大肠杆菌利用葡萄糖和木糖合成乙醇酸、乳酸和3-羟基丁酸共聚酯

大肠杆菌利用葡萄糖和木糖合成乙醇酸、乳酸和3-羟基丁酸共聚酯

论文摘要

以大肠杆菌为宿主,构建了以葡萄糖和木糖为底物获得乙醇酸、乳酸和3-羟基丁酸共聚酯的生物合成途径,包括过表达塔格糖-3-差向异构酶、核酮糖激酶、醛缩酶、醛脱氢酶、丙酰辅酶A转移酶、β-酮硫解酶、乙酰乙酰辅酶A还原酶和聚合酶等。在此基础上,表达聚羟基脂肪酸酯颗粒结合蛋白,提高了聚合物的合成,重组菌的细胞干重达到3.73g/L,含有38.72wt%的共聚酯。采用混菌共培养策略,实现以葡萄糖和木糖混合物为底物合成共聚酯,摇瓶实验中细胞干重达到4.01g/L,含有21.54wt%的聚合物。文中提供了一种以葡萄糖和木糖混合物为碳源合成聚合物的方法,为下一步纤维素水解物的有效利用提供了参考。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌种与质粒
  •   1.2 培养基
  •   1.3 主要试剂
  •   1.4 pET-pct-PCAB的构建
  •   1.5 突变菌株的构建
  •     1.5.1 K12ΔxylBΔglcDΔpts的构建
  •     1.5.2 K12ΔxylBΔglcDΔxylA的构建
  •     1.5.3 K12ΔxylBΔglcDΔldhA的构建
  •   1.6 聚合物合成的摇瓶培养
  •     1.6.1 单菌培养
  •     1.6.2 混菌培养
  •   1.7 分析方法
  • 2 结果与分析
  •   2.1 构建P (GA-LA-3HB) 合成途径
  •   2.2 PHA颗粒结合蛋白表达对共聚酯合成的影响
  •   2.3 ldhA基因敲除对共聚酯合成的影响
  •   2.4 混菌共培养合成P (GA-LA-3HB)
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 笪央央,李微,史理陇,李正军

    关键词: 聚羟基脂肪酸酯,乙醇酸,乳酸,羟基丁酸,葡萄糖,木糖

    来源: 生物工程学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 北京化工大学生命科学与技术学院

    基金: 国家自然科学基金(No.21476014),国家科技支撑计划(No.2015BAD15B09)资助~~

    分类号: TQ920.6

    DOI: 10.13345/j.cjb.180199

    页码: 254-262

    总页数: 9

    文件大小: 989K

    下载量: 274

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