外泌体miR-155调控p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路影响心肾综合征大鼠的心肾细胞凋亡

论文摘要

目的:基于外泌体miR-155调控p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路影响心肾综合征（CRS）大鼠的心肾细胞凋亡探讨CRS的发病机制。方法:SD大鼠分为空白组、造模3周组、造模4周组、造模5周组、造模6周组,每组10只,以生理盐水或阿霉素腹腔注射造模。心脏超声检测心功能,ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、肾损伤分子1,全自动生化仪检测血清肌酐、尿素氮,EXOQuick试剂盒提取血浆外泌体,用ELISA试剂盒对血浆外泌体定量检测,RT-PCR法检测心肾组织p38MAPK mRNA、心肾组织miR-155、外泌体miR-155的表达,Western-Blot法检测心肾组织p38MAPK及磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）的表达,HE染色观察组织形态学改变,TUNEL法检测心肾细胞凋亡率。结果:造模后各组大鼠心肾功能降低;与空白组比较,造模4周组、5周组心脏p-p38MAPK表达增高（P<0.05）,6周组p-p38MAPK表达增高（P<0.01）;造模4周组、5周组、6周组肾脏p-p38MAPK表达增高（P<0.01）;造模3周组、4周组、5周组、6周组心脏、肾脏细胞凋亡率增高（P<0.01）;造模4周组、5周组、6周组血浆外泌体含量降低（P<0.01）;造模3周组、4周组、5周组、6周组外泌体miR-155表达降低,心肾组织miR-155表达降低（P<0.01）。结论:p-p38 MAPK在CRS大鼠心肾细胞凋亡中起着关键作用,且外泌体miR-155可能对其有着调控作用。

论文目录

• 材料方法
•   动物与药品
•   主要试剂
•   主要仪器
•   实验分组
•   造模方法与标本采集
• 指标检测
•   心脏超声检测
•   血清氨基末端脑钠肽前体（NT-pro BNP）和KIM-1检测
•   血清肌酐、尿素氮测定
•   血浆外泌体提取及电镜观察外泌体形态
•   外泌体定量检测
•   RT-PCR法检测大鼠心脏、肾脏p38MAPK mRNA、miR155及外泌体miR-155的表达
•   Western Blot法检测大鼠心脏及肾脏p38MAPK、p-p38MAPK、外泌体CD9蛋白的表达
•   HE染色观察肾脏病理形态学
•   TUNEL法检测大鼠心、肾细胞凋亡阳性细胞率
•   统计学处理
• 结 果
•   一般情况
•   大鼠心肾功能指标
•   大鼠血浆外泌体含量、外泌体miR-155相对表达量及外泌体标志蛋白CD9的表达
•   大鼠心脏、肾脏p38MAPK、p-p38MAPK、p38MAPKmRNA、miR-155的表达
•   大鼠肾脏组织形态学观察及心、肾细胞凋亡阳性率
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 欧阳过,蔡虎志,王雅乐,王敏,刘越美,陈新宇

关键词: 心肾综合征,外泌体,丝裂原活化蛋白激酶,细胞凋亡

来源: 肾脏病与透析肾移植杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 心血管系统疾病,泌尿科学

单位: 湖南中医药大学,湖南中医药大学第一附属医院

基金: 国家自然科学基金(81704061,81173213),湖南省自然科学基金(2019JJ50465),湖南省教育厅科学研究项目(18A218),湖南省中医药科研计划项目(201904),湖南中医药大学研究生创新课题(2018CX11),湖南中医药大学中医学国内一流建设学科

分类号: R541.6;R692.5

页码: 532-537

总页数: 6

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