色谱饼论文_白泉,耿信笃

导读:本文包含了色谱饼论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:色谱,复性,疏水,高效,液相,基体,蛋白质。

色谱饼论文文献综述

白泉,耿信笃[1](2012)在《蛋白折迭液相色谱及色谱饼》一文中研究指出生物工程中由大肠杆菌(E.coli)表达的重组蛋白药物常在细胞内凝聚成没有生物活性包涵体(inclusion body),通常需要利用盐酸胍或脲等变性剂将包涵体溶解后通过蛋白复性才能获得具有生物活性的目标蛋白。通常采用稀释和透析法进行蛋白复性时,变性蛋白易聚集沉淀导致其复性效率低,一般仅为5%~20%,而且难(本文来源于《全国生物医药色谱及相关技术学术交流会(2012)会议手册》期刊2012-04-21)

闵一[2](2011)在《亚2μm无孔硅胶填料的制备及用其在色谱饼上进行蛋白快速分离》一文中研究指出本文探索了粒径小于2微米(亚2μm)无孔硅胶在色谱快速分离中的应用。将高效的亚2μm无孔硅胶色谱介质装填在色谱饼中,在数分乃至数秒内对整体蛋白进行了快速分离。随着色谱填料粒径的减小,柱效会随而增大;若将如此小粒度色谱介质装填入色谱柱,可以获得比其他填料所能达到的更高的柱效,但会产生很高的反压,以致无法在常规液相色谱仪上操作;因色谱饼的内径远大于柱长,即使装填极小颗粒的色谱填料和在高的流速条件下,其柱压仍然很低;在保持高柱效的同时,能够实现大幅度减小分析时间的目的。在实验中合成了基于亚2μm无孔硅胶微球的反相和疏水填料,并且用一系列不同规格的色谱饼进行了测试,在常规高效液相色谱仪上实现了整体蛋白的快速分离。论文讨论了从亚2μm无孔硅胶的合成到蛋白的快速色谱分离等相关内容,共分为以下五个部分。1.绪论。对高效液相色谱中新近出现的快速分离方法进行了综述,并介绍了各种方法的优缺点,如超高压液相色谱、色谱饼、整体柱和高温快速色谱等。引用了50篇文献,其中近3年来的新文献占42%。2.亚微米和微米级无孔硅胶填料的制备及表征。详细地介绍了亚微米和微米级无孔硅胶填料的制备方法,并结合自己实验室的条件,合成了单分散性较好的亚2μm无孔硅胶,并进一步对硅胶进行化学改性,制备了反相和疏水两种色谱填料。应用光学显微镜、电子扫描显微镜和激光粒度分布仪对合成的硅胶和填料进行表征。通过对比发现自己合成的硅胶粒径大小以及表面情况与商品硅胶相似。可以看出无孔硅胶和多孔硅胶表面明显不同,同样放大倍数下无孔硅胶的表面是光滑的。3.亚2μm无孔硅胶基质反相固定相的制备及其在色谱饼蛋白快速分离中的应用。将合成亚2μm无孔硅胶基质C18填料装填入不同规格的色谱饼,在常规色谱仪上对七种整体蛋白进行了快速分离,分析时间只用了48秒。对比了以商品无孔硅胶和自己合成的硅胶分别为载体的C18反相填料对蛋白的分离效果,发现自己合成的硅胶填料的性能不差于商品硅胶。4.2.5μm无孔聚合物基质正丁基疏水固定相在色谱饼蛋白快速分离中的应用。将2.5μm无孔聚合物基质正丁基疏水填料装填入不同规格的色谱饼,在10ml/min的流速下,于1分钟内对七种整体蛋白进行了快速完全分离,柱压未超过20MPa。同时还对整体蛋白进行了连续多次快速分离,表明色谱饼可实现柱床的快速再生。考察了条件塔板高度及分离度与流速间的关系,发现随着流速的增大,柱效也随着增大。5.亚2μm无孔硅胶基质聚乙二醇600疏水固定相的制备及其在色谱饼蛋白快速分离中的应用。合成了粒径分别为630纳米、650纳米及1微米的硅胶微球,对其用聚乙二醇600进行化学改性,然后装填入不同规格的色谱饼,对整体蛋白混合物进行了高效、完全分离,分析时间为2分钟或更短(48秒);用条件塔板高度及分离度分别对流速作图,发现随着流速的增大,柱效也随之增大。(本文来源于《西北大学》期刊2011-06-30)

李瑛,白泉,陈刚,王骊丽[3](2008)在《疏水型色谱饼对人血清蛋白质组学样品的快速分离与制备》一文中研究指出建立了疏水型色谱饼(10mm×20mm i.d.)与反相色谱(RPLC)离线二维色谱快速分离制备人血清蛋白质组学样品,并用基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行检测的方法。以4种标准蛋白质的稀溶液为模型进行分离富集,得到细胞色素c(Cyt-c)与肌红蛋白(Myo)的检出限均为1pmol/μL,溶菌酶(Lys)和胰岛素(Ins)的检出限为0.1pmol/μL。将此方法用于人血清蛋白质组学样品的分离与制备,随着血清处理量的增大,质谱可检出的组分数目与信号强度均增加,当血清处理量达到1.0mL时,可检出低丰度蛋白质或多肽285个(相对分子质量均在15000以下)。研究中将1μgCyt-c加入到0.5mL血清中,用上述方法在分离富集低丰度Cyt-c上取得了很好的效果。结果表明,采用疏水型色谱饼与反相色谱联用技术不仅可对血清样品中低丰度蛋白质进行有效的分离和富集,而且一次样品的处理量大,可显着提高低丰度蛋白质的分析、检测水平。(本文来源于《色谱》期刊2008年03期)

李瑛[4](2008)在《色谱饼对人血清蛋白质组学样品的制备及胰腺癌肿瘤标志物的筛选》一文中研究指出蛋白质组学是后基因组时代的一个新兴领域,其理论和技术的发展为肿瘤标志物的研究提供了新的方向。临床研究显示,对恶性肿瘤而言早期诊断的意义远大于现有的任何一种治疗方案,但现有常用标志物对早期无症状阶段肿瘤的及时发现能力仍远不能令人满意。所以寻找灵敏度、特异度均高,检测方便,无创的标志物用于肿瘤早期发现、早期诊断己成为当务之急。蛋白质组学研究的关键在于蛋白质的分离和鉴定,如何有效去除样品中高丰度蛋白,分离富集低丰度蛋白,这不仅是蛋白质组学样品制备重要的研究内容,也是制约蛋白质组学发展的瓶颈问题。近年来,多维液相色谱(multidimensional HPLC,MDLC)以其分离效率高、重复性好、方法灵活多样,且易与质谱联用实现自动化的特点,广泛应用于蛋白质组学研究。本研究应用多维色谱和基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time offlight mass spectrometry,MADLI-TOF MS)离线联用对人血清蛋白质组学样本分离和检测,并通过该技术筛选了胰腺癌患者血清和组织中的差异表达蛋白质,取得了比较满意的结果。本论文包括以下四个部分:1.文献综述。概括的介绍了蛋白质组学及其研究的内容、方法以及研究现状,以及目前蛋白质组学在胰腺癌的研究进展以及重要意义。2.疏水型色谱饼对人血清蛋白质组学样品的快速分离与制备。建立了疏水型色谱饼(10 mm×20 mm I.D.)与反相色谱(RPLC)离线二维色谱快速分离制备人血清蛋白质组学样品,并用基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行检测的方法。以四种标准蛋白的稀溶液为模型进行分离富集,得到细胞色素-C(Cyt-C)与肌红蛋白(Myo)的检出限均为1 pmol·μL~(-1),溶菌酶(Lys)和胰岛素(Ins)为0.1 pmol·μL~(-1)。将此方法用于人血清蛋白质组学样品的分离与制备,随着血清处理量增大,质谱可检出组分与其信号强度均增加,当血清处理量达到1 mL时,可检出低丰度蛋白质或多肽285个(15 kDa以下)。研究中以Cyt-C为内标,将其1μg加入到0.5 mL血清中,用上述方法在分离富集所加入的低丰度Cyt-C上取得了很好的效果。以上结果表明,用疏水型色谱饼与RPLC二维色谱联用技术不仅可对血清样品中低丰度蛋白进行有效的分离和富集,而且一次样品处理量大,显着提高了低丰度蛋白的分析、检测水平。3.离线体积排阻-反相色谱-质谱(sEC-RPLC-MS)对胰腺癌患者血清肿瘤标志物筛选的研究。用体积排阻色谱(size exclusion chromatography,SEC)对变性后血清中的蛋白按其分子量的大小进行分离并富集,从而消除了高丰度大分子量蛋白质对小分子量蛋白/多肽的影响,提高了低丰度小分子量蛋白的检出率。经过反相色谱(reverse phase chromatography,RPLC)进一步分离后,并用MALDI-TOF MS在未酶解的情况下直接分析检测。结果显示:该技术手段重复性高、稳定性好,是较为理想的血清蛋白质组学研究平台,通过对胰腺癌患者术前、术后血清的实验结果对比分析,并以健康人血清检测结果作为对照,筛选出一种显着差异蛋白分子。这一m/z为5734 D的蛋白质/多肽在胰腺癌患者血清中呈现明显上调,敏感度达到78.38%(29/37),特异度达到100%(6/6),有望作为胰腺癌诊断的标志物。4.离线SEC-RPLC-MS对胰腺癌变组织蛋白质组样品的研究。用SEC-RPLC分别对使用两种不同方法提取的胰腺癌组织样品进行分离,并用MALDI-TOF MS检测,优化选择提取效果较好的一种方法,可检出240余种不同质荷比的蛋白/多肽分子,该技术方法灵活简便,可用作组织蛋白质组研究的通用型方法。通过对11例胰腺癌组织及2例正常胰腺组织的研究,发现一些差异表达蛋白,并且在癌变组织样本中检测到m/z是5734D的蛋白质/多肽的质谱信号,这些蛋白可能成为胰腺癌的蛋白标志物。(本文来源于《西北大学》期刊2008-05-05)

白泉,刘建波,耿信笃[5](2006)在《疏水型色谱饼对重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的复性并同时纯化研究》一文中研究指出人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)是调节造血前体细胞生长和分化的主要细胞因子,可促进中性粒细胞和巨噬细胞的增加,增强造血功能。在临床上,rhGM-CSF主要用于治疗各种原因引起的周期性白细胞减少症、先天性白细胞减少症、再生障碍性贫血等。(本文来源于《首届中国中西部地区色谱学术交流会暨仪器展览会论文集》期刊2006-08-01)

严坤平[6](2004)在《色谱饼的优化设计及其在生物工程中的应用》一文中研究指出该论文内容分为叁个部分。 1.以评价色谱柱的方法对色谱饼进行了评价,发现用于分离生物大分子的疏水填料并不遵循分离小分子填料的规律。另外,仍以短柱理论为理论基础,在原液流分布器(以下简称分布器)的基础上设计出多种液流分布器,并用不同的方法对液流分布器的合理性进行了判断,挑选出对液体分布性能更好的分布器,使其吸附量在容量因子k′=10.54时比原分布器提高约4.43mg,约33.8%左右。在原装柱方法的基础上,还设计了两种新的装柱方法,其中一种较好的装柱方法吸附量在容量因子k′=9.87时比原装柱方法提高了8.36mg,提高约67.5%。 2.研究了一种弱阴离子交换(WAX)色谱饼对重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的复性并同时纯化的方法。将大肠杆菌(E.coli)表达的存在于包涵体中的rhG-CSF用脲提取并用巯基乙醇还原变性后,在流动相中有一定浓度的脲及氧化-还原谷胱甘肽存在条件下,对rhG-CSF进行复性的色谱条件进行了优化。在30min内可得到纯度95%、比活为1.9×10~8IU/mg的rhG-CSF,质量回收率为27%。该法可在进样时生成沉淀的条件下正常进行色谱操作,并以周期性溶解沉淀的方式,再用WAX色谱饼复性方法提高rhG-CSF的质量及活性回收率。可望普遍用于蛋白质复性及同时纯化工业生产。 3.研究了一种用聚合物基质的WCX色谱饼对重组人干扰素-γ复性并同时纯化的方法,将大肠杆菌(E.coli)表达的存在于包涵体中的rhIFN-γ用脲提取,对rhIFN-γ进行复性的色谱条件进行了优化。在30min内可得到纯度大于97%、比活为4.3×10~7IU/mg的rhIFN-γ,质量回收率为48.9%。相对于文献中报道的方法,该方法步骤少,操作简单。在实验中采用了色谱饼装填聚合物基质的填料,使该种填料有了更为广泛的应用,并提高了色谱饼的吸附量,可望用于工业生产。(本文来源于《西北大学》期刊2004-06-01)

姚文兵,吴丹,耿信笃[7](2004)在《分析型色谱饼对人血清白蛋白的快速纯化》一文中研究指出采用分析型色谱饼对标准蛋白混合物进行了分离,结果表明装填有小颗粒填料的色谱饼在高流速条件下仍然具有良好的分离能力。在较大流速(5mL/min)条件下,在10min内对人血清白蛋白样品进行了快速纯化,其纯化后的人血清白蛋白的纯度大于85%,回收率为65%,说明分析型色谱饼可以用于快速分离纯化生物大分子。(本文来源于《色谱》期刊2004年02期)

姚文兵[8](2003)在《色谱饼对生物大分子的快速纯化》一文中研究指出色谱饼是在计量置换理论和短柱原理的基础上设计制造的。现已成功地应用于基因工程下游产品的分离纯化中。本文将其用于动物组织中活性蛋白与工业粗酶的提取,并在较短时间内得到了纯度较高的目的蛋白,体现出色谱饼在分离过程中使用压力低,蛋白回收率高和快速的特点。本文包括五章。 第一章 文献综述 第二章 人血清白蛋白的纯化 在所选定色谱条件下用色谱饼(10×20minI.D.)对其流动相种类、浓度、缓冲液、pH值、流速进行了优化研究,在优化条件下对标准蛋白混合物进行了在不同流速条件下分离情况的比较,结果显示装填有小颗粒填料的色谱饼在高流速条件下仍然具有良好的分离能力,还在较大流速条件下,在10分钟内对人血清白蛋白进行了快速纯化,其纯化的人血清白蛋白的纯度大于88%,蛋白质回收率大与65% 第叁章 蛋清中溶菌酶的纯化 首先采用疏水色谱对溶菌酶进行分离纯化,由于蛋清中多种蛋白质与溶菌酶保留时间相近,无法用HIC将其彻底分离。最后采用离子交换色谱纯化溶菌酶,建立了用高效液相色谱分离溶菌酶的新方法,结果表明,被纯化的溶菌酶可以与杂蛋白进行很好的分离,并且得到活性回收率为94%,活性为该方法具有分离速度快,纯化效率高的特点。 第四章 α-淀粉酶的纯化 本章采用高效疏水色谱分离纯化α-淀粉酶,详细讨论了纯化的最佳条件,在给定的条件下纯化工业用α-淀粉酶,其活性回收率达90%,比活性为120U/mg,此法纯化α-淀粉酶简单快速,效率高,不仅可以纯化工业粗酶,也可纯化其他来源的淀粉酶。 第五章 细胞色素C的纯化 本章分别采用高效疏水色谱和高效离子交换色谱分离纯化猪心中的细胞色素C,由于亲水性较强,可以与猪心中其他杂蛋白进行有效分离,得到纯度为90%的目标蛋白,其等电点为10.8,可以很好地在阳离子交换柱中保留,在优化了分离条件的情况下,得到纯度为85%的细胞色素C。(本文来源于《西北大学》期刊2003-06-01)

李翔,张养军,耿信笃[9](2002)在《半制备型色谱柱与色谱饼性能的比较》一文中研究指出通过比较具有相同柱几何体积的半制备色谱柱和色谱饼的性能 ,发现在同样的色谱条件下 ,用液相色谱方法分离生物大分子时 ,在分离效率和蛋白活性回收方面 ,色谱饼和色谱柱的差异不大 ;由于色谱饼中的填料较色谱柱中的装填更为紧密和均匀 ,当流动相流速增加时 ,色谱饼不仅反向压力上升慢 ,而且质量和体积负载也比色谱柱高。该结果表明使用色谱饼的色谱分离不仅具有可与高效液相色谱 (HPLC)媲美的分离效率 ,而且还具有中、低压色谱分离的高柱负载 ,这有利于蛋白保持高的生物活性 ,为色谱饼的工业化应用奠定了基础。(本文来源于《色谱》期刊2002年02期)

张养军[10](2001)在《制备型色谱饼的理论、性能及应用研究》一文中研究指出本文在计量置换模型(SDM-R)的基础上,首次提出了有效迁移柱长和最短柱长的计算公式。基于此,设计制作了不同规格的色谱饼,并首次研制成功了用于生产规模对重组人治疗蛋白进行分离及同时纯化的色谱饼和适合于色谱饼的径向装填方法。在对色谱饼的分离性能、复性功能和体积随流速变化曲线以及制备型液相色谱中最小流动相用量进行研究的基础上,用生产规模的色谱饼对重组人干扰素—γ进行了复性及同时纯化,其一次纯化量达到克级。盐酸胍的重组人干扰素—γ样品提取液直接进样,一步纯化效果达到95%以上,最高比活达到9.7×10'IU/mg,其活性为进样前的62倍。全文共包括六个部分: 1、短柱理论及检验 基于对生物大分子高效液相色谱分离时分离度与柱长基本无关的事实和五条假设,用计量置换模型推导出了计算液相色谱中溶质有效迁移柱长和最短柱长的公式,发现流动相的流速、梯度陡度、难分离溶质对中弱吸附溶质1开始迁移时流动相中置换剂的起始浓度αDII和强吸附溶质2开始迁移时置换剂的起始浓度αD21、表征溶质性质的Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时,从二者表面释放的置换剂的摩尔数)和logI(1 mol溶质与固定相亲和势有关的常数)值以及与分离度有关的参数,即该两种溶质达到近似基线分离时的浓度αD12和αD22与有效迁移柱长和最短柱长间的定量关系。用有效迁移柱长和最短柱长的公式计算出了在所选定的高效疏水色谱条件下六种蛋白质的有效迁移柱长和最短柱长。还发现不同内径的色谱柱,在不同流速下进行分离时,所需最短柱长亦不相同。用推导出的最短柱长公式对不同色谱条件下的柱长进行了预测,并用实验对计算结果进行了检验,两者符合程度颇佳。从理论上解决了分离生物大分子时,色谱柱长度的选择问题,为短色谱柱的设计、制造和应用奠定了理论基础。 2、色谱饼的设计与制造 通过对色谱饼设计基础、制造材料、密封问题、流动相均匀分布问题以及总体结构的研究,设计并制作了七种不同规格的色谱饼。实验表明色谱饼在填料装填、密封和使用方面达到了设计要求。由于色谱饼可以装填小颗粒填料,并能在大流速条件下使用,所以具有灌注色谱的特征,并因其使用压力低,更有利于活性蛋白的稳定存在。色谱饼因其独特的结构和性能己经申请了国家发明专利,并己经通过初步审定,其专利申请号为011 15263.X。3、色谱饼的径向装填方法 通过对径向装填色谱饼与轴向装填色谱饼方法的比较,表明径向装柱法不但用于装填大直径色谱饼(“饼形”色谱柱)是可行的,而且与常用的轴向装柱法相比,该法装填色谱饼时容易、方便、省时、省力,成本低。另外,与安发玛西亚生物技术中心装填色谱柱的专利斤活什什匕,径向装填法除了色谱饼不需加装结构复杂的叁通阀,使其结构简单外,还不会损坏分介器和筛板,有利于流动相的均匀分布,因此,也有利于分离效率的提高。该技术己申请了国家发明专利,并己经通过初步审定,其专利申请号为off 15264.8。4、色谱饼的性能的检验 从对有相同柱儿何体积的半制备色谱柱和色谱饼性能的比较,发现在分离效率和蛋白活性回收率方面,色谱饼和色谱柱差异不大,但色谱饼压力随流速的变化比色谱柱小,并发现色谱饼较色谱柱装填更为紧密和均匀,因此其柱负荷略大于色谱柱。实验还表明色谱饼不但具有HPLC高效分离特性,完全可以满足生物大分于制备分离的要求,而且具有中、低压制备色谱大进样量以及灌注色谱高流速的特征。此外,色谱饼的低压环境还有利于维持蛋白的生物活性。为进一步设计装填小颗粒填料的工业制备型色谱饼奠定了实验基础。5、色谱饼分离条件的优化 在计量置换模型的基础上首次提山了流动+山-Hill估算公式,用实验对其进行了检验,并得出在保持流动相用量小变的条f’I。3一,改企流速和梯度时问对分离度和变忖蛋广I的复们叁效率彻们不人的纠沦。6、生产型色谱饼对干扰素4的分离纯化 D门牟决亚红人1‘扰贪丫川*IFN丫阶3.on】of儿硫峨k(pH 一7刀…M+川f-’浊解度小的问题,本文提出了连续进样法。将该沾用于色谱饼对rMF*-Y的软酸狐提取液进行复性及同时纯化,说明该方法简单可行,并对大体积进样尤为重要。川色谱饼门.D,厂对rhIFN-Y的故酸)皿提取液进行了复性及同时纯化, 口次卜样(7回omol/L粘酸狐溶3 多早为700mL贯 蛋l厂l_旧达至2.049伊 一 步乡化〔巾IFN一Y f州X过*%%以1二,比5;t.吐乡ZO XI{)*二U/。I二g,汕足了* 内十物制品的业求。而且上柱后rhIFN-Y收集液的活性是上柱前提取液活性的62倍。另外,对填料*而言,rb;IFN-Y的最高比活达到 9.7 XIO士U/mg,是国家标准的 6倍。(本文来源于《西北大学》期刊2001-12-01)

色谱饼论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文探索了粒径小于2微米(亚2μm)无孔硅胶在色谱快速分离中的应用。将高效的亚2μm无孔硅胶色谱介质装填在色谱饼中,在数分乃至数秒内对整体蛋白进行了快速分离。随着色谱填料粒径的减小,柱效会随而增大;若将如此小粒度色谱介质装填入色谱柱,可以获得比其他填料所能达到的更高的柱效,但会产生很高的反压,以致无法在常规液相色谱仪上操作;因色谱饼的内径远大于柱长,即使装填极小颗粒的色谱填料和在高的流速条件下,其柱压仍然很低;在保持高柱效的同时,能够实现大幅度减小分析时间的目的。在实验中合成了基于亚2μm无孔硅胶微球的反相和疏水填料,并且用一系列不同规格的色谱饼进行了测试,在常规高效液相色谱仪上实现了整体蛋白的快速分离。论文讨论了从亚2μm无孔硅胶的合成到蛋白的快速色谱分离等相关内容,共分为以下五个部分。1.绪论。对高效液相色谱中新近出现的快速分离方法进行了综述,并介绍了各种方法的优缺点,如超高压液相色谱、色谱饼、整体柱和高温快速色谱等。引用了50篇文献,其中近3年来的新文献占42%。2.亚微米和微米级无孔硅胶填料的制备及表征。详细地介绍了亚微米和微米级无孔硅胶填料的制备方法,并结合自己实验室的条件,合成了单分散性较好的亚2μm无孔硅胶,并进一步对硅胶进行化学改性,制备了反相和疏水两种色谱填料。应用光学显微镜、电子扫描显微镜和激光粒度分布仪对合成的硅胶和填料进行表征。通过对比发现自己合成的硅胶粒径大小以及表面情况与商品硅胶相似。可以看出无孔硅胶和多孔硅胶表面明显不同,同样放大倍数下无孔硅胶的表面是光滑的。3.亚2μm无孔硅胶基质反相固定相的制备及其在色谱饼蛋白快速分离中的应用。将合成亚2μm无孔硅胶基质C18填料装填入不同规格的色谱饼,在常规色谱仪上对七种整体蛋白进行了快速分离,分析时间只用了48秒。对比了以商品无孔硅胶和自己合成的硅胶分别为载体的C18反相填料对蛋白的分离效果,发现自己合成的硅胶填料的性能不差于商品硅胶。4.2.5μm无孔聚合物基质正丁基疏水固定相在色谱饼蛋白快速分离中的应用。将2.5μm无孔聚合物基质正丁基疏水填料装填入不同规格的色谱饼,在10ml/min的流速下,于1分钟内对七种整体蛋白进行了快速完全分离,柱压未超过20MPa。同时还对整体蛋白进行了连续多次快速分离,表明色谱饼可实现柱床的快速再生。考察了条件塔板高度及分离度与流速间的关系,发现随着流速的增大,柱效也随着增大。5.亚2μm无孔硅胶基质聚乙二醇600疏水固定相的制备及其在色谱饼蛋白快速分离中的应用。合成了粒径分别为630纳米、650纳米及1微米的硅胶微球,对其用聚乙二醇600进行化学改性,然后装填入不同规格的色谱饼,对整体蛋白混合物进行了高效、完全分离,分析时间为2分钟或更短(48秒);用条件塔板高度及分离度分别对流速作图,发现随着流速的增大,柱效也随之增大。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

色谱饼论文参考文献

[1].白泉,耿信笃.蛋白折迭液相色谱及色谱饼[C].全国生物医药色谱及相关技术学术交流会(2012)会议手册.2012

[2].闵一.亚2μm无孔硅胶填料的制备及用其在色谱饼上进行蛋白快速分离[D].西北大学.2011

[3].李瑛,白泉,陈刚,王骊丽.疏水型色谱饼对人血清蛋白质组学样品的快速分离与制备[J].色谱.2008

[4].李瑛.色谱饼对人血清蛋白质组学样品的制备及胰腺癌肿瘤标志物的筛选[D].西北大学.2008

[5].白泉,刘建波,耿信笃.疏水型色谱饼对重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的复性并同时纯化研究[C].首届中国中西部地区色谱学术交流会暨仪器展览会论文集.2006

[6].严坤平.色谱饼的优化设计及其在生物工程中的应用[D].西北大学.2004

[7].姚文兵,吴丹,耿信笃.分析型色谱饼对人血清白蛋白的快速纯化[J].色谱.2004

[8].姚文兵.色谱饼对生物大分子的快速纯化[D].西北大学.2003

[9].李翔,张养军,耿信笃.半制备型色谱柱与色谱饼性能的比较[J].色谱.2002

[10].张养军.制备型色谱饼的理论、性能及应用研究[D].西北大学.2001

论文知识图

疏水色谱饼分离不同上样量血清...采用(a)色谱饼和(b)色谱柱进行...一1色谱饼对6种标准蛋白的色谱分...疏水型色谱饼分离7种标准蛋白质...PEG200-STHIC半制备色谱饼富集...PEG200-STHIC半制备色谱饼分离...

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色谱饼论文_白泉,耿信笃
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