食品中甲型肝炎病毒RNA提取方法的比较及应用

食品中甲型肝炎病毒RNA提取方法的比较及应用

论文摘要

目的:对食品中甲型肝炎病毒的3种RNA提取方法进行综合比较,以优选出最佳的核酸提取方法,为各级实验室开展食源性甲型肝炎病毒核酸检验提供技术参考。方法:分别采用ABI AM1836、QIAGEN 74104和ROCHE11858882001三种商业化核酸提取试剂盒对人工污染甲型肝炎病毒的食品样品进行核酸提取,根据3种核酸提取方法的提取效率、抑制剂去除效率、检测灵敏度、综合应用指标进行病毒RNA的优化,且采用优化后的提取方法进行实际样品的检测。结果:综合病毒各项评价指标显示,ROCHE 11858882001在食品中提取甲型肝炎病毒RNA效果最优,其次为QIAGEN 74104和ABI AM1836。101份样品的检测结果显示,一份蓝靛果样品为甲型肝炎病毒核酸阳性,其余样品均为阴性。结论:ROCHE 11858882001是一种快捷有效的病毒RNA提取方法,适用于食品中甲型肝炎病毒的日常检测工作。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 人工污染样本的制备
  •     1.2.2 食品样品中病毒的富集
  •     1.2.3 病毒RNA提取方法比较
  •       1.2.3. 1 核酸提取效率的评价
  •       1.2.3. 2 抽提核酸稳定性的评价
  •       1.2.3. 3 抑制剂去除效率的评价
  •       1.2.3. 4 检测灵敏度的评价
  •     1.2.4 实时荧光RT-PCR
  •     1.2.5 实际样品检测
  •   1.3 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 RNA提取效率的比较
  •   2.2 抽提核酸的稳定性
  •   2.3 抑制剂去除效率测定结果
  •   2.4 检测灵敏度结果
  •   2.5 提取方法综合比较
  •   2.6 实际样品检测结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 冯华炜,闫平平,艾海新,李思嘉,麻丽丹,刘宏生

    关键词: 甲型肝炎病毒,提取方法,实时荧光,食品样品

    来源: 食品科学 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 辽宁大学生命科学院,大连出入境检验检疫局,辽宁省生物大分子模拟计算与信息处理工程研究中心,东港市农业综合执法大队,丹东出入境检验检疫局

    基金: 国家质检总局科研项目(2015IK167),国家自然科学基金面上项目(31570160),沈阳市科技局项目(17-231-1-04)

    分类号: TS207.4

    页码: 325-330

    总页数: 6

    文件大小: 1819K

    下载量: 238

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