导读:本文包含了蜘蛛牵引丝论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蜘蛛,基因工程,蛋白,家蚕,桑蚕,分子结构,相位。
蜘蛛牵引丝论文文献综述
钟伯雄,尤征英,叶露鹏,钱秋杰,叶小刚[1]（2016）在《利用黑寡妇蜘蛛牵引丝基因培育超强度蚕丝家蚕新品种》一文中研究指出蜘蛛牵引丝具有出色的机械性能,本研究采用家蚕丝腺生物反应器获得了黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白叁种不同倍数重复单元的重组蛋白1和一种重组蛋白2的复合丝纤维,研究结果表明了重组蛋白1的分子链越长,则复合丝纤维的机械性能越好,两者为极显着线性关系(p<0.01);研究还表明只包含单一种类的决定强度特性的蛋白基序的MaSp1分子构建的丝的强度,比相同蛋白链长度的、既包含决定强度特性又包含决定弹性特性的MaSp2分子的丝的强度强。结果说明一级结构中包含的各种蛋白基序是蜘蛛牵引丝能够获得优异的机械性能的一个保证,而单一种类的蛋白基序且足够长的蛋白分子链,是蛋白类丝纤维优异的机械性能的另一个不可或缺的最终的重要保证。研究已成功获得了16个转蜘蛛丝基因家蚕品系。这些品系的茧丝的机械性能显着提高,与野生型对照品种相比,转蜘蛛丝家蚕丝的应力最高提高1.719倍,应变最高提高1.345倍,杨氏模量最高提高1.576倍,韧性最高提高2.317倍。研究结果能够大幅度提升蚕丝品质,全面提升蚕桑产业的效益,促使蚕桑产业的变革。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
刘大彪,余龙腾,彭凯,何玉明[2]（2015）在《蜘蛛牵引丝的扭转振动力学行为实验研究》一文中研究指出完善了蜘蛛牵引丝的获取、试样制备和夹持技术,采用自行研制的精密扭摆实验装置,对Nepbila pilipes和Nephila edulis两种蜘蛛的牵引丝进行了扭转振动测试,重点研究其在不同应变幅下的扭转振动行为,并将实验结果与直径在微米量级的多晶铜丝、多晶银丝和T300碳纤维进行了对比。(本文来源于《中国力学大会-2015论文摘要集》期刊2015-08-16）
乔鑫,王妍,李俊杰,段翠密,王海滨[3]（2014）在《蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化》一文中研究指出目的通过基因工程手段实现牵引丝关键组成蛋白MaSp1在大肠杆菌中的异源表达,并对其进行分离纯化,从而建立基因工程蜘蛛丝基因序列串联拼接、载体构建以及原核表达与纯化的关键技术体系。方法利用同尾酶连接法对合成的基因工程蜘蛛丝基因单体序列进行串联拼接,获得多倍串联体克隆重组子,将鉴定正确的多倍串联体克隆重组子与原核表达载体pET28a(+)连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western印迹进行鉴定。在此基础上对工程菌进行高密度发酵,所获蛋白通过硫酸铵分级分离方法进行纯化。结果与结论成功构建了基因工程蜘蛛丝MaSp1多串联体的表达载体,原核表达蛋白的相对分子质量与预期一致,且纯化的目的蛋白纯度达80%以上。上述研究工作为开展基因工程蜘蛛丝蛋白的规模化制备建立了关键技术方法,并为后续基因工程蜘蛛丝的人工纺丝提供必要的前提和工作基础。(本文来源于《军事医学》期刊2014年08期）
乔鑫[4]（2014）在《蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出蜘蛛大壶腹腺产生的牵引丝具有优良的机械特性，是自然界综合性能最好的天然生物材料之一，具有高强度、高弹性和高断裂功的特点，其强度为钢丝的5倍，韧度为Kelvar纤维的3倍；在低温和高温等极端条件下，天然蜘蛛丝仍然具有优异的性能。基于这些独特的物理和生物学特性，蜘蛛牵引丝在医学、材料、军事等方面具有广泛的应用前景。然而，蜘蛛的天性决定了无法通过大规模饲养的途径获取大量蜘蛛丝蛋白，因此利用基因工程的方法异源表达重组蜘蛛丝蛋白就成为规模化获取蜘蛛丝蛋白的有效途径。通过应用现代生物技术和高分子化学手段研究天然蜘蛛丝的组成、结构、性能及其形成原理，研究人员提出了一种新的基于天然蜘蛛丝蛋白结构的基因工程方法，依据蜘蛛丝蛋白高度保守的结构域以及具有大量串联重复的一致序列的特点，通过分子克隆的手段获取接近天然长度的编码基因，利用多种表达系统获得与天然蜘蛛丝蛋白极其相似的蛋白质，并模拟天然蜘蛛丝成丝过程，在体外成功制备出人工蜘蛛丝纤维，这为具有成本效益地大规模人工生产蜘蛛丝提供了理论和技术基础。在基因工程蜘蛛丝蛋白核心序列研究方面，目前已经研究清楚蜘蛛丝蛋白有几大类重复基序，基本上可以归纳为丙氨酸富含基序(An/(GA) n)、GPGXX五肽基序、GGX基序和间隔区（Spacer）基序四类，这四类基序形成有一定特征的结构来履行独特的功能。其中丙氨酸富含基序形成β-折迭片层，为蜘蛛丝提供强度；GPGXX五肽基序形成β-转角螺旋，为蜘蛛丝提供高的弹性。基于天然蜘蛛丝优良特性的结构基础是由4个简单重复的氨基酸基序组成的非常保守的蛋白序列，可以采取将关键功能单元进行重复性拼接来获得基因工程蜘蛛丝蛋白编码基因序列。目前，国际上普遍采用将这些高度保守的功能单元组合拼接，实现基因工程蜘蛛丝全长序列的构建，并且获得了性能接近天然蜘蛛丝的人工合成蜘蛛丝。因此，通过基因重组的方式，对核心单元串联拼接的构建方式是通过研究证实的、行之有效的基因工程蜘蛛丝编码基因克隆的通用策略。结合基因工程蜘蛛丝合成当前的国内外研究进展以及存在的一些问题，本论文主要从以下叁个方面开展相关研究工作：第一部分：基因工程蜘蛛丝蛋白分子设计本部分研究首先检索国际上已有报道的基因工程蜘蛛丝蛋白的核心结构单元，从中选取具有代表性的基因工程蜘蛛丝核心序列与天然的蜘蛛牵引丝蛋白核心序列通过计算机辅助分子模拟技术，模拟其可能的空间构象，进而挑选出一条在空间结构上最接近于天然蜘蛛丝蛋白的序列；随后根据大肠杆菌的叁联体密码子偏好性，选取蜘蛛丝核心序列所对应的大肠杆菌偏性密码子，从而设计出适用于大肠杆菌系统表达的基因工程蜘蛛丝核心基因编码序列；最后根据核心序列串联拼接及原核表达载体构建中所需要的限制性内切酶位点，在核心序列的两端分别加上克隆酶切位点，并于序列两端加上保护碱基。通过分析与设计，设计获得了长度为135bp的基因工程蜘蛛丝核心基因序列，以该序列作为单体，通过后续的连续串联拼接，可以获得接近天然蜘蛛丝基因序列长度的目的基因，从而为后续开展基因工程蜘蛛丝编码基因克隆以及表达载体构建研究提供可靠的序列信息。第二部分：基因工程蜘蛛丝核心序列的拼接及载体构建获取基因工程蜘蛛丝重组载体是本项目开展的重要基础性工作，通过分子生物学技术构建接近天然蜘蛛丝大小的串联拼接基因片段是最终决定基因工程蜘蛛丝性能的关键。本部分研究我们采用同尾酶连接法进行基因工程蜘蛛丝基因序列的串联拼接，以全基因合成的核心序列单倍串联体——pBSK1序列为基础，分别进行XmaI/Sca I和BspE I/Sca I双酶切，回收酶切目的片段，T4连接酶快速连接，转化至DH5α感受态细胞，重组子经过Amp抗性筛选和重组克隆载体的酶切鉴定，得到2倍串联体克隆重组子，在此基础上重复上述过程，使得核心序列依次倍加，最终获得96串联体克隆重组子；对所有的克隆重组子进行酶切鉴定，确认插入的目的基因片段大小无误。最后，将构建的克隆载体酶切，连接至已经线性化的pET28a(+)质粒，构建出含有蜘蛛丝核心序列的串联体原核表达载体。本部分研究利用基因工程技术和分子生物学手段，获得了基因工程蜘蛛丝2-96倍串联体克隆载体，并构建出含有蜘蛛丝核心序列的串联体原核表达载体。经限制性内切酶反应鉴定插入序列完全正确，上述克隆载体和表达载体的获得为下一步基因工程蜘蛛丝的原核表达奠定了基础。第叁部分：基因工程蜘蛛丝蛋白的表达与鉴定如何将构建的蜘蛛丝蛋白表达载体导入到原核或真核细胞中实现高效表达；并通过优化纯化方法获取大量高纯度的蜘蛛丝蛋白是进行蜘蛛丝纺丝的重要前提。本部分研究旨在鉴定所构建的基因工程蜘蛛丝不同串联体的表达载体能够在大肠杆菌中正确表达目的片段，我们将原核表达载体转化至BL21(DE3)感受态中，获取转化阳性克隆菌株后，在37℃培养至OD600约0.6后，加IPTG至终浓度为1mmol/L，于30℃诱导表达6h后，收获培养细胞，制备全菌裂解液上清，以10%的SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹实验对目的蛋白的表达情况进行鉴定。结果表明：空载体对照pET28a(+)没有检出相关蛋白的表达，而不同串联体基因工程蜘蛛丝蛋白表达载体均检测到有目的重组蛋白的表达，且产物大小分别与预期相对分子质量一致。除上述特异性目的蛋白之外，均未发现有其他截断的阳性蛋白条带存在，同时也说明在基因工程蜘蛛丝蛋白原核表达过程中，未发生提前翻译终止的现象和基因删节表达现象。本部分研究验证了所构建的基因工程蜘蛛丝表达载体的正确性，并初步获得重组目的蛋白的表达，为下一步开展基因工程蜘蛛丝蛋白的高密度发酵工作奠定基础。综上所述，本研究以研制高强度的基因工程蜘蛛丝为目标，围绕基因工程蜘蛛牵引丝蛋白Masp1原核表达载体构建及蛋白表达的关键技术环节，通过计算机辅助的分子设计方法，筛选了空间结构与天然蜘蛛丝最为相近的核心序列；利用同尾酶连接方法，将单倍体依次串联拼接，成功构建了2-96串联体基因工程蜘蛛牵引丝蛋白Masp1原核表达载体，在此基础上，实现了上述表达载体在大肠杆菌中的表达，验证了所构建载体的正确、充分地表达，并无表达提前终止的现象。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2014-05-28）
张磊,鲍先巡,刘明辉,韩冷,中垣雅雄[5]（2013）在《用拉曼光谱研究不同吐丝方式获得的蜘蛛牵引丝的二级结构(英文)》一文中研究指出利用傅里叶变换拉曼光谱技术对不同吐丝环境下获得的棒络新妇蜘蛛牵引丝(自由爬行分泌的牵引丝,垂直下落时分泌的牵引丝,在20 mm·s-1的速度下人工强制抽取的牵引丝)纤维大分子结构进行了分析,对特征谱带的分析结果表明,蜘蛛牵引丝蛋白中包含了β-折迭,β-转角,α-螺旋以及无规卷曲结构;酰胺I带中,不同的方式获得的牵引丝中所含的4种二级结构的比例不同。其中人工强制抽取获得的牵引丝中包含较多的β-折迭结构,α-螺旋含量最少,说明在不同环境条件下,蜘蛛分泌牵引丝的结构会发生变化,这一改变可能会导致丝纤维的力学特性的改变。(本文来源于《安徽农业大学学报》期刊2013年01期）
李占龙,刘铁成,周密,陆国会,里佐威[6]（2008）在《蜘蛛牵引丝不同溶剂伸缩特性及丝蛋白构象变化的研究》一文中研究指出动物丝纤维的特殊性能与丝蛋白的构象密切相关,本文对蜘蛛牵引丝的不同溶剂下的收缩率和水处理的构象变化进行了研究。水中蜘蛛丝收缩最大,达到50%;通过红外光谱分析,对水处理的丝蛋白的构象进行了研究,结果表明丝蛋白β折叠结构增加,而β转角变化很小。氢键受到水分子的影响高频组份与低频组份比例发生变化,进而对酰胺I谱带的C=O的振动的频率产生影响,使C=O的电子云密度降低,酰胺I频率向低频方向发生移动,这说明酰胺I的振动频率与氢键是紧密相关的。(本文来源于《光散射学报》期刊2008年02期）
马鹤雯,张立树,郑伟,张永亮,张玉静[7]（2007）在《外源丙氨酸提高蜘蛛牵引丝蛋白天然基因在原核系统中的表达》一文中研究指出蜘蛛丝蛋白天然基因的体外表达受诸多因素的限制。在获得生长于中国的Nephilaclavipes蜘蛛牵引丝蛋白Spidroin2cDNA(No.AF441245)的基础上,利用限制性内切酶双酶切反应构建含有Spidroin2cDNA的重组表达质粒pET-28b(+)-Sp。将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞感受态菌中,以不同浓度的IPTG进行诱导,并通过诱导时间、培养温度、加入外源丙氨酸等途径提高Spidroin2cDNA的表达量,同时利用多克隆抗体对表达产物进行Westernblot检测。重组质粒pET-28b(+)-Sp的测序结果表明Spidroin2cDNA基因以正确的阅读框插入到原核表达载体中;SDS-PAGE结果表明菌体表达蛋白中存在着大小约为31kDa的目的蛋白带(加入外源丙氨酸条件下),Westernblot检测结果进一步证实,目的基因在大肠杆菌中得到正确表达。实验证明,蜘蛛牵引丝蛋白Spidroin2cDNA可在原核细胞内正确表达,外源丙氨酸的加入对于提高天然蜘蛛丝蛋白基因在原核系统的表达作用明显。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2007年01期）
赵静娜[8]（2006）在《不同种类蜘蛛牵引丝的性能差异》一文中研究指出蜘蛛能分泌出高性能的纤维,该纤维的强力和韧性优于最好的人造纤维。不同蜘蛛分泌的丝纤维的性能之间存在着一定程度的差异。目前为止已经确定了多种类型蜘蛛丝蛋白的氨基酸序列,推测认为氨基酸序列的变化会造成蜘蛛丝性能的差异。用Nano Bionix张力测试仪测量了多类蜘蛛牵引丝的力学性能,包括织圆网的蜘蛛和不织空中捕捉网的代表性蜘蛛。研究发现所有种类的蜘蛛都能分泌出高性能的牵引丝,且牵引丝优异性能的形成早于蜘蛛所织的悬挂于空中的圆网本身。然而,各类被测试样的性能之间还是存在着显着的差异,且没有相关的趋势。也就是说不同种类的蜘蛛丝可能具有不同的性能。研究认为,牵引丝序列谱图和经过长期进化而获得的性能为仿生丝纤维的设计提供了丰富的资源。(本文来源于《国外丝绸》期刊2006年04期）
张恒木,刘进元[9]（2005）在《蜘蛛牵引丝蛋白的特性及其分子工程》一文中研究指出蜘蛛牵引丝是由蜘蛛主壶腹腺产生的一种具有高度重复结构的蛋白质纤维,它将高抗张强度和高弹性奇妙地结合于一体,是自然界强度最高的纤维.基因解析揭示出牵引丝至少存在两种高度重复的蛋白组分,每种蛋白的重复单元都显示出富丙氨酸区和富甘氨酸区交替的模块结构特征,采用分子工程技术不仅可以生产出具有天然牵引丝蛋白特性的重组蜘蛛丝蛋白,也可为研究牵引丝蛋白的模块结构与功能特性之间的关系开辟道路,文中结合我们的研究综述了牵引丝蛋白的模块结构及其分子工程的研究进展,并就其未来发展进行展望,(本文来源于《自然科学进展》期刊2005年06期）
周平,Beat,H.Meier[10]（2004）在《Nephila edulis蜘蛛牵引丝形态的~(13)C NMR研究》一文中研究指出蜘蛛牵引丝因其出色的材料力学性能近年来引起人们广泛的重视。然而,人们却对丝的加工及形成过程的机理知之甚少。这里,我们报道了用~(13)C 核磁共振研究 Nephila edulis 蜘蛛牵引丝在各种形态下的结构,如液态腺体、脱水薄膜、伴随旋转干燥的腺体以及受迫抽丝后的丝线。用产生牵引丝的主腺体中所含的氨基酸(主要为甘氨酸 Ala 和丙氨酸 Gly)经~(13)C 标记后喂养蜘蛛约3周,由此获得所需的丝线和腺体样品。(本文来源于《第十叁届全国波谱学学术会议论文摘要集》期刊2004-08-01）
蜘蛛牵引丝论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
完善了蜘蛛牵引丝的获取、试样制备和夹持技术,采用自行研制的精密扭摆实验装置,对Nepbila pilipes和Nephila edulis两种蜘蛛的牵引丝进行了扭转振动测试,重点研究其在不同应变幅下的扭转振动行为,并将实验结果与直径在微米量级的多晶铜丝、多晶银丝和T300碳纤维进行了对比。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蜘蛛牵引丝论文参考文献
[1].钟伯雄,尤征英,叶露鹏,钱秋杰,叶小刚.利用黑寡妇蜘蛛牵引丝基因培育超强度蚕丝家蚕新品种[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[2].刘大彪,余龙腾,彭凯,何玉明.蜘蛛牵引丝的扭转振动力学行为实验研究[C].中国力学大会-2015论文摘要集.2015
[3].乔鑫,王妍,李俊杰,段翠密,王海滨.蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化[J].军事医学.2014
[4].乔鑫.蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达[D].中国人民解放军军事医学科学院.2014
[5].张磊,鲍先巡,刘明辉,韩冷,中垣雅雄.用拉曼光谱研究不同吐丝方式获得的蜘蛛牵引丝的二级结构(英文)[J].安徽农业大学学报.2013
[6].李占龙,刘铁成,周密,陆国会,里佐威.蜘蛛牵引丝不同溶剂伸缩特性及丝蛋白构象变化的研究[J].光散射学报.2008
[7].马鹤雯,张立树,郑伟,张永亮,张玉静.外源丙氨酸提高蜘蛛牵引丝蛋白天然基因在原核系统中的表达[J].中国生物工程杂志.2007
[8].赵静娜.不同种类蜘蛛牵引丝的性能差异[J].国外丝绸.2006
[9].张恒木,刘进元.蜘蛛牵引丝蛋白的特性及其分子工程[J].自然科学进展.2005
[10].周平,Beat,H.Meier.Nephilaedulis蜘蛛牵引丝形态的~(13)CNMR研究[C].第十叁届全国波谱学学术会议论文摘要集.2004
论文知识图
