导读:本文包含了固定化酶微反应器论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:反应器,毛细管,电泳,石墨,糖苷酶,在线,胰蛋白酶。
固定化酶微反应器论文文献综述
刘心[1]（2019）在《基于多孔层开管毛细管柱的固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用》一文中研究指出固定化酶微反应器(IMERs)是将生物酶分子的固定化技术与微通道内生物酶反应相结合而制备的一类酶反应系统。基于开管毛细管柱的固定化酶微反应器不仅兼具酶的高选择性催化、可重复使用及微通道分析的低试剂消耗、易分离等优点,而且微反应器制备简单,操作方便,易于与其它分析设备相连接,使其在生命科学如酶反应动力学、抑制剂的筛选、蛋白质组学以及生物催化等领域得到广泛的应用。对于如何提高固定化酶微反应器的性能,包括催化效率和稳定性等,毛细管柱内的酶固定化技术至关重要,也是目前相关研究领域备受关注的研究方向。与毛细管固定化酶微反应器相对应,毛细管色谱柱的制备是毛细管电色谱高效分离分析的核心部分,也是电色谱理论和应用研究的重点,对毛细管电色谱技术的发展起着举足轻重的作用,目前已经成为一种迅速发展起来的新兴技术。本论文围绕新型开管毛细管柱在固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用,展开了以下研究工作:1、提出了基于叁维多孔层开管毛细管柱(3D-PLOT)的开管毛细管固定化酶微反应器,并成功应用于标准蛋白在线水解以及HeLa细胞的蛋白组学研究。我们通过简单易控的原位一步两相合成法,实现了石英毛细管内表面的多孔层修饰。获得的多孔层形貌高度均匀、孔隙分布窄,同时极大增大了微通道内表面积,增加了酶负载量。和未经修饰的毛细管微反应器相比,3D-PLOT修饰提高了酶反应效率、缩短了分析时间,获得了更优异的稳定性和重现性。以胰蛋白酶为例,我们系统分析了制备的3D-PLOT-IMER的性能。通过将3D-PLOT-IMER与nano-LC-MS/MS系统在线联用,成功用于标准蛋白在线水解、HeLa细胞提取液以及活细胞的在线分析,证明了利用所提出的叁维多孔层进行表面修饰是一种简单有效的酶固定方法,可广泛应用于不同类型的IMERs。2、建立一种基于多孔层表面改性毛细管的新型毛细管电泳-固定化酶微反应器在线联用技术(CE-IMER),应用于乙酰胆碱酯酶(AChE)在线酶分析及蔬菜中有机磷检测。我们借助原位一步两相反应,在毛细管端头内表面修饰了高度均匀的多孔层,并在所制备的多孔层修饰的开管毛细管柱上通过层层自组装(LBL)固定AChE。毛细管的其余部分用作CE分离分析通道。酶反应底物流经酶反应器时,在线酶催化反应生成产物,底物随后在电泳的作用下与固定化酶分离而终止反应,产物和剩余底物在后续电泳中实现分离和在线检测。实验结果证明,提出的CE-IMER具有良好的稳定性和重现性,保证了在线酶分析的可靠性和准确性。同时,多孔层修饰大大增大了毛细管内比表面积,有效提高了酶的负载量,从而提高酶反应效率、缩短了分析时间。CE-IMER成功应用于小白菜汁样品中有机磷农药的检测,显示出在实际样品分析中潜在的应用价值。本研究工作为使用CE在线酶分析提供了一种简单高效的方法,显示了其在生物分析中的重要价值。3、发展了一种基于高度均匀多孔层表面修饰的毛细管色谱柱的新型毛细管电色谱(CEC)方法。我们基于以上工作所提出的毛细管内壁多孔层修饰方法,在50μm内径的石英毛细管中修饰厚度约为240 nm的均匀的多孔层表面。以萘和联苯的混合物为试验样品,系统研究了制备的PLOT柱作为毛细管电色谱柱的色谱性能,证明该PLOT色谱柱具有良好的分离效率,稳定性及重现性。无需进行任何进一步修饰,该PLOT色谱柱成功应用于叁种不同类型样品的高效分离分析:胰蛋白酶水解蛋白(溶菌酶和牛血清蛋白)的多肽产物、β-阻断剂(碱性样品)和多环芳烃(中性样品)。研究结果表明,该PLOT色谱柱制备简单,柱效高,多孔层修饰提高了相比和柱容量,增加了电色谱分析中固定相和样品之间的相互作用,因此显着提高了CEC的分离效率。我们所发展的PLOT色谱柱对于分析各种不同类型样品显示了潜在的应用价值。4、建立了基于毛细管电泳技术-离子液体分散液相微萃取的尿液中毒品的检测方法。我们利用离子液体分散液相微萃取技术,以1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体为萃取剂,结合毛细管电泳技术,实现尿液中痕量毒品(麻黄碱和氯胺酮)的高效富集及分离检测。在优化条件下,麻黄碱和氯胺酮在0.10-10 mg/L范围内具有良好的线性关系,尿液中的检出限分别为0.21和0.39 mg/mL,加标回收率为79%-90%。该方法具有低消耗、操作简单、富集效率高、检测灵敏、干扰小等特点,适用于生物检材中痕量毒品的分析检测。(本文来源于《东北师范大学》期刊2019-05-01）
张艳梅,李凤,赵晓燕,赵志勇,周昌艳[2]（2019）在《基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备》一文中研究指出制备了一款开管式乙酰胆碱酯酶(ACHE)毛细管酶微反应器。该制备方法中,首先在毛细管内壁修饰上末端带有双键的硅烷化试剂,再采用N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺作为功能单体,通过自由基聚合将其修饰在毛细管内壁上,最后通过共价键合的固定化方式,十分简便地实现了毛细管内壁的ACHE固定化。测试连续制备的6个ACHE酶微反应器,其产率的相对标准偏差(RSD)在3%以下;制备的ACHE酶微反应器在1 min孵育时间里的产率高达45%左右,可以较快进行酶活测试,每次分离仅需2. 5 min,10 h内重复使用40次后仍然能够保持酶活性,表明制备的ACHE酶微反应器具有较好的重复利用性和较高的酶活性。(本文来源于《分析试验室》期刊2019年04期）
刘心,孙树成,胡晓彤,杨丽[3]（2017）在《新型固定化酶微反应器研究及应用》一文中研究指出作为生物体内活细胞产生的一种生物催化剂,生物酶支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等很多反应过程,对生物酶活性及催化反应或抑制反应动力学实现快速准确而有效地测定,对于理解生物反应过程,药物研发以及疾病诊治等领域都具有重要意义。通过吸附、包埋、键合等方法将酶固定于合适载体,制备固定化酶微反应器,可有效地提高酶稳定性和可利用性,同时降低分析时间,减少样品消耗,在生物酶在线分析以及抑制剂筛选等研究中受到越来越多的关注。(本文来源于《第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集》期刊2017-05-19）
刘华[4]（2017）在《仿生纳米涂层强化固定化酶稳定性及其用于微反应器构建》一文中研究指出仿生纳米涂层是指受自然界生命现象、原理等启发,在温和条件下(常温、常压、中性pH)制备的纳米涂层。由于仿生纳米涂层形成条件温和、结构可控,可为酶分子提供良好的物理化学微环境。本研究针对工业酶催化过程中固定化酶稳定性较差、产物难以连续合成等问题,将仿生纳米涂层引入固定化酶制备过程中,有效提升了固定化酶稳定性,进而构建了填充床式微反应器,实现了酶促合成6-氨基青霉烷酸的连续、高效进行。主要研究内容如下:第一部分,基于多巴胺仿生涂层对堇青石蜂窝陶瓷表面修饰,固定青霉素G酰化酶(PGA),并构建固定化酶微反应器。聚多巴胺中儿茶酚基/醌基与酶分子共价结合,提高PGA的稳定性。在40 ~oC反应条件下反应195 min后,PGA/聚多巴胺/堇青石仍保持84.01%的初始酶活。第二部分,以多巴胺修饰的堇青石蜂窝陶瓷为载体固定化PGA,利用该涂层诱导正硅酸乙酯(TEOS)和3-氨丙基叁乙氧基硅烷(APTES)在其表面进行水解缩聚,形成有机硅纳米涂层,进而构建固定化酶微反应器。有机硅纳米涂层能有效保护酶分子,提高其结构稳定性。在极端pH条件下(pH 6.0和pH 10.0)均表现出良好催化活性。在40 ~oC下反应195 min后保持89.72%初始酶活。经过15次循环,有机硅/PGA/聚多巴胺/堇青石的活性仍能保持73.05%初始酶活。第叁部分,利用AB-8大孔树脂物理吸附PGA,随后利用单宁酸(TA)和钛(IV)配位在其表面涂覆TA-Ti~(IV)涂层。TA-Ti ~(IV)纳米涂层的多羟基基团有效提高了树脂表面亲水性、网络结构有效防止了酶泄露并提升了极端条件下固定化酶稳定性。储存68天后,TA-Ti ~(IV)-capped PGA@Resins仍有103.7%初始酶活;循环20次后,仍有81.51%初始酶活。(本文来源于《天津大学》期刊2017-05-01）
刘佳,申刚义[5]（2016）在《基于氧化石墨烯的固定化酶微反应器的性能初探》一文中研究指出固定化酶微反应器实现了酶的可重复利用和样品的微量低耗高效快速分析,而固酶载体性能对于制备高效固定化酶反应器至关重要。寻找和发展合适的酶固定载体一直是CE-固定化酶微反应器研究的重点~([1-2])。本工作以纳米材料氧化石墨烯为基质,通过物理吸附法制备了毛细管氧化石墨烯电色谱。与裸管相比,可大大提高样品的分离效率。在此基础上制备了柱头酶微反应器。实验以胰蛋白酶微反应器(Fig.1)为例,初步考察了酶固定化时间、孵化时间、酶固定层数等对酶反应器活性及稳定性的影响。测得的固定化酶的K_m=1.51mM,与自由酶基本一致,表明氧化石墨烯基质利于酶活性的保持。该工作为探索以石墨烯为代表的新型固酶基质的研究提供了思路。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第四分会：生物分析和生物传感》期刊2016-07-01）
刘冬梅,陈娟,师彦平[6]（2016）在《毛细管固定化酶微反应器用以α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学和抑制反应动力学研究》一文中研究指出固定化酶是指将游离酶与某些不溶于反应体系的固体材料相结合,限制其在特定的区域内进行酶促反应,并使酶能够回收及重复使用的技术。毛细管酶微反应器(capillary immobilized enzyme microreactor,CIMER)[1]是固定化酶的一种形式,以毛细管为载体,将酶固定于毛细管内壁进行酶(本文来源于《中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨仪器展览会论文集》期刊2016-04-22）
刘丽娜,田苗苗,郭黎平,杨丽[7]（2015）在《基于颗粒填充技术的毛细管电泳-固定化酶微反应器的研究》一文中研究指出近年来,以毛细管电泳技术为基础的固定化酶微反应器逐渐发展成为在线酶反应体系的一个有力研究平台。相对于自由酶,固定化酶微反应器具有稳定性好、可重复利用、选择性高、以及样品消耗少等优势。在酶反应研究、蛋白质组学及酶抑制剂筛选等领域,发展毛细管电泳与固定化酶微反应器连用技术已成为一个热点话题。(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第叁分册）》期刊2015-04-19）
徐田,张宁,赵超,宋媛媛,尹俊发[8]（2015）在《级联固定化酶微反应器的制备及用于DNA损伤分析》一文中研究指出DNA损伤与癌症的发生有着重要的联系[1],对DNA损伤产物进行分析鉴定对研究环境污染物与人类疾病发生的关系具有重要意义。将DNA样品酶解并进行质谱检测是DNA损伤分析常用的方法[2]。通常DNA样品的酶解在溶液体系中进行,需要除酶、萃取分离等过程,操作繁琐、耗时长且容易引(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第四分册）》期刊2015-04-19）
刘丽娜,尹正日,田苗苗,郭黎平,杨丽[9]（2014）在《基于氧化石墨烯的毛细管电泳-固定化酶微反应器研究》一文中研究指出建立毛细管酶微反应器实现酶分析测定(CE-固定化酶微反应器)是CE在线酶分析的一个重要手段。相对于自由酶,固定化酶微反应器具有稳定性好、可重复利用、选择性高、以及样品消耗少等优势,广泛应用于环境、医药、食品以及生物样品分析中。(本文来源于《第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会论文集》期刊2014-04-19）
申刚义,于婉婷,刘美蓉,崔勋[10]（2013）在《固定化酶微反应器的制备及应用》一文中研究指出固定化酶微反应器是将生物分子固定技术与生化微反应相结合制备的一种固定化催化装置。这种微型化的反应系统由于兼具固定化酶的特异性催化、可重复利用及微分析的低消耗、易分离等优点,在生命科学如蛋白质组学、酶抑制剂的筛选、生物催化等领域具有非常重要的作用。固定化酶微反应器的性能与其制作方法关系密切。本文着重从酶与固定化载体结合方式的角度,对近年来固定化酶微反应器的各种制备方法和应用进行了较为详细的评述。重点讨论了各种方法的优缺点和最新的发展情况,并对其发展前景进行了展望。(本文来源于《化学进展》期刊2013年07期）
固定化酶微反应器论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
制备了一款开管式乙酰胆碱酯酶(ACHE)毛细管酶微反应器。该制备方法中,首先在毛细管内壁修饰上末端带有双键的硅烷化试剂,再采用N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺作为功能单体,通过自由基聚合将其修饰在毛细管内壁上,最后通过共价键合的固定化方式,十分简便地实现了毛细管内壁的ACHE固定化。测试连续制备的6个ACHE酶微反应器,其产率的相对标准偏差(RSD)在3%以下;制备的ACHE酶微反应器在1 min孵育时间里的产率高达45%左右,可以较快进行酶活测试,每次分离仅需2. 5 min,10 h内重复使用40次后仍然能够保持酶活性,表明制备的ACHE酶微反应器具有较好的重复利用性和较高的酶活性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
固定化酶微反应器论文参考文献
[1].刘心.基于多孔层开管毛细管柱的固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用[D].东北师范大学.2019
[2].张艳梅,李凤,赵晓燕,赵志勇,周昌艳.基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备[J].分析试验室.2019
[3].刘心,孙树成,胡晓彤,杨丽.新型固定化酶微反应器研究及应用[C].第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集.2017
[4].刘华.仿生纳米涂层强化固定化酶稳定性及其用于微反应器构建[D].天津大学.2017
[5].刘佳,申刚义.基于氧化石墨烯的固定化酶微反应器的性能初探[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第四分会：生物分析和生物传感.2016
[6].刘冬梅,陈娟,师彦平.毛细管固定化酶微反应器用以α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学和抑制反应动力学研究[C].中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨仪器展览会论文集.2016
[7].刘丽娜,田苗苗,郭黎平,杨丽.基于颗粒填充技术的毛细管电泳-固定化酶微反应器的研究[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第叁分册）.2015
[8].徐田,张宁,赵超,宋媛媛,尹俊发.级联固定化酶微反应器的制备及用于DNA损伤分析[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第四分册）.2015
[9].刘丽娜,尹正日,田苗苗,郭黎平,杨丽.基于氧化石墨烯的毛细管电泳-固定化酶微反应器研究[C].第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会论文集.2014
[10].申刚义,于婉婷,刘美蓉,崔勋.固定化酶微反应器的制备及应用[J].化学进展.2013
论文知识图
