导读:本文包含了单链抗体可变区片段论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,基因,噬菌体,靶向,片段,表面,免疫球蛋白。
单链抗体可变区片段论文文献综述
胡志伟,段招军,朱建高,周国华,胡锦跃[1]（1999）在《从人源单链抗体库中筛出具有抗原结合活性的重链可变区和更小抗体片段》一文中研究指出目的：用噬菌体呈现技术结合体外致敏法构建了人源单链抗体库，并用大肠癌相关抗原ＣＡＨｂ３筛选出抗大肠癌噬菌体抗体克隆ＥＬ５Ｄ、ＥＬ６Ｄ和Ｃａ１２，测定３个克隆的核苷酸序列，并研究其免疫活性。方法：采用抗体克隆扩增、测序分析、免疫组化法测定活性。结果：抗体基因插入片段分别为２２０、５００、５００ｂｐ。测序结果表明，ＥＬ６Ｄ和Ｃａ１２属ＶＨ５ＤＪＨ４，仅为ＶＨ结构亚单位，而ＥＬ５Ｄ属Ｖκ的Ｊκ１，仅为ＦＲ３ＣＤＲ３ＦＲ４结构。三者均能与人结直肠癌细胞和组织反应，与其亲本鼠源单抗Ｈｂ３的结合特性一致。３个抗体克隆已列入国际基因库，序号为ＡＦ０５１１６５ＡＦ０５１１６７。结论：短的人源抗体片段具有潜在临床应用价值。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊1999年04期）
贾松惠[2]（1997）在《重组人G-CSF免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面表达文库的构建和抗-G-CSF抗体片段及其可变区基因的鉴定》一文中研究指出粒系集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factors，G-CSF)，具有特异地刺激和调节粒细胞系统的增殖、分化、存活和活化等作用，因此在放射性损伤的救治以及肿瘤患者放化疗等方面具有良好的应用前景。但G-CSF也与体内炎症等严重病理过程中嗜中性白细胞的大量增加和激活有关。后者又可因“呼吸暴发”效应释放大量氧自由基等成份，在清除异己的同时，对自身组织也产生影响。保持体内粒细胞的动态平衡是对一些临床疾病诊治的重要环节，其中研制和应用抗G-CSF抗体也将是一个重要方面。本研究利用90年代以来发展起来的在基因工程抗体领域具有重大突破的全套噬菌体抗体表面表达技术，对抗G-CSF单链抗体(ScFv)进行了研究。从人重组G-CSF免疫的小鼠脾细胞中提取总RNA，反转录成cDNA后，用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体V_H、V_L扩增，经重迭延伸反应在体外随机装配成ScFv。将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB 5E中。电转化含Sup E的E．coli菌株，以辅助噬菌体M13KO7超感染噬菌粒文库，构建成全套ScFv基因表面表达文库。利用固相化G-CSF吸附含有特异抗体片段的噬菌体颗粒进行富集筛选。经四轮panning后，用ELISA法从噬菌体克隆中，筛选到9个具有G-CSF结合活性的完整重组噬菌粒克隆。对其中叁个阳性克隆中的ScFv基因全序列进行了核苷酸序列测定，从而获得了6个抗体可变区基因全序列。计算机分析表明它们均系新发现的鼠免疫球蛋白可变区基因。将阳性克隆感染不含Sup E的E．coli菌株，从而获得目的抗体片段的可溶性表达。用特异性ELISA、Dot blots以及G-CSF依赖细胞株抑制实验等进行活性检测，显示其均能与G-CSF特异性结合，表明所得ScFv均为G-CSF特异性抗体分子片段。 我们采用全套抗体噬菌体表面表达系统，绕过杂交瘤技术，从G-CSF免疫小鼠脾细胞mRNA出发，构建全套ScFv基因的噬菌体表面表达文库，从中获得了具有G-CSF结合活性的ScFv片段及其可变区基因，为进一步筛选具有较高亲和(本文来源于《第四军医大学》期刊1997-05-01）
单链抗体可变区片段论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
粒系集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factors，G-CSF)，具有特异地刺激和调节粒细胞系统的增殖、分化、存活和活化等作用，因此在放射性损伤的救治以及肿瘤患者放化疗等方面具有良好的应用前景。但G-CSF也与体内炎症等严重病理过程中嗜中性白细胞的大量增加和激活有关。后者又可因“呼吸暴发”效应释放大量氧自由基等成份，在清除异己的同时，对自身组织也产生影响。保持体内粒细胞的动态平衡是对一些临床疾病诊治的重要环节，其中研制和应用抗G-CSF抗体也将是一个重要方面。本研究利用90年代以来发展起来的在基因工程抗体领域具有重大突破的全套噬菌体抗体表面表达技术，对抗G-CSF单链抗体(ScFv)进行了研究。从人重组G-CSF免疫的小鼠脾细胞中提取总RNA，反转录成cDNA后，用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体V_H、V_L扩增，经重迭延伸反应在体外随机装配成ScFv。将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB 5E中。电转化含Sup E的E．coli菌株，以辅助噬菌体M13KO7超感染噬菌粒文库，构建成全套ScFv基因表面表达文库。利用固相化G-CSF吸附含有特异抗体片段的噬菌体颗粒进行富集筛选。经四轮panning后，用ELISA法从噬菌体克隆中，筛选到9个具有G-CSF结合活性的完整重组噬菌粒克隆。对其中叁个阳性克隆中的ScFv基因全序列进行了核苷酸序列测定，从而获得了6个抗体可变区基因全序列。计算机分析表明它们均系新发现的鼠免疫球蛋白可变区基因。将阳性克隆感染不含Sup E的E．coli菌株，从而获得目的抗体片段的可溶性表达。用特异性ELISA、Dot blots以及G-CSF依赖细胞株抑制实验等进行活性检测，显示其均能与G-CSF特异性结合，表明所得ScFv均为G-CSF特异性抗体分子片段。 我们采用全套抗体噬菌体表面表达系统，绕过杂交瘤技术，从G-CSF免疫小鼠脾细胞mRNA出发，构建全套ScFv基因的噬菌体表面表达文库，从中获得了具有G-CSF结合活性的ScFv片段及其可变区基因，为进一步筛选具有较高亲和
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单链抗体可变区片段论文参考文献
[1].胡志伟,段招军,朱建高,周国华,胡锦跃.从人源单链抗体库中筛出具有抗原结合活性的重链可变区和更小抗体片段[J].中国免疫学杂志.1999
[2].贾松惠.重组人G-CSF免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面表达文库的构建和抗-G-CSF抗体片段及其可变区基因的鉴定[D].第四军医大学.1997
论文知识图
