导读:本文包含了高效分枝论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:分枝,杆菌,结核,可溶性,甾醇,蛋白质,蛋白。
高效分枝论文文献综述
邢述永,路志群,夏海洋,邓自发,王兆慧[1]（2018）在《构建CRISPR-Cas9介导的耻垢分枝杆菌基因组高效删除系统》一文中研究指出【背景】耻垢分枝杆菌具有生长迅速和非致病性的特点,可作为结核分枝杆菌致病机理研究替代菌株和类固醇激素生产的工程菌,但目前耻垢分枝杆菌中缺乏高效率的基因组敲除方法。【目的】基于CRISPR-Cas9介导的定点、高效的DNA切割能力,构建耻垢分枝杆菌染色体DNA片段无痕敲除系统。【方法】构建了包含四环素诱导型启动子驱动的密码子优化的cas9基础载体pCas9101,在双侧同源臂长度约为1 kb条件下选用合适的gRNA表达模块,分别测试了对耻垢分枝杆菌mc2155染色体上的3β-羟基类固醇脱氢酶基因(MSMEG_5228,1 071 bp)和胆固醇降解基因簇(MSMEG_5990-MSMEG_6043,约48kb)敲除效率,使用相同大小的同源臂以经典p2NIL-pGOAL方法进行对照,并计算效率。【结果】使用CRISPR-Cas9方法对耻垢分枝杆菌mc2155的3β-羟基类固醇脱氢酶基因敲除效率为22%,胆固醇降解基因簇敲除效率也达到18%,两者连续敲除效率为4%。但对照p2NIL-pGOAL方法未能获得目标DNA片段敲除的菌株。【结论】本文建立的基于CRISPR-Cas9的耻垢分枝杆菌基因组无痕敲除系统显示出较高的敲除效率,该方法可为耻垢分枝杆菌后续研究提供快速高效的基因组操作方法。(本文来源于《微生物学通报》期刊2018年12期）
王向栋[2]（2018）在《分枝杆菌高效生产9α羟基雄烯二酮的代谢工程改造》一文中研究指出甾体药物是目前世界上第二大类药物,市场占有比例逐年增长,具有重要的市场前景。9α-羟基雄留-4-烯-3,17-二酮(9α-OH-AD)是一种重要的甾体药物中间体,多用于合成高抗炎、抗敏性的糖皮质激素类药物。目前,9α-OH-AD的生产多采用微生物转化植物甾醇而得。虽然通过菌种筛选和诱变选育等方法能够提高9α-OH-AD的生成浓度,但是仍存在着底物的利用率不高、转化效率偏低的问题。究其原因是微生物降解植物甾醇的代谢途径不清晰,途径中关键酶作用及其功能不明确。因此,本研究以实验室保藏的一株能够转化植物留醇生成9α-OH-AD的分枝杆菌(Mycobacterium sp.)LY-1为研究对象,通过全基因组测序,分析比较了植物甾醇代谢的相关基因,并结合差异转录水平分析方法,确定了与产物合成相关性较大的相关酶。继而采用代谢工程的手段,对甾醇代谢途径中与目的产物合成相关的多个关键酶基因进行增强表达,从而构建高效合成9α-OH-AD的基因工程菌株,并经转化工艺优化,进一步提高了工程菌的底物投料浓度和目的产物9α-OH-AD的得率。主要研究结果总结如下:(1)分枝杆菌LY-1植物甾醇代谢途径的解析。对分枝杆菌LY-1进行全基因组测序,通过基因的组装分析,获得了 53个重迭群。通过基因序列预测和功能注释表明:分枝杆菌的功能蛋白主要分布在[Q](次级代谢产物合成和代谢)、[C](能量生成和转运)和[K](转录)等功能类中。将分枝杆菌LY-1与国内外已报道的甾醇降解菌株Mycobαcterium tuberculosis H37Rv和M neoαurum VKM Ac-1817D 中甾醇代谢途径的基因簇进行比对,结果确定了包括Cho(胆固醇氧化酶)、HsdA/HsdB(β-羟酰基CoA脱氢酶),KshA(3-留酮-9α-羟基加氧酶),KshB(3-留酮-9α-羟基还原酶),KstD(3-留酮-A1-脱氢酶)和17β-Hsd(17β-羟基甾体脱氢酶/异构酶)等37个甾醇代谢相关的酶及其基因,明确了分枝杆菌LY-1合成9α-OH-AD的甾醇代谢途径曲线。(2)植物甾醇代谢途径关键酶的确定。在植物甾醇代谢途径解析的基础上,比较分析了有无添加大豆油的两个条件下分枝杆菌LY-1转化植物留醇的发酵过程。根据转化过程中菌体生长和产物合成之间的关联特征,分别选取转化前期(60 h)、中期(84 h)和后期(168 h)叁个时间点的样品用于后续差异转录水平分析。采用qRT-PCR技术,分析比较了两种条件下37个留醇代谢相关酶基因的转录水平差异情况。结果表明代谢途径中的9个酶基因在转录水平差异较为明显,为甾醇代谢途径的关键酶。其中2个为降解途径关键酶KstD,其他7个为合成途径关键酶,包括Cho,FadE30,HsdB,KshA2,KshB,Hsd1 和 FadA5。(3)分枝杆菌LY-1的代谢工程改造。在野生型菌株分枝杆菌LY-1中,分别对7个合成途径关键酶Cho,FadE30,HsdB,KshA2,KshB,Hsd1和FadA5进行了单一增强表达。结果表明,7个增强表达重组菌转化植物甾醇产9α-OH-AD的能力均有一定程度的提高,其中增强表达重组菌LY-1-kshA2的产物得率最高。当底物植物甾醇的浓度为15 g.L-1,产物9α-OH-AD的摩尔得率可达40.8%。为了进一步提高重组菌9α-OH-AD的生成能力,在单基因增强表达的基础上,构建了 kshA2,kshB和hsdB叁个基因的组合增强表达重组菌株LY-1-kshA2-kshB-hsdB。结果显示,重组菌LY-1-kshA2-kshB-hsdB目的产物9α-OH-AD得率提高到43.4%。(4)基因工程重组菌株的转化工艺优化。以构建的重组菌株LY-1-kshA2-kshB-hsdB为研究对象,在摇瓶中考察了培养基组分如碳源、氮源、磷酸盐和金属离子等对菌株转化植物甾醇生产9α-OH-AD的影响。并采用统计学正交试验方法对培养基组分进行了优化,最终确定了重组菌LY-1-kshA2-kshB-hsdB的最适培养基配方:玉米浆30g·L-1、KN034.0 g·L-1、NaH2PO41.2g·L-1、FeSO40.075 g·L-1 及 CaC120.10g·L-1。在该工作基础上,对培养条件进行了优化,确定了工程菌株的最适条件:pH 8.0,接种量2%,温度30℃,转速120rpm。在以上最适的培养工艺条件下,底物植物甾醇的投料浓度由15 g·L-1提高至30 g·L-1,目的产物9α-OH-AD的得率稳定在41%左右。(本文来源于《江南大学》期刊2018-06-01）
马洋,王向栋,王萌慧,李会,史劲松[3]（2017）在《高效转化植物甾醇为9α-OH-AD的分枝杆菌诱变选育及工艺优化》一文中研究指出以实验室前期筛选得到的分枝杆菌(Mycobacterium sp.LY-1)为出发菌株,采用等离子诱变(ARTP)技术选育出能高效转化植物甾醇为重要甾体药物中间体9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮(9α-OH-AD)的菌株,并对其转化工艺进行优化。经过ARTP诱变选育得到遗传稳定性较好的分枝杆菌突变株Mycobacterium sp.C33,当底物植物甾醇投料浓度为15 g/L时,转化生成9α-OH-AD的摩尔得率达到15.5%,较原始菌株提高34.8%。继而采用正交实验设计方法,对突变菌的发酵培养基组分进行优化,并建立了油水双相转化体系,进一步提高了突变菌株C33的产物摩尔得率,最高达到47.0%,较优化前(15.5%)提高了2倍。(本文来源于《生物工程学报》期刊2017年07期）
朱晓强[4]（2013）在《分枝结构光滑曲面的高效建模》一文中研究指出叁维建模是计算机图形学领域的重要分枝,根据不同的应用和表示方法已经发展有诸多细分主题,例如适于快速绘制的网格模型、表示复杂拓扑改变的隐式曲面、多分辨率表示的细分曲面、可高效编辑的骨架模型等。在解决实际建模过程中,往往需要结合若干种不同的方法,以便充分利用它们各自的优点来生成更好的模型。视频游戏、电影等应用中的模型如树、卡通人物和动物；以及数字教学中的动物器官如血管、支气管等,它们都具有光滑的表面,且可抽象为分枝结构的骨架表示。为满足该类模型应用的需求,已有不少领域(如建模、动画、医学可视化等)都对其进行了研究。本文首先阐述了与分枝结构建模相关的研究现状；其次,在总结现有算法优缺点的基础上,对光滑分枝结构建模几个关键问题进行分析,并提出解决方案内容主要包括卷积曲面解析解及其在Sketch建模中的应用、基于树干的卷积曲面高效多边形化、基于合成的卷积曲面树干建模、基于骨架的树形分枝结构建模四个部分。具体工作可分为如下几个方面：·卷积曲面可生成复杂拓扑变化的模型,因此是一种颇受欢迎的建模工具。针对有限和无限支撑核函数,根据格林定理将平面多边形区域的双重积分转换为沿多边形边界的单重积分；在此基础上给出了新的基于平面多边形骨架的卷积计算解析解,这样不仅减少了计算量且积分过程更加适合并行计算。而对有限支撑核函数,给出了一种计算有效骨架的裁剪算法。本文将所推导的解析解成功应用于基于GPU (Graphics Processing Unit)的Sketch建模系统中,该建模系统支持点、折线段和平面多边形骨架,可交互式生成复杂拓扑结构的模型,并采用光线投射法可生成高质量的卷积曲面。·对基于线骨架卷积曲面创建的树干模型,给出了一种高效的等值面多边形化方法。首先,沿树干骨架方向创建一个以四边形为主的非凸包围多面体,将其四面体化并细分到预定的分辨率；其次,在每个四面体内根据Marching Tetrahedra规则提取等值面多边形,且生成的多边形边长可根据树干的半径自适应调整；最后,由于四面体细分、势能值计算和等值面提取过程都具有较高的并行度,故又提出一种高效基于CUDA的并行化策略。·提供一个基于样例的树建模系统,可创建由高质量四边形表示的树结构单网格模型。由于基于骨架合成、卷积曲面和GPU叁者的优点,该树建模系统交互简单高效且生成网格质量较高。首先,采用拉普拉斯算子从给定网格树模型中提取线段骨架信息；其次,将线骨架表示的整棵树自动细分生成子树,再利用所生成的子树合成新的树模型,并采用卷积曲面来局部逼近骨架模型；最后,通过简单的骨架编辑,可生成基于卷积曲面表示的树干,再将其细分为沿骨架方向有良好边流效果的.四边形网格。在整个过程中最耗时的细分、卷积曲面逼近采用基于CUDA的GPU并行算法处理。利用该建模系统,通过交互式编辑骨架,即可方便快捷地创建各种新的树模型。·提出一种可高效生成四边形网格的新的建模树形物体的方法。首先,从输入网格中提取线骨架,并沿骨架生成包围多面体;其次,以该多面体为控制网格执行Catmull-Clark细分过程,通过逆向求解控制顶点位置,且细分后的极曲面能够较好地逼近原始数据。由于选用GPU加速的细分策略,使得过程相当高效。该方法提供了一个建模树形分枝结构的紧致表示方式,可应用于树枝、动物躯干和脉管等树形分枝结构中。对以上所有问题提出的解决方案,文中都做了实验对比,以验证本文方法的正确性。文章最后系统总结了本文所做的工作,分析了本文研究成果的不足之处,并展望未来的研究方向。(本文来源于《浙江大学》期刊2013-04-01）
尚淑琴,王丽梅,张薇,曾令城,陈宝忠[5]（2012）在《结核分枝杆菌Rv2031c基因在P815细胞中的高效表达》一文中研究指出目的构建结核分枝杆菌Rv2031c基因的真核表达载体,并在P815细胞中高效表达。方法应用PCR扩增Rv2031c基因,克隆人原核表达载体后进行测序,测序正确的序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(一);重组质粒pcDNA-Rv2031c转染p815真核细胞;以RT-PCR方法俭测结核分枝杆菌Rv2031c在真核细胞内mRNA表达,以间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果 Rv2031c基因成功克克隆人真核表达载体pcDNA3.1(一),并可在P815细胞高效表达。结论成功构建了真核表达重组质料pcDNA-Rv2031c,为进一步研究Rv2031c的功能奠定了坚实基础。(本文来源于《热带病与寄生虫学》期刊2012年04期）
薛玉芹,王英,陈勇,唐洁,王雪梅[6]（2012）在《结核分枝杆菌CFP-10的克隆与高效可溶性原核表达》一文中研究指出研究背景:培养滤液蛋白CFP10,是结核分枝杆菌 RD1区编码的核心抗原之一,仅存在于致病性和一些非典型的分枝杆菌中,而不存在BCG和非致病分枝杆菌中,可强烈诱导T细胞的增殖和IFN-γ的产生,使得CFP10蛋白成为结核病重要的诊断性抗原和热点疫苗候选分子,而高效可溶性表达CFP-10蛋白是其应用的重要前提。目的:克隆、原核表达、纯化结核分枝杆菌CFP-10,并对重组蛋白进行抗原性鉴定。方法:用PCR方法从结核分枝杆菌H37 Ra基因组中扩增CFP10基因,将其克隆至带有GST和HIS标签的原核表达载体PET-42a(+),经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化诱导表达条件,经GST和HIS亲和层析柱纯化表达的融合蛋白。以SDSPAGE电泳和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果:经PCR扩增出的目的片段长约300bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定显示插入片段与Genbank中CFP-10基因完全吻合。转化有重组质粒的E.coli BL21(DE3)经过0.1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h,高效表达了占菌体蛋白总量39.7%的相对分子质量约为37KD的可溶性融合蛋白,经亲和层析柱纯化后的获得高纯度的CFP10重组蛋白。Westernblotting结果显示目的蛋白能被结核病患者的阳性血清所识别,而不被正常人血清所识别。结论:成功克隆并高效可溶性原核表达和纯化了结核分枝杆菌CFP-10蛋白,为结核病的诊断、疫苗研究奠定了一定的基础。(本文来源于《第八届全国免疫学学术大会论文集》期刊2012-10-18）
陈保文,都伟欣,杜蓉,闫李侠,郭磊[7]（2012）在《反相高效液相色谱法和16S rRNA序列分析法对分枝杆菌分型鉴别的比较研究》一文中研究指出目的比较反相高效液相色谱法(RP-HPLC)和16S rRNA序列分析法对分枝杆菌分型鉴别的异同。方法将《伯杰细菌鉴定手册》中载入的49种分枝杆菌模式株接种于改良罗氏培养基上,置于最适温度下孵育。挑取生长良好且无污染的培养物,一部分经皂化和酸化提取分枝菌酸并衍生后,采用反相高效液相色谱法进行分枝菌酸指纹图谱构建;另一部分经裂解和PCR扩增,获得DNA,纯化后,采用核酸分析仪进行16S rRNA序列测定。结果 49种分枝杆菌模式株中,采用RP-HPLC分析时,单簇峰的结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和胃分枝杆菌,双簇峰的爱知分枝杆菌和罗德岛分枝杆菌,叁簇峰的南非分枝杆菌和母牛分枝杆菌共7种因各组内相对保留时间和相对峰高比值相近而难以进行鉴别;采用16S rRNA序列分析法分析时,产鼻疽分枝杆菌和塞内加尔分枝杆菌、溃疡分枝杆菌和海分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和胃分枝杆菌、龟亚分枝杆菌和龟脓分枝杆菌以及结核分枝杆菌复合群(结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、田鼠分枝杆菌和非洲分枝杆菌)共12种因各组内基因序列相似性百分比为100%而难以进行鉴别。通过两种分型鉴别方法的比较,可见除结核分枝杆菌和牛分枝杆菌外,两种分型方法相互补充,可将49种分枝杆菌模式株中的47种进行明确鉴别。结论分枝菌酸RP-HPLC和16S rRNA序列分析法均为分枝杆菌的分型鉴定提供了准确和有效的技术方法。两种方法相互借鉴能准确地将大多数分枝杆菌鉴定到种。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2012年04期）
李邦印,孙卫国,王仲元,胡永亮,苏锐[8]（2012）在《结核分枝杆菌HspX蛋白的原核高效可溶性表达及产物抗原性分析》一文中研究指出目的:利用原核系统可溶性表达结核分枝杆菌HspX蛋白并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增HspX核酸序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化,用Western印迹初步评价HspX的抗原性。结果:经IPTG诱导,HspX蛋白在原核系统内获得了可溶性表达,经镍柱亲和层析获得了纯度达95%以上的重组蛋白。Western印迹结果证明重组HspX蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论:重组蛋白HspX在大肠杆菌中以可溶性形式表达,高纯度的重组融合蛋白有可能成为结核病的血清学诊断抗原。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2012年01期）
李兵,刘威龙,张晶,张明霞,邓群益[9]（2010）在《结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6kDa蛋白原核载体的构建及在E.coli中的高效表达》一文中研究指出目的获得高效表达的结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6kDa蛋白(ESAT-6)。方法利用PCR方法扩增出ESAT-6基因片段,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-21b(+),酶切分析和序列测定鉴定出ESAT-6基因的阳性重组子,将其转化入E.coliBL21(DE3),阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达;重组蛋白经Ni-NTAHis.BindResins纯化。结果成功扩增出ESAT-6基因片段,构建了重组表达质粒pET-ESAT-6,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为6kD,经亲和纯化后的ESAT-6重组蛋白纯度高,且能被结核病人血清所识别。结论利用pET原核表达系统成功的对结核分枝杆菌ESAT-6重组蛋白进行高效表达和纯化,重组蛋白具有良好的免疫活性。(本文来源于《临床肺科杂志》期刊2010年06期）
苏锐,李邦印,王臻,王仲元,程小星[10]（2009）在《结核分枝杆菌phoS2基因在大肠埃希菌中的高效表达及其产物抗原性分析》一文中研究指出目的在大肠埃希菌中高效表达结核杆菌phoS2,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法采用DNA重组技术构建结核分枝杆菌phoS2抗原表达载体,用双酶切和PCR等方法鉴定转化子,重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达phoS2;用SDS-PAGE初步鉴定其表达量;将表达产物进行纯化;重组蛋白用Western blot分析其抗原性和特异性。结果phoS2基因在大肠埃希菌中得到高效表达,表达量占全菌蛋白的40%以上;重组蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论重组phoS2蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体形式表达,有很好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。(本文来源于《中国防痨杂志》期刊2009年07期）
高效分枝论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
甾体药物是目前世界上第二大类药物,市场占有比例逐年增长,具有重要的市场前景。9α-羟基雄留-4-烯-3,17-二酮(9α-OH-AD)是一种重要的甾体药物中间体,多用于合成高抗炎、抗敏性的糖皮质激素类药物。目前,9α-OH-AD的生产多采用微生物转化植物甾醇而得。虽然通过菌种筛选和诱变选育等方法能够提高9α-OH-AD的生成浓度,但是仍存在着底物的利用率不高、转化效率偏低的问题。究其原因是微生物降解植物甾醇的代谢途径不清晰,途径中关键酶作用及其功能不明确。因此,本研究以实验室保藏的一株能够转化植物留醇生成9α-OH-AD的分枝杆菌(Mycobacterium sp.)LY-1为研究对象,通过全基因组测序,分析比较了植物甾醇代谢的相关基因,并结合差异转录水平分析方法,确定了与产物合成相关性较大的相关酶。继而采用代谢工程的手段,对甾醇代谢途径中与目的产物合成相关的多个关键酶基因进行增强表达,从而构建高效合成9α-OH-AD的基因工程菌株,并经转化工艺优化,进一步提高了工程菌的底物投料浓度和目的产物9α-OH-AD的得率。主要研究结果总结如下:(1)分枝杆菌LY-1植物甾醇代谢途径的解析。对分枝杆菌LY-1进行全基因组测序,通过基因的组装分析,获得了 53个重迭群。通过基因序列预测和功能注释表明:分枝杆菌的功能蛋白主要分布在[Q](次级代谢产物合成和代谢)、[C](能量生成和转运)和[K](转录)等功能类中。将分枝杆菌LY-1与国内外已报道的甾醇降解菌株Mycobαcterium tuberculosis H37Rv和M neoαurum VKM Ac-1817D 中甾醇代谢途径的基因簇进行比对,结果确定了包括Cho(胆固醇氧化酶)、HsdA/HsdB(β-羟酰基CoA脱氢酶),KshA(3-留酮-9α-羟基加氧酶),KshB(3-留酮-9α-羟基还原酶),KstD(3-留酮-A1-脱氢酶)和17β-Hsd(17β-羟基甾体脱氢酶/异构酶)等37个甾醇代谢相关的酶及其基因,明确了分枝杆菌LY-1合成9α-OH-AD的甾醇代谢途径曲线。(2)植物甾醇代谢途径关键酶的确定。在植物甾醇代谢途径解析的基础上,比较分析了有无添加大豆油的两个条件下分枝杆菌LY-1转化植物留醇的发酵过程。根据转化过程中菌体生长和产物合成之间的关联特征,分别选取转化前期(60 h)、中期(84 h)和后期(168 h)叁个时间点的样品用于后续差异转录水平分析。采用qRT-PCR技术,分析比较了两种条件下37个留醇代谢相关酶基因的转录水平差异情况。结果表明代谢途径中的9个酶基因在转录水平差异较为明显,为甾醇代谢途径的关键酶。其中2个为降解途径关键酶KstD,其他7个为合成途径关键酶,包括Cho,FadE30,HsdB,KshA2,KshB,Hsd1 和 FadA5。(3)分枝杆菌LY-1的代谢工程改造。在野生型菌株分枝杆菌LY-1中,分别对7个合成途径关键酶Cho,FadE30,HsdB,KshA2,KshB,Hsd1和FadA5进行了单一增强表达。结果表明,7个增强表达重组菌转化植物甾醇产9α-OH-AD的能力均有一定程度的提高,其中增强表达重组菌LY-1-kshA2的产物得率最高。当底物植物甾醇的浓度为15 g.L-1,产物9α-OH-AD的摩尔得率可达40.8%。为了进一步提高重组菌9α-OH-AD的生成能力,在单基因增强表达的基础上,构建了 kshA2,kshB和hsdB叁个基因的组合增强表达重组菌株LY-1-kshA2-kshB-hsdB。结果显示,重组菌LY-1-kshA2-kshB-hsdB目的产物9α-OH-AD得率提高到43.4%。(4)基因工程重组菌株的转化工艺优化。以构建的重组菌株LY-1-kshA2-kshB-hsdB为研究对象,在摇瓶中考察了培养基组分如碳源、氮源、磷酸盐和金属离子等对菌株转化植物甾醇生产9α-OH-AD的影响。并采用统计学正交试验方法对培养基组分进行了优化,最终确定了重组菌LY-1-kshA2-kshB-hsdB的最适培养基配方:玉米浆30g·L-1、KN034.0 g·L-1、NaH2PO41.2g·L-1、FeSO40.075 g·L-1 及 CaC120.10g·L-1。在该工作基础上,对培养条件进行了优化,确定了工程菌株的最适条件:pH 8.0,接种量2%,温度30℃,转速120rpm。在以上最适的培养工艺条件下,底物植物甾醇的投料浓度由15 g·L-1提高至30 g·L-1,目的产物9α-OH-AD的得率稳定在41%左右。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
高效分枝论文参考文献
[1].邢述永,路志群,夏海洋,邓自发,王兆慧.构建CRISPR-Cas9介导的耻垢分枝杆菌基因组高效删除系统[J].微生物学通报.2018
[2].王向栋.分枝杆菌高效生产9α羟基雄烯二酮的代谢工程改造[D].江南大学.2018
[3].马洋,王向栋,王萌慧,李会,史劲松.高效转化植物甾醇为9α-OH-AD的分枝杆菌诱变选育及工艺优化[J].生物工程学报.2017
[4].朱晓强.分枝结构光滑曲面的高效建模[D].浙江大学.2013
[5].尚淑琴,王丽梅,张薇,曾令城,陈宝忠.结核分枝杆菌Rv2031c基因在P815细胞中的高效表达[J].热带病与寄生虫学.2012
[6].薛玉芹,王英,陈勇,唐洁,王雪梅.结核分枝杆菌CFP-10的克隆与高效可溶性原核表达[C].第八届全国免疫学学术大会论文集.2012
[7].陈保文,都伟欣,杜蓉,闫李侠,郭磊.反相高效液相色谱法和16SrRNA序列分析法对分枝杆菌分型鉴别的比较研究[J].中国医药生物技术.2012
[8].李邦印,孙卫国,王仲元,胡永亮,苏锐.结核分枝杆菌HspX蛋白的原核高效可溶性表达及产物抗原性分析[J].生物技术通讯.2012
[9].李兵,刘威龙,张晶,张明霞,邓群益.结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6kDa蛋白原核载体的构建及在E.coli中的高效表达[J].临床肺科杂志.2010
[10].苏锐,李邦印,王臻,王仲元,程小星.结核分枝杆菌phoS2基因在大肠埃希菌中的高效表达及其产物抗原性分析[J].中国防痨杂志.2009
论文知识图
