导读:本文包含了真皮成纤维细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,纤维,真皮,皮肤,活性氧,创面,基质。
真皮成纤维细胞论文文献综述
陈心馨,罗安玲,李佳洛,郑有丽,丛峰松[1](2019)在《蚌肉多糖提取物抗UVB致人真皮成纤维细胞损伤的研究》一文中研究指出利用人真皮成纤维细胞(HDF-a)和中波紫外线(306 nm)建立皮肤光损伤模型,以该模型考察蚌肉多糖提取物(HCP)抵御光损伤的能力,分别对其抑制氧化损伤和炎症损伤的功效进行评价。结果显示:质量浓度为0.1,1和10 g/L的HCP能显着提高光损伤HDF-a的存活率,最高可达86.63%;在抑制氧化损伤方面,HCP能有效提高细胞内SOD活性和GSH含量并降低MDA含量,增强细胞清除自由基的能力;在舒缓炎症方面,HCP能阻断NF-κB信号通路,从而抑制IL-6等炎症因子的释放。(本文来源于《日用化学工业》期刊2019年10期)
任捷,马莉,严淑贤[2](2019)在《杜仲提取液对紫外线照射下真皮成纤维细胞保护作用的研究》一文中研究指出目的:研究紫外线(UV)照射对真皮成纤维细胞功能的影响,观察杜仲提取液对紫外线照射下细胞的保护作用。方法:体外培养人真皮成纤维细胞接收长波紫外线或中波紫外线照射,同时加入杜仲提取液,检测细胞存活率,基质金属蛋白酶(MMP)-1和3的mRNA表达,以及Ⅰ型、Ⅲ型前胶原蛋白表达水平。结果:与未照射组相比,20J/cm~2UVA1和40mJ/cm~2UVB照射组可显着抑制细胞存活率、增加MMP-1和MMP-3mRNA水平、抑制Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白表达水平(P<0.01)。照射同时加入1mg/ml杜仲提取液可以显着减少UVA1或UVB照射对细胞引起的上述改变(P<0.05)。结论:杜仲提取液对UV照射所致真皮成纤维细胞的增殖损伤、胶原合成和分解代谢紊乱有保护作用,因而可以应用于防治皮肤光老化。(本文来源于《中国美容医学》期刊2019年10期)
章毅,陈侃俊,伍婷,祁成,金魏名[3](2019)在《人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响》一文中研究指出目的探讨人脐带间充质干细胞(huc MSCs)对人真皮成纤维细胞(HDFib)增殖与细胞外基质相关基因表达的影响及其可能机制。方法采用II型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备huc MSCs,用流式细胞术鉴定P_3代huc MSCs表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞叁向分化能力鉴定;随后与P_3代HDFib进行transwell共培养,对照组transwell小室上添加等量培养基,观察24、48和72 h时两组HDFib的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,q RT-PCR法测定培养24和48h时HDFib主要细胞外基质蛋白collagenI、elastin、fibronectin、MMP-1和细胞信号转导相关基因PI3K、Akt、p38和caspase3 mRNA表达水平。结果制备获得的hucMSCs呈典型成纤维细胞样并贴壁生长,其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为96.97%、99.75%和99.81%,诱导培养16d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。huc MSCs共培养处理24、48和72 h,HDFib细胞存活率较对照组分别显着增加了7.29%(P<0.01)、25.82%(P <0.05)和11.74%(P <0.05),与形态学观察结果一致。q RT-PCR结果显示,huc MSCs共培养处理24h,HDFib elastin和fibronectin基因表达分别上调为对照组的1.45倍(P <0.01)和1.30倍(P <0.05),PI3K mRNA水平上调为对照组的1.19倍(P <0.05);共培养48 h时,collagen I、elastin、fibronectin和PI3K、Akt分别上调2.60倍(P<0.001)、3.66倍(P <0.05)、3.45倍(P <0.01)和1.43倍(P <0.05)、1.65倍(P <0.05),MMP-1、p38和caspase3转录水平显着降低至对照组的0.70倍(P <0.01)、0.60倍(P <0.01)和0.86倍(P <0.05)。结论 huc MSCs能够显着促进正常HDFib增殖,同时提高HDFibI型胶原、弹性蛋白和纤维粘连蛋白转录水平,是理想的皮肤组织工程学种子细胞。hucMSCs对HDFib细胞外基质的调节作用可能与激活HDFib皮肤创伤修复信号通路PI3K/Akt、下调细胞外基质调节基因p38、凋亡基因caspase3的m RNA水平有关。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2019年03期)
焦玲帅,陈一波,杨铭,董书维,代解杰[4](2019)在《人类巨细胞病毒感染树鼩原代真皮成纤维细胞诱导凋亡特性》一文中研究指出人类巨细胞病毒(HCMV)流行广泛,危害严重,由于其严格的物种特异性限制,动物模型缺乏,严重阻碍了对其致病机制的研究及药物、疫苗的研发。本研究对树鼩(Tupaia belangeri)来源的原代真皮成纤维细胞感染HCMV后的细胞死亡现象进行了初步探索。首先,观察了感染后细胞病变和死亡情况,使用细胞增殖检测试剂盒测定了细胞活力;其次,对凋亡相关因子bax、bcl-2和未折迭蛋白反应相关因子chop、atf4、xbp1s转录水平的差异进行了逆转录荧光定量PCR检测与分析;然后利用免疫蛋白印迹技术检测并分析了主要病毒蛋白IE1、UL44和凋亡相关因子Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP的表达水平;最后结合膜联蛋白-V和碘化丙啶双染色法从生物化学角度对细胞死亡类型进行了鉴定。结果显示,细胞病变和死亡情况随着感染进程逐渐严重,细胞活力下降明显(P <0.001)。感染上调bax、bcl-2、chop、atf4、xbp1s转录水平并且使bax与bcl-2转录水平呈明显拮抗趋势;感染同时上调Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表达和逐级剪切激活;病毒蛋白IE1、UL44可以上调至一个完整的病毒复制周期结束。综上,本研究指出HCMV跨物种感染树鼩原代真皮成纤维细胞可诱导细胞凋亡,并且与内质网和线粒体密切相关。(本文来源于《动物学杂志》期刊2019年03期)
韩士超,张健,李珍珍,陶克,胡大海[5](2019)在《TNFα诱导蛋白3在人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化中的作用及机制》一文中研究指出目的探究TNFα诱导蛋白3(A20蛋白)在人真皮成纤维细胞(Fb)向肌成纤维细胞(MFb)表型转化中的作用及机制。方法通过酶消化法分离培养原代人正常皮肤Fb(NFb)和瘢痕皮肤Fb(HFb),取对数生长期3~5代细胞进行试验,转化生长因子-β(TGF-β)刺激Fb模拟Fb向MFb转化过程,采用细胞转染敲除Fb中A20的表达,qRT-PCR、Western blot检测Fb中A20、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、p-Smad 2等变化。结果与NFb相比,HFb中A20低表达(P <0. 05); TGF-β刺激Fb后,A20表达显着降低(P <0. 05),ColⅠ、ColⅢ及α-SMA等纤维化相关分子表达显着升高(P <0. 05),p-Smad 2表达显着升高(P <0. 05);敲除Fb中的A20,可进一步促进TGF-β诱导的ColⅠ、ColⅢ及α-SMA等纤维化相关分子及p-Smad 2表达的升高(P <0. 05)。结论 A20蛋白参与了人真皮Fb向MFb表型转化的过程,并通过抑制Smad信号通路的活化,对TGF-β所介导的转化效应起负性调控作用。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2019年04期)
陈俊印[6](2019)在《浓缩生长因子抑制UVA诱导人真皮成纤维细胞光损伤的实验研究》一文中研究指出目的:通过长波紫外线(Ultraviolet A)反复照射人皮肤成纤维细胞建立细胞光损伤模型,将富自体浓缩生长因子(Concentrated Growth Factors,CGF)用于细胞光损伤模型中。探讨CGF对长波紫外线照射后成纤维细胞的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、细胞增殖与迁徙的影响。方法:1.人皮肤成纤维细胞的培养及鉴定切取河北医科大学第叁医院的患者正常背部皮肤组织,患者年龄在25-30岁之间。本研究经河北医科大学口腔医院伦理委员会批准。组织块培养法原代培养。取第叁代的细胞,采用鼠抗人波形蛋白单克隆抗体、鼠抗角蛋白单克隆抗体、Ⅲ型胶原多克隆抗体对细胞进行鉴定。2.CGF培养液制备用专用绿色真空采血管采取志愿者的静脉血,立即置入Medifuge离心机中,经过离心处理后,吸管吸出液态CGF。CGF经冷冻与过滤处理后,加入细胞培养液(10%胎牛血清和90%DMEM)配制成4种浓度CGF完全培养液:5%、10%、15%和20%。3.UVA处理取对数生长期的成纤维细胞,使用光谱范围为320-400 nm UVA台式仪、以照射剂量为18J/cm~2对成纤维细胞进行照射,常规细胞培养24h、48h、72h后MTT法分别对正常和照射细胞的吸光度值进行检测,确定成纤维细胞光损伤。4.CGF应用浓度筛选细胞照射后,分别向照射后的细胞加入5%、10%、15%和20%的CGF完全培养液和细胞培养液培养,分别于24h、48h、72h,使用MTT法在490 nm波长条件下分别对各组细胞的吸光度值进行检测。各浓度组设7个平行试样,计算各组吸光度均值(以x±s表示)。确定CGF应用浓度。5.实验分组对照组:不接受UVA照射、常规细胞培养液培养。光损伤组:以照射剂量为18J/cm~2的UVA对成纤维细胞进行照射,常规细胞培养液培养。CGF处理组:以照射剂量为18J/cm~2的UVA对成纤维细胞进行照射,5%CGF完全培养液培养。6.检测含有活性氧簇的细胞量采用DCFH-DA对各组细胞进行标记,荧光显微镜暗视野下对含有ROS的细胞随机拍摄计数,具体操作按ROS试剂盒操作说明进行。7.细胞SOD活力检测叁组成纤维细胞培养24h,取叁组细胞的培养上清液,采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定SOD活力。具体操作过程按照南京建成生物工程研究所生产的超氧化物歧化酶试剂盒操作说明进行。所有的数据用每毫升SOD单位活力(U/ml)表示。8.划痕实验在3组细胞培养达到90-100%的融合后,用20ul移液管末端在细胞培养板形成划痕。继续培养24、48、72、96h,观察成纤维细胞迁移至划痕区,并拍照测量。用划痕试验来测量成纤维细胞的迁移能力。9.统计学分析应用SPSS 21.0软件进行统计学分析,应用单因素方差分析和SNK-t检验比较叁组数据,P<0.05有统计学意义。结果:1.人皮肤成纤维细胞的培养及鉴定原代培养5-7天后,细胞从组织块中迁移出,长梭形,2-3个突起,胞体丰满,胞浆均匀,胞核圆或卵圆形,核仁大。9-13天后,细胞在组织块中心周围成放射状。当细胞融合率达到70-80%时,细胞进行传代培养。取第3代细胞进行免疫组织化学鉴定:抗III型胶原和抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,确定为人皮肤成纤维细胞。2.成纤维细胞光损伤的确定24h、48h、72h,光损伤组与对照组的OD值有统计学差异(P<0.05),表明18J/cm~2的UVA照射剂量可对成纤维细胞造成光损伤。3.最适CGF浓度筛选24h、48h,5%CGF浓度组与其他各组的OD值均有统计学差异(P<0.05),5%CGF浓度组OD值最高。确定5%为CGF应用浓度。4 CGF对UVA处理成纤维细胞的细胞存活率影响CGF培养24h后,两组细胞存活率均值(以x±s表示):光损伤组,0.4482±0.0603;CGF处理组,0.601±0.035;两组吸光度值有统计学意义(P<0.05)。CGF培养48h后,两组细胞吸光度均值(以x±s表示):光损伤组,0.6748±0.0918;CGF处理组,0.7457±0.2513;两组吸光度值之间均有统计学意义(P<0.05)。5.CGF减少了UVA照射后含ROS的细胞量对照组、光损伤组、CGF处理组含ROS细胞数量分别为:3.3333±1.8028、65.5556±3.3582、22.7778±2.4381,具有统计学意义(P<0.05)。6.细胞SOD活力检测每组含SOD单位活力(以x±s表示):光损伤组,CGF处理组和对照组的SOD(U/ml)分别为22.4725±1.2656,31.8462±2.3332,37.1833±2.5315;叁组SOD(U/ml)有统计学意义(P<0.05)。7.划痕实验加入CGF培养24h,叁组细胞迁徙率(以x±s表示):光损伤组,CGF处理组和对照组的迁徙率分别为2.35±0.84%,74.9±3.17%,62.07±4.23%;叁组细胞迁徙率值有统计学意义(P<0.05)。结论:1.UVA照射可对成纤维细胞造成光损伤。2.CGF可提高光损伤成纤维细胞的SOD含量、降低ROS含量,对UVA照射所致成纤维细胞光损伤具有一定的抑制作用。3.CGF可提高光损伤成纤维细胞活性,具有一定的促增殖、迁徙作用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2019-03-01)
Tan,Pohching,周双白,李青峰[7](2019)在《不同亚型的真皮成纤维细胞在皮肤再生发育与稳态维持中作用的研究进展》一文中研究指出真皮层成纤维细胞分为两种不同的亚型,即真皮浅层的乳头状成纤维细胞(Papillary Fibroblasts,Fp)与真皮深层的网状成纤维细胞(Reticular Fibroblasts,Fr),在细胞功能、分化潜能等方面均存在明显差异,在创伤愈合、毛囊形成与再生以及皮肤老化中的作用亦有不同。本文对两种细胞的形态、功能、来源、分化及特异性表达等方面的不同,以及两者在皮肤再生与稳态维持中的作用进行综述。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2019年01期)
尚颖,赵丽丽,席雯,温广东,高占成[8](2018)在《成人真皮成纤维细胞原代培养及鉴定》一文中研究指出目的探讨建立成人真皮成纤维细胞原代培养方法。方法新鲜皮肤组织用分散酶Ⅱ(dispaseⅡ)消化,分离上皮和真皮层,分别采用组织块法和Ⅰ型胶原蛋白酶消化法分离真皮层成纤维细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性绘制生长曲线,流式细胞术检测细胞周期分布。结果培养48 h,经胶原蛋白酶分离得到的成纤维细胞95%以上贴壁,同时细胞开始从组织块边缘贴壁延伸生长。培养5 d时,组织块周围有大量细胞贴壁增殖。细胞生长迅速,第7天,增殖细胞层铺满培养皿。组织块法分离的成纤维细胞中可混杂少量上皮细胞团,而胶原蛋白酶消化法分离的细胞波形蛋白阳性率接近100%,几乎均为成纤维细胞。结论胶原蛋白酶消化和组织块法均是快速、经济、有效获取真皮成纤维细胞的方法。胶原蛋白酶消化法可以更有效避免上皮细胞污染,分离的真皮成纤维细胞有较好的增殖能力。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年09期)
常铭洋,陈志强,柳娟,闫舫,季守平[9](2018)在《异种(猪)脱细胞真皮基质粉对表皮细胞和成纤维细胞的促进作用》一文中研究指出目的观察冷冻研磨获得的脱细胞真皮基质粉(ADMP)生物学性状,探索高纯度且保留生物活性的异种(猪)ADMP对表皮细胞和成纤维细胞生长的支持及在皮肤创伤修复中的应用。方法选取幼龄长白猪背部皮肤,经生物酶法脱细胞、冷冻干燥后经过不同冷冻研磨程序得到异种(猪)ADMP,再由60钴辐照获得无菌异种(猪)ADMP;通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察异种(猪)ADMP颗粒大小及胶原形态,确定适合应用的研磨程序;通过MTT法检测Ha Ca T细胞和BJ人皮肤成纤维细胞在不同浓度异种(猪)ADMP包被下的黏附作用,确定异种(猪)ADMP实现细胞最大黏附的浓度范围;DMEM培养液基添加异种(猪)ADMP为实验组,单纯DMEM培养液基为对照组,使用实时细胞分析技术分析BJ人皮肤成纤维细胞迁移指数,验证异种(猪)ADMP对成纤维细胞的促迁移作用;原代表皮细胞接种在异种(猪)ADMP培养液8 d,绘制增殖曲线,检测异种(猪)ADMP对原代表皮细胞的促增殖作用,同时免疫荧光检测原代表皮细胞表面成熟与分化蛋白的表达。对数据进行Student's t-检验。结果 1、2、3、5、7、10次循环研磨获得异种(猪)ADMP,肉眼可见全部为白色、无块状,其中1、2、3次循环呈较粗颗粒;5、7、10次循环呈现集中均匀趋势,粒径分布在0~12μm之间。其中5次循环粒径(13.00±2.10)μm与7次循环[(6.00±0.96)μm比较,差异有统计学意义(t=6.093,P=0.0002)。异种(猪)ADMP透射电子显微镜下发现,不同循环次数获得的异种(猪)ADMP均能保留大量胶原分子。BJ人成纤维细胞和Ha Ca T细胞随包被浓度的增加,细胞黏附作用不断增强,浓度高于750μg/cm2,无明显变化。实时细胞分析技术检测BJ人皮肤成纤维细胞在DMEM培养液基对照组培养液72 h后的迁移指数为1.21±0.10,而异种(猪)ADMP培养液基试验组的迁移指数为3.66±0.11,两组比较差异有统计学意义(t=22.24,P=0.002)。在异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞形态统一增殖迅速,对照组出现一定比例的分化细胞,试验组与对照组第5天细胞数分别为(4.11±0.28)×105、(1.10±0.12)×105个,两组比较差异有统计学意义(t=13.51,P=0.005);第8天细胞数分别为(5.00±0.48)×105、(3.05±0.30)×105个,两组比较差异有统计学意义(t=4.87,P=0.039),增殖曲线显示试验组在接种即日培养液至第5天,一直处于指数增长期。荧光染色中异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞E-cad全部表达,少量表达角蛋白10,整合素α6几乎全部强阳性,角蛋白14全部表达并有部分强阳性,Ki-67抗原表达率高。结论通过生物酶解和冷冻研磨获得的异种(猪)ADMP对参与皮肤创伤修复最重要的表皮细胞和成纤维细胞,具有促进其增殖和迁移的作用,未来可进一步应用于皮肤创伤修复。(本文来源于《中华损伤与修复杂志(电子版)》期刊2018年04期)
陈玉琪,李刚,林婷婷,朱雯婧,杨斯琪[10](2018)在《成年中华田园犬真皮成纤维细胞原代培养方法的改进》一文中研究指出犬皮肤成纤维细胞是研究创伤愈合的重要试验模型,其培养方法还不甚成熟。试验旨在通过参考已有的皮肤成纤维细胞培养方式,经过优化、改进,建立高效稳定的犬真皮成纤维细胞原代培养方法。结果表明采用0.2%Ⅱ型胶原酶一步消化14 h方法最合适犬皮肤成纤维细胞的培养,原代细胞培养48 h后即可贴壁,5 d即可基本铺满培养皿底,经消化后传代细胞基本可做到纯化,细胞特异性标记染色显示叁代传代细胞表现为纤维连接蛋白及波形蛋白阳性,角蛋白阴性,细胞存活率95%,细胞培养效率100%。冻存细胞复苏后生长曲线无明显变化。该方法可用于相关试验的研究。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2018年07期)
真皮成纤维细胞论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:研究紫外线(UV)照射对真皮成纤维细胞功能的影响,观察杜仲提取液对紫外线照射下细胞的保护作用。方法:体外培养人真皮成纤维细胞接收长波紫外线或中波紫外线照射,同时加入杜仲提取液,检测细胞存活率,基质金属蛋白酶(MMP)-1和3的mRNA表达,以及Ⅰ型、Ⅲ型前胶原蛋白表达水平。结果:与未照射组相比,20J/cm~2UVA1和40mJ/cm~2UVB照射组可显着抑制细胞存活率、增加MMP-1和MMP-3mRNA水平、抑制Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白表达水平(P<0.01)。照射同时加入1mg/ml杜仲提取液可以显着减少UVA1或UVB照射对细胞引起的上述改变(P<0.05)。结论:杜仲提取液对UV照射所致真皮成纤维细胞的增殖损伤、胶原合成和分解代谢紊乱有保护作用,因而可以应用于防治皮肤光老化。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
真皮成纤维细胞论文参考文献
[1].陈心馨,罗安玲,李佳洛,郑有丽,丛峰松.蚌肉多糖提取物抗UVB致人真皮成纤维细胞损伤的研究[J].日用化学工业.2019
[2].任捷,马莉,严淑贤.杜仲提取液对紫外线照射下真皮成纤维细胞保护作用的研究[J].中国美容医学.2019
[3].章毅,陈侃俊,伍婷,祁成,金魏名.人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响[J].中国医药生物技术.2019
[4].焦玲帅,陈一波,杨铭,董书维,代解杰.人类巨细胞病毒感染树鼩原代真皮成纤维细胞诱导凋亡特性[J].动物学杂志.2019
[5].韩士超,张健,李珍珍,陶克,胡大海.TNFα诱导蛋白3在人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化中的作用及机制[J].中国医师杂志.2019
[6].陈俊印.浓缩生长因子抑制UVA诱导人真皮成纤维细胞光损伤的实验研究[D].河北医科大学.2019
[7].Tan,Pohching,周双白,李青峰.不同亚型的真皮成纤维细胞在皮肤再生发育与稳态维持中作用的研究进展[J].组织工程与重建外科杂志.2019
[8].尚颖,赵丽丽,席雯,温广东,高占成.成人真皮成纤维细胞原代培养及鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2018
[9].常铭洋,陈志强,柳娟,闫舫,季守平.异种(猪)脱细胞真皮基质粉对表皮细胞和成纤维细胞的促进作用[J].中华损伤与修复杂志(电子版).2018
[10].陈玉琪,李刚,林婷婷,朱雯婧,杨斯琪.成年中华田园犬真皮成纤维细胞原代培养方法的改进[J].畜牧与兽医.2018