短乳杆菌2-34中瓜氨酸转运蛋白的鉴定

论文摘要

【背景】从黄酒发酵液中分离的短乳杆菌2-34具有重吸收瓜氨酸的能力,可用于降低黄酒中的瓜氨酸从而减少氨基甲酸乙酯的形成,然而瓜氨酸重吸收机制的不明确阻碍了该菌的合理利用。【目的】通过确定短乳杆菌2-34中的瓜氨酸转运蛋白编码基因,为其在黄酒中的利用提供理论依据。【方法】以pRSFDuet-1和pETDuet-1为表达载体,通过多顺反子串联表达系统及双质粒表达系统,在大肠杆菌C43（DE3）中表达短乳杆菌2-34精氨酸脱亚胺途径中瓜氨酸代谢相关蛋白:精氨酸降解酶ArcD和ADI、瓜氨酸降解酶OTC及膜蛋白DcuC和AO antiporter。【结果】重组表达大肠杆菌发酵过程中可利用精氨酸形成瓜氨酸,但表达了膜蛋白DcuC和AO antiporter的重组菌发酵液中瓜氨酸含量较低。【结论】短乳杆菌2-34中DcuC和AOantiporter均具有吸收瓜氨酸的功能,且DcuC活性更高。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 培养基
•     1.1.2 主要试剂和仪器
•     1.1.3 引物设计与合成
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 重组质粒的构建
•     1.2.2 目的蛋白的诱导表达
•     1.2.3 高效液相色谱检测发酵液中L-精氨酸/L-瓜氨酸的含量
• 2 结果与分析
•   2.1 重组菌株的构建与鉴定
•   2.2 DcuC对瓜氨酸的重吸收
•   2.3 AO antiporter对瓜氨酸的重吸收
•   2.4 DcuC和AO antiporter对瓜氨酸的吸收
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘晓慧,李晓敏,禹伟,吴殿辉,陆健

关键词: 黄酒,短乳杆菌,瓜氨酸重吸收,重组表达

来源: 微生物学通报 2019年09期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学生物工程学院,江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金(3170101535)~~

分类号: TS262.4;TS261.1

DOI: 10.13344/j.microbiol.china.180794

页码: 2249-2257

总页数: 9

文件大小: 796K

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