健脾解毒方经活性氧途径诱导人肝癌HepG2细胞自噬性死亡

论文摘要

目的:探讨健脾解毒方对肝癌HepG2细胞增殖及自噬的影响,并初步探讨其可能机制。方法:用不同浓度的健脾解毒方（0、2、3、4 mg/mL）干预HepG2细胞,或分别用自噬抑制剂3-MA或活性氧（ROS）抑制剂NAC预处理后,CCK8法检测细胞增殖;GFP-LC3B质粒转染及透射电镜观察细胞自噬情况;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达;DCFH-DA探针标记细胞,流式细胞术检测胞内ROS产生。结果:健脾解毒方能显著抑制HepG2细胞增殖（P<0.01）,且其作用呈浓度及时间依赖性;健脾解毒方能诱导HepG2细胞内自噬体形成,使自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ表达上调,介导胞内ROS产生（P<0.05或P<0.01）;抑制自噬或ROS均可使健脾解毒方的细胞毒作用显著减弱（P<0.05）。结论:健脾解毒方可通过诱导自噬性死亡抑制肝癌HepG2细胞增殖,ROS参与自噬的诱导,提示杀伤性自噬是一种有效的抗肿瘤机制。

论文目录

• 1 仪器与材料
•   1.1 细胞株
•   1.2 药物与试剂
•   1.3 主要仪器
• 2 方法
•   2.1 CCK-8法检测细胞增殖
•   2.2 GFP-LC3融合蛋白示踪自噬形成
•   2.3 电镜观察自噬体
•   2.4 细胞内ROS检测
•   2.5 Western blot检测蛋白表达
•   2.6 统计学处理
• 3 结果
•   3.1 健脾解毒方对HepG2细胞增殖的影响
•   3.2 健脾解毒方对HepG2细胞自噬的影响
•   3.3 健脾解毒方对HepG2细胞自噬性死亡的影响
•   3.4 健脾解毒方对HepG2细胞产生ROS的影响
•   3.5 健脾解毒方诱导自噬作用与ROS的关系
• 4 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林彤,沙永强,孙保国,项婷,周厚明,陈泽雄

关键词: 肝癌,自噬,活性氧,健脾解毒方

来源: 中药材 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 中山大学附属第一医院中医科

基金: 广东省科技计划面上项目(2014A02021239,2013B021800266),广东省自然科学基金(2017A030313739)

分类号: R285.5

DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2019.05.038

页码: 1146-1150

总页数: 5

文件大小: 1964K

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