铜绿假单胞菌外膜囊泡对肺上皮细胞分泌细胞因子的影响

论文摘要

目的:观察铜绿假单胞菌外膜囊泡（OMVs）对肺上皮细胞分泌细胞因子的影响。方法:培养肺上皮细胞BEAS–2B,采用1、10和30μg·mL-1浓度OMVs刺激12、16或24 h,实时定量聚合酶链式反应（PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子（TNF–α）和白细胞介素8（IL–8）和mRNA表达。ELISA检测培养上清TNF–α和IL–8分泌的变化;提取核蛋白,采用ELISA测定OMVs处理前后核因子κB（NF–κB）活性,并采用NF–κB抑制剂处理细胞,观察对OMVs诱导TNF–α和IL–8分泌的影响。结果:采用1μg·mL-1、10μg·mL-1和30μg·mL-1 OMVs处理BEAS–2B细胞12 h后,TNF–α和IL–8的mRNA水平均高于阴性对照组,呈一定的剂量依赖性。30μg·mL-1 OMVs作用细胞4 h后即可上调TNF–α和IL–8 mRNA表达,并持续至16 h。30μg·mL-1OMVs处理细胞后,NF–κB的活性明显增强,NF–κB抑制剂（PDTC）预处理细胞后,TNF–α和IL–8分泌水平降低。结论:OMVs可诱导BEAS–2B表达TNF–α和IL–8,其机制可能与激活NF–κB有关。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验试剂
•   1.2 铜绿假单胞菌培养与OMVs提取
•   1.3 细胞培养与处理
•   1.4 ELISA检测TNF–α和IL–8分泌
•   1.5 实时定量PCR检测mRNA表达
•   1.6 NF–κB活性测定
•   1.7 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 OMVs以剂量依赖性方式诱导BEAS–2B细胞表达TNF–α和IL–8 mRNA
•   2.2 OMVs诱导BEAS–2B细胞分泌TNF–α和IL–8
•   2.3 OMVs经NF–κB诱导BEAS–2B细胞分泌TNF–α和IL–8
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 甘燕青,左丽萍,蒋龙飞

关键词: 铜绿假单胞菌,外膜囊泡,肿瘤坏死因子,白细胞介素

来源: 深圳中西医结合杂志 2019年22期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 衡阳市中心医院

分类号: R378

DOI: 10.16458/j.cnki.1007-0893.2019.22.009

页码: 19-20

总页数: 2

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