导读:本文包含了高氧暴露论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:高浓度氧,血红素加氧酶-1,谷氨酰-L-半胱氨酸连接酶催化亚单位,早产
高氧暴露论文文献综述
楚晓云,蔡成,张潇月,周慧琳,孙俊芳[1]（2019）在《高氧暴露对早产鼠肺组织HO-1和GCLC表达的影响》一文中研究指出目的探讨高浓度氧暴露对新生早产大鼠肺组织中血红素加氧酶-1(HO-1)和谷氨酰-L-半胱氨酸连接酶催化亚单位(GCLC)动态表达的影响。方法受孕21d大鼠行剖宫产取出早产鼠80只,喂养1d后随机分为空气组和高氧组。空气组早产鼠放置在室内常压空气中饲养,高氧组早产鼠放置在同一室内常压氧箱中(氧浓度85%～95%)饲养,分别于第1、4、7、10、14天,每组取8只大鼠,采集两组早产鼠肺组织标本。采用苏木精-伊红染色法检测两组早产鼠不同时间点肺组织结构的病理变化;采用Westernblot技术和RTqPCR检测两组早产鼠不同时间点肺组织HO-1和GCLC蛋白及mRNA的表达变化。结果与空气组相比,高氧组早产鼠体重下降显着(P<0.05)。与空气组相比,高氧组早产鼠肺组织病理切片显示肺组织结构紊乱、肺泡间隔增宽、肺泡数目减少和肺泡简单化。高氧组早产鼠肺组织中HO-1mRNA相对表达量在第7天时低于空气组,在第10、14天时高于空气组(P<0.05)。高氧组早产鼠肺组织中GCLCmRNA表达量在第1、4、7天时低于空气组,在第10天时高于空气组(P<0.05)。与空气组比较,高氧组早产鼠肺组织中HO-1蛋白表达水平在各时间点均升高;除第1天外,GCLC蛋白表达水平在其他各时间点均升高(P<0.05)。结论高氧暴露导致早产鼠生长发育迟缓、肺发育阻滞。早产鼠肺组织HO-1和GCLC蛋白及m RNA的表达变化可能与高氧暴露导致早产鼠肺损伤发病过程相关。[中国当代儿科杂志,2019,21(6):594-600](本文来源于《中国当代儿科杂志》期刊2019年06期）
汪科换[2]（2019）在《siRNA沉默CHOP基因表达对高氧暴露肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是严重威胁早产儿尤其极早早产儿的一种常见肺部疾病。前期研究发现,在高氧诱导的BPD中,肺泡Ⅱ型上皮细胞(type II alveolar epithelial cells,AECⅡs)凋亡增加,且通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)凋亡途径活化。但CHOP表达改变对高氧暴露后AECⅡs凋亡是否产生影响,目前尚不清楚。本研究主要通过检测被CHOP-siRNA转染的AECⅡs细胞株在高氧暴露后CHOP、Bcl-2和Bax的表达水平以及AECⅡs凋亡情况,探讨阻断内源性CHOP表达对高氧暴露AECⅡs凋亡的影响。方法体外设计合成靶向CHOP基因的siRNA碱基序列,采用Lipofectamine2000脂质体介导法对AECⅡs细胞进行pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA及pcDNA3.1(+)-空质粒瞬时转染,RT-PCR和Western blot检测siRNA干扰后CHOP基因沉默效果。转染后24 h给予高氧暴露,将细胞分为空气组、空气+pcDNA3.1(+)-空质粒组、空气+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组、高氧组、高氧+pcDNA3.1(+)-空质粒组、高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组。倒置相差显微镜观察细胞形态,于空气或高氧暴露48 h收集各组细胞,Annexin V/PI双染法及流式仪检测早期细胞凋亡,RT-PCR及Western blot检测CHOP、Bcl-2及Bax表达水平。结果(1)空气组AECⅡs伸出较多伪足,紧贴于瓶底,呈岛状生长方式,空气+pcDNA3.1(+)-空质粒组及空气+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组细胞形态与空气组相比无明显差异;高氧组AECⅡs伸展肥大明显,细胞贴壁不紧,伪足减少,核仁减少或消失,培养液中悬浮细胞数增加,少数细胞出现空泡改变,高氧+pcDNA3.1(+)-空质粒组与高氧组相比无明显差异;高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组细胞形态较空气组稍有伸展肥大,但较高氧组细胞伸展程度变小,悬浮细胞数减少,且细胞无空泡改变。(2)与空气组相比,高氧组AECⅡs凋亡明显增加,CHOP基因mRNA及蛋白表达增加,Bcl-2基因mRNA及蛋白减少,Bax基因mRNA及蛋白表达增加。(3)AECⅡs转染CHOP-siRNA后,与高氧组相比,高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组AECⅡs凋亡减少,CHOP基因mRNA及蛋白表达减少,Bcl-2基因mRNA及蛋白表达增加,Bax基因mRNA及蛋白表达减少。结论(1)高氧可导致AECⅡs凋亡增加,CHOP表达增加,抗凋亡基因Bcl-2减少,促凋亡基因Bax增加,提示高表达的CHOP可通过下调抗凋亡基因Bcl-2表达及促进促凋亡基因Bax的表达,最终导致细胞凋亡增加。(2)AECⅡs转染CHOP-siRNA阻断CHOP表达后,可减轻高氧诱导的AECⅡs凋亡。(本文来源于《江苏大学》期刊2019-03-29）
党嘉文,董文斌,雷小平,何娜,郭琳[3]（2018）在《不同浓度重组人促红细胞生成素对高氧暴露下人肺泡Ⅱ型上皮细胞功能的影响研究》一文中研究指出目的探讨不同浓度重组人促红细胞生成素(rhEPO)对高氧暴露下人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)功能的影响。方法 2017年1—12月,培养A549细胞,取对数生长期的A549细胞,将其随机分为对照组(将细胞置于37℃恒温的50 ml/L CO2培养箱中进行培养)、高氧组(以3 L/min速度通过900 ml/L O2和50 ml/L CO2高纯混合气,持续通气10 min,之后进行密闭培养)及10、20、50、100 U/ml rhEPO组(分别将细胞加入含10、20、50、100U/ml rhEPO的培养基,之后预处理24 h,再用高氧诱导),每组中包含8个复孔。24 h后,采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态学变化,细胞增殖实验检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果高氧组细胞间空隙较大,细胞受损明显,活细胞数量显着降低,悬浮细胞明显增多;10、20、50、100 U/ml rhEPO组细胞损伤改善,50、100U/ml rhEPO组细胞形态学变化与对照组较为相似。高氧组及10、20 U/ml rhEPO组细胞增殖水平小于对照组(P<0.05);10、20、50、100 U/ml rhEPO组细胞增殖水平大于高氧组(P<0.05);50、100 U/ml rhEPO组细胞增殖水平大于10、20 U/ml rhEPO组(P<0.05);100 U/ml rhEPO组细胞增殖水平大于50 U/ml rhEPO组(P<0.05)。高氧组及10、20U/ml rhEPO组细胞凋亡率大于对照组(P<0.05);10、20、50、100 U/ml rhEPO组细胞凋亡率小于高氧组(P<0.05);50、100 U/ml rhEPO组细胞凋亡率小于10、20 U/ml rhEPO组(P<0.05);100 U/ml rhEPO组细胞凋亡率小于50 U/ml rhEPO组(P<0.05)。结论高氧抑制A549细胞增殖、促进A549细胞凋亡,而rhEPO可减轻这种作用,且50、100U/ml rhEPO能有效抑制A549细胞发生损伤。(本文来源于《中国全科医学》期刊2018年33期）
朱玥,卢红艳,郝晓波,常明,王秋霞[4]（2018）在《SUMO化修饰C/EBPα在高氧暴露所致支气管肺发育不良早产大鼠中的动态表达及作用》一文中研究指出目的探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在支气管肺发育不良(BPD)早产大鼠中的表达及其作用。方法将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组(n=9),建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d,每组各取3只大鼠采集肺组织,糖原染色观察肺组织分化情况;免疫组化检测Ki67表达;Western blot检测SUMO1及C/EBPα蛋白表达;免疫共沉淀检测SUMO化C/EBPα表达。结果与同时间点空气组相比,高氧组大鼠肺组织糖原染色强度4 d时减弱,7 d及14 d时明显增强;随高氧暴露时间延长,高氧组大鼠肺组织中Ki67表达逐渐升高,且均高于同时间点空气组;与空气组相比,高氧组C/EBPα蛋白4 d时表达增加,7 d及14 d时表达降低(P<0.05);高氧组SUMO1及SUMO化C/EBPα蛋白表达呈逐渐上升趋势,均明显高于同时间点空气组(P<0.05)。高氧组SUMO化C/EBPα表达与糖原染色强度及核增殖抗原Ki67均呈正相关(r=0.529、0.671,P<0.05)。结论高氧暴露所致早产大鼠BPD模型中,肺泡上皮细胞过度增殖与分化障碍可能与SUMO化C/EBPα表达增加相关。(本文来源于《中国当代儿科杂志》期刊2018年05期）
李铭靓[5]（2018）在《高氧暴露对子鼠脑组织损伤的研究》一文中研究指出目的:近年来,随着我国医学的快速发展,早产儿及低体重儿的存活率不断提升。早生儿护理中,氧气疗法是必不可少的。但在接受氧疗的同时,过高浓度的氧气也会对早产儿造成多器官的损害,给儿童自身及家庭的生活带来很严重的影响。高浓度氧暴露可引起早产儿的视网膜病变、肺部疾病及脑组织的损伤,然而其对早生儿脑损伤的具体机制尚不明确。细胞自噬与细胞凋亡是相互区别、相互联系的细胞程序性死亡的两个过程,本次实验探究这两个过程是否参与到高氧暴露所造成的仔鼠脑组织损伤中。机体产生的某些内源性有害物质会激活炎症小体的表达,因此本实验我们探讨高氧暴露是否可以引起仔鼠脑组织的炎症反应。方法:本实验以C57BL/6小鼠为研究对象,待新生小鼠出生第5天时,将其与母鼠一起暴露于氧气浓度为80%的环境中,7天后,转移至实验室环境下再饲养5天,取材。对部分仔鼠脑组织进行脱水包埋,切片处理;DHE染色,观察仔鼠脑组织中活性氧表达的改变;MDA含量测定,检测高氧暴露对仔鼠脑组织的MDA含量;用免疫蛋白印记法(Western blot)检测子代小鼠中氧化应激相关蛋白、细胞自噬相关因子、凋亡相关因子及炎症因子相关蛋白的表达;免疫组化检测仔鼠脑组织中炎症小体的表达。结果:经高氧暴露后,子代小鼠脑组织活性氧水平与对照组相比明显升高;经高氧暴露后,仔鼠脑组织MDA含量较对照组明显升高;高氧暴露上调小鼠脑组织中Nrf2蛋白的表达,下调Trx-1蛋白的表达;检测子代小鼠脑组织中自噬相关因子LC3-II及p62蛋白的表达,发现经高氧暴露下,仔鼠脑组织中LC3-II蛋白表达明显降低,p62蛋白表达明显升高;进一步检验仔鼠脑组织中Bax与Bcl-2的表达,发现高氧暴露组小鼠脑组织中Bcl-2/Bax的比值明显降低;实验中检测NLRP3炎症小体及其下游IL-1?、IL-18的表达,发现高氧暴露可以激活炎症小体及其下游因子的表达,引起仔鼠脑组织的炎症反应。结论:高氧暴露可以引起子代小鼠脑组织损伤;其中自噬的抑制起到了关键作用;高氧可以通过抑制自噬来诱发子代小鼠脑组织细胞凋亡性死亡;高氧暴露可上调子代小鼠脑组织中炎症因子的表达。(本文来源于《大连医科大学》期刊2018-05-01）
严隆丽,全裕凤,张华,柳秋菊,赵日红[6]（2018）在《SOX9及WNT信号通路分子在高氧暴露致早产大鼠肺损伤中的表达及意义》一文中研究指出目的观察SOX9及WNT信号通路分子在高氧暴露早产鼠肺组织中的表达,探讨高氧暴露早产大鼠肺组织损伤的发病机制。方法将72只1日龄早产SD大鼠随机均分为高氧组和空气组,每组36只,各组再随机均分为生后3 d组、5 d组、9 d组,每组12只。高氧组早产鼠置于氧体积分数为95%的氧箱中。各组分别在相应的时间处死动物后收集肺组织标本。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织的病理改变,采用RT-PCR及Western blot法检测SOX 9及WNT信号通路中关键因子β-连环蛋白(β-catenin)及下游因子淋巴增强因子(LEF-1)、肺泡表面活性蛋白C(SPC)、α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)在早产大鼠肺组织中的mRNA和蛋白表达水平。结果空气各组肺组织结构基本正常,高氧3d组肺组织见明显渗出、大量炎症细胞浸润、出血性改变及肺泡压缩,高氧5 d组和9 d组可见肺间隔增宽及肺泡结构紊乱。与空气组比,高氧组β-catenin、LEF-1、SPC及α-SMA mRNA及蛋白表达均增加(P<0.05),且随着高氧暴露天数的增加而增加;SOX9因子在高氧暴露3 d和5 d时mRNA和蛋白表达均高于空气组(P<0.01),且高氧暴露3 d组核酸2017-12-14接收及蛋白表达量高于高氧暴露5 d组,高氧暴露9 d时与空气组无明显变化(P>0.05),且表达量低于高氧5 d组。结论高氧暴露通过激活WNT信号通路致早产大鼠肺组织损伤;SOX 9基因在高氧暴露早产大鼠肺组织中可能通过抑制WNT信号通路来参与高氧肺损伤。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年04期）
卢衍敏[7]（2018）在《C/EBPα对高氧暴露后AECⅡ分泌肺泡表面活性蛋白和细胞增殖及凋亡的影响》一文中研究指出目的支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是早产儿常见的慢性肺部疾病,BPD的发生与机械通气及长期吸入高浓度氧密切相关。CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)在肺发育及成熟等过程中作为关键转录因子发挥重要作用。本研究首先利用早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡEpithelial Cell,AECⅡ),探讨高氧暴露对C/EBPα、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、SP-B、SP-C、SP-D表达及细胞增殖的影响;同时利用人AECⅡ细胞株,研究过表达C/EBPα对高氧暴露后AECⅡ增殖、凋亡及SP-C的影响,明确C/EBPα在高氧肺损伤中的作用。方法SD雌雄大鼠交配,雌鼠孕20 d-21 d时腹腔注射麻醉药后,剖宫取出胎鼠,分离纯化AECⅡ,进行原代培养。利用95%O_2构建高氧损伤AECⅡ细胞模型作为高氧组后续实验。将细胞随机分为空气对照组和高氧组。两组细胞分别在培养的24 h、48 h及72 h进行收集。使用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,实时荧光定量PCR(Q-PCR)及Western blot法分别检测AECⅡ细胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C及SP-D mRNA及蛋白表达,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测AECⅡ细胞增殖。利用人AECⅡ细胞株,采用Lipofectamine2000脂质体介导法对AECⅡ细胞进行pc DNA3.1(+)-C/EBPα质粒及pcDNA3.1(+)-空质粒瞬时转染,将细胞随机分为空气组、空气组+pcDNA3.1(+)-C/EBPα质粒组、空气组+pc DNA3.1(+)-空质粒组、高氧组、高氧+pcDNA3.1(+)-C/EBPα质粒组、高氧+pcDNA3.1(+)-空质粒组,采用Q-PCR及Western blot检测C/EBPα和SP-C mRNA及蛋白表达,CCK-8检测各组细胞增殖,PI染色法流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测AECⅡ细胞凋亡。结果(1)空气组AECⅡ细胞随着培养时间的延长,细胞生长状态良好,形态基本正常,未见明显漂浮的死细胞,C/EBPα表达水平逐渐降低,SP-A、SP-B、SP-C、SP-D表达水平及AECⅡ细胞增殖情况逐渐升高;而高氧组AECⅡ细胞形态发生改变,逐渐变为不规则性状,且漂浮的死细胞逐渐增多,C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D表达水平及增殖情况在培养48 h达到高峰;且在48 h时,高氧组AECⅡ细胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D表达水平及增殖情况明显高于空气组。高氧组AECⅡ细胞C/EBPα表达情况与肺泡表面活性蛋白及AECⅡ增殖情况呈正相关。(2)待AECⅡ细胞培养至融合率达到50%以上后进行pcDNA3.1(+)-C/EBPα转染,转染后再次培养48 h,转染组C/EBPαmRNA及蛋白表达水平表达较其它组显着升高(P<0.05)。(3)与空气组相比,高氧组和高氧+pc DNA3.1(+)-空质粒组细胞增殖、SP-C mRNA及蛋白表达水平显着降低(P<0.05),细胞周期G_1期细胞比例增加,S期和G_2期细胞明显下降,细胞凋亡率增加(P<0.05)。高氧+pcDNA3.1(+)-C/EBPα组细胞增殖、SP-C mRNA及蛋白表达水平较高氧组、高氧+pc DNA3.1(+)-空质粒组显着升高,细胞周期G_1期细胞比例降低,S期和G_2期细胞增加,细胞凋亡率降低(P<0.05)。与空气组和空气组+pcDNA3.1(+)-空质粒组相比,在空气组+pcDNA3.1(+)-C/EBPα质粒组的AECⅡ细胞增殖、凋亡和SP-C表达没有显着的差异。结论(1)短期暴露于高氧状态下,C/EBPα可使肺泡表面活性蛋白分泌增加,参与机体的保护性调节作用,但随高氧暴露时间的延长,将丧失代偿保护作用。(2)C/EBPα过表达可促进高氧暴露后AECⅡ细胞SP-C表达,促进增殖,抑制凋亡,且使S期和G_2期细胞明显增加,提示给予过表达C/EBPα可能逆转高氧细胞损伤过程,起到保护作用。(本文来源于《江苏大学》期刊2018-04-23）
吴丹,姚兰,方芳,许峰,刘成军[8]（2018）在《氢气对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用机制研究》一文中研究指出该文探讨了氢气对高氧暴露下早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells,AECⅡ)损伤的作用机制研究。将原代分离培养的早产鼠AECⅡ分为4组:空气组、高氧组、高氧+氢气组、高氧+氢气+PD98059组。空气组、高氧组分别置于氧浓度为21%的空气和95%的氧气中;高氧+氢气组在高氧暴露前加入氢气;高氧+氢气+PD98059组在高氧暴露前同时加入氢气和ERK1/2特异性抑制剂PD98059,再置于氧浓度为95%的密闭氧仓中。各组均培养24 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2、Bax蛋白质水平;荧光定量PCR检测Bax和caspase-3 m RNA水平。结果发现,与空气组比较,高氧组细胞凋亡率显着增加(P<0.01),细胞增殖能力、p-ERK1/2蛋白质水平明显降低(P<0.01),Bax蛋白质与mRNA水平均明显升高(P<0.01),caspase-3 mRNA水平明显升高(P<0.01);与高氧组比较,高氧+氢气组细胞凋亡率显着减低(P<0.01),细胞增殖能力升高(P<0.01),p-ERK1/2蛋白质水平明显升高(P<0.01),Bax蛋白质与mRNA水平均降低(P<0.05),caspase-3 mRNA水平降低(P<0.05);当加入ERK1/2抑制剂PD98059后,氢气的保护作用被消除(P<0.05)。氢气可通过激活MAPK-ERK1/2信号通路抑制凋亡相关基因的表达,改善高氧导致AECⅡ的凋亡和增殖受限,促进细胞存活。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2018年02期）
徐凤丹,王优,吴文燊,谢松敏[9]（2017）在《高氧暴露对新生小鼠肺部炎性反应及纤维化的影响》一文中研究指出目的观察高氧暴露对新生小鼠肺部炎性反应及纤维化的影响。方法新生2日龄昆明小鼠40只,随机分为空气组(n=20)及高氧组(n=20),分别在空气或(60±5)%氧气中饲养。每天检测小鼠状态,隔天记录小鼠体重情况。在实验第3、7、14、21天,每组各取5只小鼠处死,观察肺组织外观、计算肺组织湿/干重比值;HE染色观察肺组织病理结构;天狼星红染色观察肺组织胶原纤维情况。结果 (1)实验过程中两组均未出现小鼠死亡;高氧组小鼠高氧暴露后第7天开始体重明显低于空气组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。(2)高氧暴露后第7天开始,小鼠肺湿重/干重比值均高于空气组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)高氧组肺部结构随高氧暴露时间的增加逐渐出现典型支气管肺发育不良(BPD)样表现:肺泡呈不规则结构,腔隙较大,部分肺泡融合,整体数量减少,部分区域有炎性不张;高氧暴露后第14、21天,高氧组辐射状肺泡计数(RAC)低于空气组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。(4)高氧暴露后第7、14、21天,高氧组肺部胶原面积较空气组显着增加。结论持续高氧暴露可成功制作BPD小鼠模型;持续高氧暴露后可导致新生小鼠肺部炎性反应及纤维化增加,可能是BPD发生的重要机制。(本文来源于《中国医药导报》期刊2017年26期）
麦友刚,雷嘉颖,汤昔康,刘婷华,陈泽楷[10]（2017）在《HLF细胞高氧暴露后miR-15b及miR-16上调并抑制VEGF表达》一文中研究指出目的探讨高氧暴露下人胚肺成纤维细胞(HLF)中miR-15b及miR-16对VEGF蛋白的调控作用。方法用转染技术分别上调及下调HLF细胞miR-15b和miR-16水平;用Western blot技术检测细胞中VEGF蛋白;同时,用体外细胞培养方法,观察高氧暴露下HLF细胞miR-15b、miR-16及VEGF蛋白水平的影响。结果上调miR-15b和miR-16可使HLF细胞中VEGF蛋白降低,反之可使其升高;高氧暴露可诱导HLF细胞miR-15b和miR-16上调,而VEGF表达则下降。结论高氧暴露可诱导HLF细胞中miR-15b及miR-16上调并抑制VEGF的表达,可能参与支气管肺发育不良(BPD)的发生过程。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2017年09期）
高氧暴露论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是严重威胁早产儿尤其极早早产儿的一种常见肺部疾病。前期研究发现,在高氧诱导的BPD中,肺泡Ⅱ型上皮细胞(type II alveolar epithelial cells,AECⅡs)凋亡增加,且通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)凋亡途径活化。但CHOP表达改变对高氧暴露后AECⅡs凋亡是否产生影响,目前尚不清楚。本研究主要通过检测被CHOP-siRNA转染的AECⅡs细胞株在高氧暴露后CHOP、Bcl-2和Bax的表达水平以及AECⅡs凋亡情况,探讨阻断内源性CHOP表达对高氧暴露AECⅡs凋亡的影响。方法体外设计合成靶向CHOP基因的siRNA碱基序列,采用Lipofectamine2000脂质体介导法对AECⅡs细胞进行pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA及pcDNA3.1(+)-空质粒瞬时转染,RT-PCR和Western blot检测siRNA干扰后CHOP基因沉默效果。转染后24 h给予高氧暴露,将细胞分为空气组、空气+pcDNA3.1(+)-空质粒组、空气+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组、高氧组、高氧+pcDNA3.1(+)-空质粒组、高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组。倒置相差显微镜观察细胞形态,于空气或高氧暴露48 h收集各组细胞,Annexin V/PI双染法及流式仪检测早期细胞凋亡,RT-PCR及Western blot检测CHOP、Bcl-2及Bax表达水平。结果(1)空气组AECⅡs伸出较多伪足,紧贴于瓶底,呈岛状生长方式,空气+pcDNA3.1(+)-空质粒组及空气+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组细胞形态与空气组相比无明显差异;高氧组AECⅡs伸展肥大明显,细胞贴壁不紧,伪足减少,核仁减少或消失,培养液中悬浮细胞数增加,少数细胞出现空泡改变,高氧+pcDNA3.1(+)-空质粒组与高氧组相比无明显差异;高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组细胞形态较空气组稍有伸展肥大,但较高氧组细胞伸展程度变小,悬浮细胞数减少,且细胞无空泡改变。(2)与空气组相比,高氧组AECⅡs凋亡明显增加,CHOP基因mRNA及蛋白表达增加,Bcl-2基因mRNA及蛋白减少,Bax基因mRNA及蛋白表达增加。(3)AECⅡs转染CHOP-siRNA后,与高氧组相比,高氧+pcDNA3.1(+)-CHOP-siRNA组AECⅡs凋亡减少,CHOP基因mRNA及蛋白表达减少,Bcl-2基因mRNA及蛋白表达增加,Bax基因mRNA及蛋白表达减少。结论(1)高氧可导致AECⅡs凋亡增加,CHOP表达增加,抗凋亡基因Bcl-2减少,促凋亡基因Bax增加,提示高表达的CHOP可通过下调抗凋亡基因Bcl-2表达及促进促凋亡基因Bax的表达,最终导致细胞凋亡增加。(2)AECⅡs转染CHOP-siRNA阻断CHOP表达后,可减轻高氧诱导的AECⅡs凋亡。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
高氧暴露论文参考文献
[1].楚晓云,蔡成,张潇月,周慧琳,孙俊芳.高氧暴露对早产鼠肺组织HO-1和GCLC表达的影响[J].中国当代儿科杂志.2019
[2].汪科换.siRNA沉默CHOP基因表达对高氧暴露肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的影响[D].江苏大学.2019
[3].党嘉文,董文斌,雷小平,何娜,郭琳.不同浓度重组人促红细胞生成素对高氧暴露下人肺泡Ⅱ型上皮细胞功能的影响研究[J].中国全科医学.2018
[4].朱玥,卢红艳,郝晓波,常明,王秋霞.SUMO化修饰C/EBPα在高氧暴露所致支气管肺发育不良早产大鼠中的动态表达及作用[J].中国当代儿科杂志.2018
[5].李铭靓.高氧暴露对子鼠脑组织损伤的研究[D].大连医科大学.2018
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标签：高浓度氧; 血红素加氧酶-1; 谷氨酰-L-半胱氨酸连接酶催化亚单位; 早产;