农杆菌细胞。结果表明,新合成基因全长为2 586 bp,包含完整的开放阅读框,编码861个氨基酸;构建出的原核和真核表达质粒与预期的结果相符,该基因可用于细胞转化试验;该新合成基因能在大肠杆菌和酵母细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶;该基因被成功构建到植物表达载体p CAMBIA-2300上,并转入了农杆菌细胞LBA4404工程菌株。综合上述结果认为,获得了1个新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因,该基因能在原核和真核细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶,构建的植物基因表达质粒可以直接用于玉米抗旱转基因育种。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年02期）
雷敏,邬向丽,张金霞,王贺祥,黄晨阳[2]（2017）在《平菇6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达及酶学特性研究》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(EC2.4.1.15)催化尿苷二磷酸葡萄糖与6-磷酸葡萄糖合成6-磷酸海藻糖,该反应为海藻糖合成的第一步反应。为了确定平菇中该酶的基因及酶动力学参数,本研究将平菇中6-磷酸海藻糖合成酶基因进行了克隆测序,得到一段1665 bp的开放阅读框,该序列编码一个554个氨基酸的蛋白质,预测分子大小为62.01 k Da。将该基因在大肠杆菌BL21菌株中进行表达,并将异源表达蛋白进行纯化及特性分析。结果表明:该异源表达蛋白的最适p H为7.4,最适温度为30℃;6-磷酸葡萄糖和尿苷二磷酸葡萄糖的Km值分别为0.14和0.17 mM;Vmax和Kcat值分别为91.86 nkat/g和5.89 s-1。平菇菌丝在40℃热处理15 h后海藻糖的含量达到最高值,即158.88 mg/g干重,这与该时间点6-磷酸海藻糖合成酶的酶活最高相一致。这些结果表明克隆得到的6-磷酸海藻糖合成酶在平菇中参与了海藻糖的合成。(本文来源于《中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会摘要集》期刊2017-08-11）
杨永超,张海斐,杨小振,王中元,魏春华[3]（2017）在《甜瓜海藻糖-6-磷酸合成酶基因鉴定及表达》一文中研究指出为了明确甜瓜海藻糖-6-磷酸合成酶基因(CmTPS)家族信息及对逆境信号的响应,该研究采用生物信息学方法,通过拟南芥TPS家族基因与甜瓜基因组数据库比对,从甜瓜基因组中共鉴定出7个海藻糖-6-磷酸合成酶基因,按照其在染色体上的位置分别命名为CmTPS1~7。系统进化分析结果显示,CmTPS4和CmTPS7为第1类,二者均含有16个内含子,推测其编码产物均具有海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)活性;其余5个CmTPS基因归为第2类,分别含有2~4个内含子;在这7个甜瓜TPS中,除CmTPS3只有TPS结构域外,其余CmTPS都含有TPS、TPP及UDP-forming结构域;蛋白序列比对结果显示,甜瓜TPS家族各成员间相似性较低(15.90%~57.31%);亚细胞定位预测表明,CmTPS1、CmTPS2和CmTPS6定位在细胞核内,其余4个CmTPS定位在细胞质内。qRTPCR表达分析表明,低温胁迫下甜瓜叶片可能以CmTPS4为主要的TPS编码基因;CmTPS基因家族对盐胁迫较为敏感,同时在ABA信号传递中起调控作用。这为进一步研究甜瓜TPS基因家族奠定了基础。(本文来源于《西北植物学报》期刊2017年06期）
王安邦,吴琼,舒海燕,许桂莺,苗红霞[4]（2016）在《香蕉海藻糖-6-磷酸合成酶基因MaTPS2克隆及表达特性分析》一文中研究指出在获得MaTPS2基因全长序列的基础上,采用同源序列比对、聚类分析、实时定量PCR等技术初步探讨香蕉MaTPS2基因的功能。从香蕉A基因组中获得一条3 277bp MaTPS2全长序列,包含一个完整的开放阅读框1 344bp,编码蛋白含447个氨基酸。其氨基酸理化性质分析表明,MaTPS2蛋白属于不稳定疏水性蛋白,具有一个结构域GT1-TPS。通过与已知植物的TPS氨基酸同源序列比对,同源性达77.95%。系统发育树进化关系分析表明,MaTPS2编码的氨基酸序列与银杏TPS氨基酸序列(AAX16014.1)邻近,说明二者的亲缘关系较近。器官特异性分析表明,MaTPS2在香蕉植株的根、球茎、假茎、叶、花各器官中均有表达,其中在球茎、假茎和叶中表达量较多,在果实中表达量较低。在ABA、干旱、盐害和枯萎病菌胁迫处理下,MaTPS2表达量升高,在ACC胁迫处理下,MaTPS2表达量显着下降,而低温胁迫条件下,MaTPS2表达不响应。由此推导,MaTPS2可能参与调控香蕉抗旱、抗病机制。植物生长调节剂ACC和ABA胁迫处理说明MaTPS2的表达可能受激素蛋白间接调控。(本文来源于《中国南方果树》期刊2016年06期）
史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添[5]（2015）在《坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)家族基因的克隆及表达特征分析》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)是植物海藻糖合成的关键酶,在植物逆境胁迫应答中发挥着重要的作用。实验以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE技术克隆获得坛紫菜的3条TPS基因序列:Ph TPS1,Ph TPS2-1和Ph TPS2-2。序列分析结果表明,Ph TPS1(收录号:KM580358)序列全长3 557 bp,包含一个3 462 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 153个氨基酸,分子量为124.2 ku,等电点为6.73,属于TPSⅠ亚家族;Ph TPS2-1(收录号:KM519457)序列全长4 264 bp,包含一个4 044 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 374个氨基酸,分子量为145.2 ku,等电点为5.96;Ph TPS2-2(收录号:KM519458)序列全长3 733 bp,包含一个3 324 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 107个氨基酸,分子量为120.2 ku,等电点为5.42。Ph TPS2-1和Ph TPS2-2属于TPSⅡ亚家族。基因表达水平的定量分析结果表明高温胁迫条件下,3条Ph TPS基因的表达模式基本一致,均表现为先上调后下调,再上调的趋势;而Ph TPS1和Ph TPS2-1基因在中低水平的失水条件下,基因表达水平均没有发生显着变化,只在高水平失水胁迫下显着上调,Ph TPS2-2基因在中高水平失水条件下,表达水平显着上调。说明Ph TPS基因可能只在高度失水胁迫下发挥应激调节作用。(本文来源于《水产学报》期刊2015年04期）
李莹,柳参奎[6]（2015）在《碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆及其耐逆性分析》一文中研究指出从碱茅酵母cDNA文库中经过NaCl、NaHCO3筛选,均得到长为1153bp碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因(PutTPS)片段。通过3′End cDNA amplification方法获得基因缺失的3′序列,该基因全长3358bp,编码882个氨基酸。氨基酸序列比较结果表明,PutTPS氨基酸序列与水稻、拟南芥、玉米等多种高等植物的TPS蛋白的同源性高达60%~90%。利用Northern blot技术,研究该基因的组织表达模式及NaCl、NaHCO3胁迫处理下基因的表达模式变化;同时对转pYES2-PutTPS基因酵母菌株进行盐、碱、氧化胁迫、渗透胁迫处理,观察其在逆境下的生存表现。结果表明,PutTPS具有组织表达特异性,其中在根和花中表达量最大;NaCl、NaHCO3会诱导PutTPS基因在根和叶中的上调表达;同时重组酵母菌株对盐碱、氧化、渗透胁迫及干旱等逆境的适应能力显着增强。以上研究结果表明,碱茅PutTPS基因与逆境之间具有一定的应答关系,并在植物适应环境逆境过程中起着重要的作用。(本文来源于《草业学报》期刊2015年01期）
史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添[7]（2014）在《坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因家族的克隆及表达分析》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)是植物海藻糖合成的关键酶,在植物逆境胁迫应答中发挥着重要的作用。本研究采用RACE技术克隆获得了坛紫菜的叁条TPS基因序列:Ph TPS1,Ph TPS2-1和Ph TPS2-2。序列分析结果表明,Ph TPS1序列全长3 557 bp,包含一个3 462 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 153个氨基酸,属于TPSⅠ亚家族;Ph TPS2-1序列全长4 264 bp,包含一个4 044 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 374个氨基酸;Ph TPS2-2序列全长3 733 bp,包含一个3 324 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 107个氨基酸。Ph TPS2-1和Ph TPS2-2属于TPSⅡ亚家族。基因表达水平的定量分析结果表明高温胁迫条件下,叁条Ph TPS基因的表达模式基本一致,均表现为先上调后下调,再上调的趋势;而叁条Ph TPS基因均在高水平的失水条件下,表达水平显着上调。说明Ph TPS基因可能在高度失水胁迫下发挥应激调节作用。(本文来源于《2014年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2014-10-29）
岳思思,姚伟,王东浩,陈玉芹,王喆之[8]（2014）在《丹参海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SmTPS)的克隆及其表达分析》一文中研究指出对丹参EST序列进行Blast分析,得到一条海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)基因,将其命名为SmTPS,GenBank注册号为JF937196。该基因cDNA全长2 836 bp,包含一个长为2 574 bp的ORF,编码857个氨基酸。生物信息学分析表明,分子量为97.04 kD,等电点为5.76,含α-螺旋、β转角、延伸连和无规则卷曲。该蛋白同时具有海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)的功能结构域。系统进化树分析表明丹参TPS功能域和拟南芥AtTPS6属于一类,而TPP功能域与低等生物酵母ScTPS2属于一类。实时定量PCR结果分析表明,SmTPS基因在丹参不同组织器官中差异表达,其茎中表达量最高。在干旱和低温处理下,其表达量与对照相比均可上调约2倍,表明SmTPS基因在丹参抵抗干旱和低温胁迫中发挥一定的作用。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年02期）
周斌辉[9]（2013）在《巴西橡胶树6—磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达分析及其功能验证》一文中研究指出尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和6-磷酸葡萄糖(G-6-P)能够在6-磷酸海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的催化作用下生成6-磷酸海藻糖(T-6-P),再在6-磷酸海藻糖磷酸酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)的催化作用下生成海藻糖和无机磷(Pi)。而海藻糖是一种非常稳定的非还原性双糖,在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下能稳定细胞膜和蛋白质的结构,有效地保护细胞膜和蛋白质分子不变性失活,从而维持生命体的生命过程和生物特征,对生物体具有神奇的保护作用。但是,在橡胶树中尚未见有关海藻糖合成相关酶的研究报道。克隆TPS基因,了解其表达调控特点,并研究它们与橡胶树抵抗非生物胁迫能力的关系具有理论意义和应用前景。本论文首次对巴西橡胶树TPS基因进行了克隆,对其表达特性进行了系统分析,并通过转基因拟南芥研究这些基因的生物学功能。主要研究结果如下：1.搜索巴西橡胶树EST序列数据库,获得TPS基因EST组装后序列(contig),设计特异引物,运用PCR和RACE技术,首次从橡胶树中克隆了两个TPS基因的全长cDNA序列,分别命名为HbTPS和HbTPS2。HbTPS1基因编码928个氨基酸,HbTPS2基因编码940个氨基酸；亚细胞定位预测显示HbTPS1可能定位于内质网,而HbTPS2可能定位于线粒体或细胞核。蛋白疏水性预测显示HbTPS1和HbTPS2基因的编码蛋白都不具有跨膜区域,均为亲水性蛋白。2.利用实时荧光定量PCR研究了两个HbTPS基因的表达特性。在正常割胶的橡胶树不同组织(叶片、芽、雌花、雄花、种子、枝皮、老皮和胶乳)中,HbTPS1和HbTPS2基因均主要在树皮中表达；在未开割树的胶乳中,伤害和割胶均可诱导HbTPS基因上调表达,但在伤害处理的胶乳样品中HbTPS1基因的表达丰度远高于HbTPS2,而在正常割胶树的胶乳中HbTPS2基因的表达丰度远高于HbTPS1基因；在利用六种植物激素(或生长调节剂)进行处理后,HbTPS1基因的表达显着受乙烯利(ET)和生长素(2,4-D)诱导；HbTPS1和HbTPS2基因在赤霉素(GA)处理下,表达模式均为先下降再上升。在橡胶树幼苗中,HbTPS1和HbTPS2基因对低温(4℃)、高温(40℃)和干旱(20%PEG6000)胁迫处理的应答模式存在差异。低温处理后,HbTPS1基因的表达量在树皮和木质部中明显增高,在根中是先上升后下降；HbTPS2在树皮中明显增高,在木质部和根中也是先上升后下降。高温处理后,HbTPS1基因的表达量在叶片中出现先上升后下降的趋势,在根中则是大幅度增高；HbTPS2基因在木质部中先上升后下降,在根中也是大幅度增高。干旱处理后,HbTPS1基因的表达量在根中大幅度提高；HbTPS2基因在树皮、木质部和根中都出现先下降后大幅上升的趋势。3.运用Genome Walking技术克隆了HbTPS1基因1596bp的5’调控区序列、HbTPS2基因1509bp的5’调控区序列。启动子分析表明HbTPS2的5’调控区序列中含有一个真核生物典型的核心启动子区域,同时这两个基因的5’调控区序列中均包含多种顺式作用元件,其中部分元件的功能已在基因表达分析中得到了验证。4.运用mRNA原位杂交技术,对两个HbTPS基因的mRNA在橡胶树嫩茎和中脉两种组织中的分布进行了分析。结果显示,两个HbTPS基因的mRNA都主要定位于两种组织的韧皮部中,HbTPSl基因的mRNA表达量在中脉中高于嫩茎,而HbTPS2基因在嫩茎中的表达量明显高于中脉。5.利用酵母TPS突变株的互补实验,显示两个HbTPS基因都能互补酵母突变株的TPS功能,表明它们都是有功能的TPS基因。6.获得了两个HbTPS基因的过表达转基因拟南芥植株。冷冻、高温、干旱和高盐四种非生物胁迫实验显示转HbTPS1基因的拟南芥植株的抗逆能力明显高于野生型拟南芥,转HbTPS2基因的拟南芥植株的生长速度明显快于野生型拟南芥,并且提早开花。本研究首次获得了两个有功能的巴西橡胶树TPS基因,并系统研究了它们的组织表达和胁迫应答特性,同时利用转基因拟南芥证明两个HbTPS基因分别具有抵御逆境胁迫、促进植物生长和提早花期的功能。本文结果,为进一步阐明橡胶树TPS基因的生物学功能奠定了良好的基础,为橡胶树转基因育种提供了可靠的靶标基因,具有理论意义和应用前景。(本文来源于《海南大学》期刊2013-06-01）
谢翎,黄勃[10]（2013）在《球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建》一文中研究指出本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1。PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列。并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中。因此,该重组质粒可以直接用于tps1基因的酵母表达。(本文来源于《长春师范学院学报》期刊2013年04期）
海藻糖磷酸合成酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
6-磷酸海藻糖合成酶(EC2.4.1.15)催化尿苷二磷酸葡萄糖与6-磷酸葡萄糖合成6-磷酸海藻糖,该反应为海藻糖合成的第一步反应。为了确定平菇中该酶的基因及酶动力学参数,本研究将平菇中6-磷酸海藻糖合成酶基因进行了克隆测序,得到一段1665 bp的开放阅读框,该序列编码一个554个氨基酸的蛋白质,预测分子大小为62.01 k Da。将该基因在大肠杆菌BL21菌株中进行表达,并将异源表达蛋白进行纯化及特性分析。结果表明:该异源表达蛋白的最适p H为7.4,最适温度为30℃;6-磷酸葡萄糖和尿苷二磷酸葡萄糖的Km值分别为0.14和0.17 mM;Vmax和Kcat值分别为91.86 nkat/g和5.89 s-1。平菇菌丝在40℃热处理15 h后海藻糖的含量达到最高值,即158.88 mg/g干重,这与该时间点6-磷酸海藻糖合成酶的酶活最高相一致。这些结果表明克隆得到的6-磷酸海藻糖合成酶在平菇中参与了海藻糖的合成。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
海藻糖磷酸合成酶基因论文参考文献
[1].何道文,刘小红,赵欢,张咏祀.海藻糖-6-磷酸合成酶基因的序列优化与表达研究（英文）[J].华北农学报.2018
[2].雷敏,邬向丽,张金霞,王贺祥,黄晨阳.平菇6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达及酶学特性研究[C].中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会摘要集.2017
[3].杨永超,张海斐,杨小振,王中元,魏春华.甜瓜海藻糖-6-磷酸合成酶基因鉴定及表达[J].西北植物学报.2017
[4].王安邦,吴琼,舒海燕,许桂莺,苗红霞.香蕉海藻糖-6-磷酸合成酶基因MaTPS2克隆及表达特性分析[J].中国南方果树.2016
[5].史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添.坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)家族基因的克隆及表达特征分析[J].水产学报.2015
[6].李莹,柳参奎.碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆及其耐逆性分析[J].草业学报.2015
[7].史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添.坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因家族的克隆及表达分析[C].2014年中国水产学会学术年会论文摘要集.2014
[8].岳思思,姚伟,王东浩,陈玉芹,王喆之.丹参海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SmTPS)的克隆及其表达分析[J].基因组学与应用生物学.2014
[9].周斌辉.巴西橡胶树6—磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达分析及其功能验证[D].海南大学.2013
[10].谢翎,黄勃.球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建[J].长春师范学院学报.2013
论文知识图
