旋覆花内酯论文-王海娇

导读:本文包含了旋覆花内酯论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:1,6-二氧-乙酰大花旋覆花内酯,辣椒疫霉,iTRAQ,生物活性

旋覆花内酯论文文献综述

王海娇^[1]（2018）在《1,6-二氧-乙酰大花旋覆花内酯对辣椒疫霉的抑菌活性研究》一文中研究指出由辣椒疫霉Phytophthora capsici引起的辣椒疫病是一种毁灭性土传病害,目前已成为限制辣椒生产的重要因素。由于缺乏抗疫病的辣椒品种,防治辣椒疫病主要依靠甲霜灵、杀毒矾M8、氰霜唑、丁吡吗啉和氟噻唑吡乙酮等化学杀菌剂。但随着这些药剂的长期使用,加上疫霉菌极易发生变异,导致耐/抗药菌株的产生。因此,寻求化学杀菌剂的安全替代药剂引起了人们的高度重视。前期研究表明,1,6-二氧-乙酰大花旋覆花内酯(ABLOO)是欧亚旋覆花中对植物病原真菌具有强烈杀菌活性的化合物,但其作用机制研究甚少,且尚未明确。因此,本研究以辣椒疫霉为靶标菌,研究ABLOO对辣椒疫霉不同生长发育阶段的影响,并应用iTRAQ技术分析ABLOO处理前后辣椒疫霉的差异表达蛋白质。主要研究结果如下:1.系统测定了ABLOO对辣椒疫霉菌丝伸长生长、孢子囊形成与释放、游动孢子萌发4个不同生长发育阶段的影响。结果显示,ABLOO对辣椒疫霉菌丝生长抑制的有效中浓度(EC_(50))为95.89mg/L;对辣椒疫霉孢子囊形成的抑制活性最强,其EC_(50)为30.45 mg/L;对孢子囊萌发的EC_(50)为124.59 mg/L;对游动孢子萌发的抑制作用不明显。2.通过光学显微镜和透射显微镜观察发现,经ABLOO处理的辣椒疫霉菌丝形态发生异常,菌丝明显缩短,且分支增多、短小,细胞壁明显变薄,上有清晰可见的凸起。液泡数量减少,但体积增大,且发生融合现象,细胞内其他细胞器受到液泡挤压。3.辣椒疫霉经200 mg/L、300 mg/L和400 mg/L ABLOO处理后,在所测定的360 min内,菌丝体细胞膜的电导率均随着时间的延长而升高,呈明显上升趋势;各浓度处理分别在15、30、60、120、180和360 min六个时间点,菌丝体的电导率均随药剂浓度的升高而增大,且均显着高于对照,当处理时间推移至180 min和360 min时,叁个浓度处理组电导率无明显差异,趋于一致。结果表明,辣椒疫霉经ABLOO处理后,菌丝体细胞内含物通过细胞膜在不断地从细胞内渗漏到溶液中,即细胞膜的通透性逐渐变大,细胞膜的选择透过性遭到了破坏,细胞膜在丧失其应有的功能。4.经50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L和300 mg/L ABLOO处理后,辣椒疫霉菌丝中β-1,3-葡聚糖含量显着下降,其中400 mg/L处理组的抑制率高达70%以上。β-1,3-葡聚糖是疫霉细胞壁的重要组成,其含量下降会导致细胞壁的功能受损,且影响能量供给,进而使辣椒疫霉的孢子萌发、菌丝生长等受到抑制。5.应用iTRAQ技术对ABLOO处理的辣椒疫霉差异表达蛋白进行了鉴定,并对差异蛋白的功能进行了分析。蛋白质鉴定和定量分析结果显示:(1)共计检测鉴定到3808种蛋白质。在相对定量时,以溶液处理的菌丝蛋白样本为对照,分析了ABLOO处理后的辣椒疫霉的差异表达蛋白质(当蛋白的丰度比即差异倍数达到1.5倍以上,且经统计检验其P-value值小于0.05时,视该蛋白为不同样品间的差异表达蛋白),得到794种差异表达蛋白,其中387种蛋白表达上调,407种蛋白表达下调。这些差异表达的蛋白质种类主要包括关键代谢途径中的酶类和一般应激反应蛋白质,例如乙酰辅酶A合成酶(Acetyl-coenzyme A synthetase,D0MRI9)、DNA螺旋酶(DNA helicase,H3GAJ9)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase,A0A0W8C3E6),以及参与生物合成和能量代谢的主要蛋白质。(2)针对显着差异表达的794种蛋白,试验进行了GO(Gene Ontology)分析。结果显示,这些蛋白所涉及的主要分子功能(molecular functional)表现为催单价无机阳离子跨膜运输活性、氢离子跨膜转运活性、跨膜转运体活性、氧化还原酶活性、无机阳离子跨膜转运活性和FMN结合。根据生物学过程(biological process)分类,差异蛋白的种类主要分布于化还原过程、氢离子跨膜运输、无机离子跨膜运输、跨膜运输、离子跨膜运输、阳离子跨膜运输、无机离子跨膜运输和氧化磷酸化中。此外,根据细胞成分(cellular components)分类,462种蛋白质存在于如细胞色素复合物、呼吸链复合体III、膜的固有组分、膜部分等各种细胞成分中。这些结果表明,与对照相比,用药剂处理后的辣椒疫霉蛋白质的调控机制和代谢通路呈现显着的动态变化,显示了辣椒疫霉受到药剂影响后多个生物过程的生理、生化和形态出现差异。(3)针对显着差异表达的794种蛋白,进一步进行了KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析,结果显示差异表达蛋白共建立了83个pathway通路,其中显着富集的pathway通路为碳代谢通路(map01200)、核糖体通路(map03010)、嘌呤代谢通路(map00230)、氨基酸的生物合成(map01230)、脂肪酸代谢(map01212)、丙酮酸代谢(map00640)、内质网蛋白过程(map04141)。特别值得注意的,碳代谢、脂肪酸代谢、丙酮酸代谢等其实都涉及到能量的生成与消耗,而维持能量供给是辣椒疫霉生长发育过程中的必要条件。能量代谢中一些通路的变化势必会影响辣椒疫霉的生长发育以及其自身的正常功能。辣椒疫霉在遭受药剂影响时自身也会调动不同通路紧急运转,以此来抵抗药物影响。综上所述,本研究结果深入地阐释了ABLOO处理后的辣椒疫霉的生物学过程变化以及差异蛋白质表达,为揭示ABLOO的抑菌作用机理奠定了基础。(本文来源于《河南农业大学》期刊2018-05-01）

酉鹏华,何晓敏,林静,陈海潮,崔倩卫^[2]（2018）在《一氧乙酰旋覆花内酯对血管紧张素Ⅱ诱导的肥大心肌细胞的保护性作用》一文中研究指出目的 探讨ABL在心肌细胞肥大中的作用及其机制。方法 体外培养H9C2心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)构建心肌细胞肥大模型;模型组给予1μmol/L AngⅡ刺激24h、ABL处理组给予AngⅡ刺激,同时给予5μmol/L和10μmol/L ABL处理24h。采用心肌细胞肌动蛋白α-actinin染色评价心肌细胞大小,采用RT-PCR检测肥厚相关基因心房利钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、肌球蛋白重链β(β-MHC)的表达;蛋白印迹(Western blot)法检测信号通路蛋白的表达。结果 与模型组比较,5μmol/L和10μmol/L ABL处理组心肌细胞面积明显降低(P<0.05);ANP、BNP、β-MHC肥厚相关基因表达降低(P<0.05),且其抗心肌细胞肥大呈现剂量依赖性(P<0.05)。Western blot法检测结果显示ABL处理组AMPKa磷酸化水平增高(P<0.05),而Akt、m TOR、GSK3β的磷酸化明显抑制(P<0.05);AMPKa拮抗剂Compound C可阻断ABL的心肌保护作用。结论 ABL可通过激活AMPKa信号通路,调节Akt/Mtor/GSK3β对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大发挥保护性作用。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2018年04期）

酉鹏华,饶堃睿,林静,陈海潮,王军伟^[3]（2018）在《一氧乙酰旋覆花内酯对缺氧心肌细胞的作用研究》一文中研究指出目的:探讨一氧乙酰旋覆花内酯(1-O-acetylbritannilactone,ABL)在心肌细胞缺氧损伤中的作用及其机制。方法:体外培养H9C2心肌细胞,构建缺氧损伤模型,分为对照组、缺氧组、1μmol/L ABL组和10μmol/L ABL组。采用CCK-8法检测心肌细胞活力,采用RT-PCR检测白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症指标及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p67phox亚基、NADPH氧化酶gp91phox亚基、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激相关指标的mRNA表达水平,采用活性氧检测试剂盒进行活性氧(ROS)水平检测,用缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt C)及核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB抑制蛋白α(IKBα)的蛋白表达水平。结果:(1)不同浓度ABL对心肌细胞存活率的影响:1、2、5、10μmol/L的ABL均未影响心肌细胞存活率(P均>0.05)。(2)各组心肌细胞缺氧损伤后炎症因子的表达:与对照组相比,缺氧组细胞内IL-1、IL-6、TNF-α等炎性因子的mRNA表达水平均明显升高(P均<0.05),ABL预处理后上述促炎性因子表达水平呈浓度依赖性降低(P均<0.05),但仍高于对照组(P均<0.05),且1μmol/L和10μmol/L ABL组组间差异有统计学意义(P均<0.05)。(3)各组心肌细胞缺氧损伤后氧化应激的变化:与对照组相比,缺氧组细胞ROS水平明显升高,p67phox、gp91phox的mRNA表达水平均明显升高,ABL预处理后上述改变呈浓度依赖性降低(P均<0.05);与对照组相比,缺氧组细胞SOD、GSH-Px的mRNA表达水平均明显降低(P均<0.05),ABL预处理后上述抗氧化物的表达呈浓度依赖性升高(P均<0.05)。(4)各组心肌细胞缺氧损伤后凋亡的变化:与对照组相比,缺氧组细胞凋亡率、Bax和Cyt C的蛋白表达水平均明显升高,Bcl-2的蛋白表达水平则明显降低(P均<0.05),ABL预处理后逆转了上述细胞凋亡率及凋亡相关蛋白的改变(P均<0.05),且作用呈浓度依赖性(P均<0.05);(5)各组心肌细胞缺氧损伤后相关信号通路的变化:与对照组相比,缺氧组细胞的磷酸化p65、IKBα蛋白的表达水平均明显升高(P均<0.05),ABL预处理后上述蛋白表达水平呈浓度依赖性降低(P均<0.05)。结论:ABL可通过抑制NF-κB p65/IKBα信号通路对缺氧损伤的心肌细胞发挥保护性作用。(本文来源于《国际心血管病杂志》期刊2018年01期）

朱虹,魏晓鹏,金美花,秦楠^[4]（2017）在《1,6-O,O-二酰基大花旋覆花内酯衍生物的合成及其抑制NO生成活性》一文中研究指出以从旋覆花中提取分离得到的1-O-乙酰基大花旋覆花内酯(ABL)为原料,经酯化反应或还原反应制备了8个1,6-O,O-二酰基大花旋覆花内酯(OABL)衍生物(化合物1~8),并测定其对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞一氧化氮(NO)生成的抑制作用,评价其抗炎活性。结果表明,化合物5~8具有良好的抑制NO生成活性(IC_(50)<2μmol/L),其活性水平较先导化合物OABL显着提高。(本文来源于《中国药科大学学报》期刊2017年04期）

魏晓鹏,朱虹,陈玉芬,段宏泉,金美花^[5]（2016）在《一氧乙酰基大花旋覆花内酯衍生物的合成与生物活性研究》一文中研究指出一氧乙酰基大花旋覆花内酯(ABL)是中药旋覆花的主要倍半萜类成份。文献报道含有该结构的倍半萜类化合物具有抗炎,抗哮喘,抗肿瘤等多种生物活性。本文首先从旋覆花中分离得到大量ABL,再以此为原料通过酯化反应,氧化反应和还原反应制备了7个ABL衍生物。生物活性研究表明,化合物4可以抑制LPS诱导的巨噬细胞(本文来源于《中国化学会第十一届全国天然有机化学学术会议论文集（第五册）》期刊2016-09-25）

温雅,董立鹏,赵景茹,祝春华^[6]（2016）在《旋覆花内酯通过抑制炎症反应对缺血脑组织发挥保护作用》一文中研究指出目的探讨旋覆花内酯(Acetylbritannilactone,ABL)通过抑制炎症反应对小鼠缺血性脑组织发挥保护作用及其机制。方法线栓法建立CD1小鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。实验分为假手术组、MCAO组、ABL小剂量组(10mg/kg)和ABL大剂量组(30mg/kg)。ABL于术前30min腹腔注射,术后24h后处死小鼠。各组取材前进行神经功能评分,分别用Western blotting和RT-PCR的方法检测缺血脑组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、Toll样受体4(Tolllike receptors 4,TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis receptor associated factor 6,TRAF6)和核因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)蛋白和基因水平的变化,并观察神经功能、脑水肿程度和脑梗死体积。结果与假手术组比较,MCAO组TNF-α、IL-1β、TLR4、TRAF6和NF-κB蛋白和基因表达水平明显升高(P<0.05);ABL能够显着下调炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,降低TLR4、TRAF6和NF-κB的水平(P<0.05),明显改善神经功能、减轻脑水肿、减小梗死体积(P<0.05)。结论 ABL通过抑制脑缺血引发的TLR4/TRAF6/NF-κB级联途径减少TNF-α、IL-1β的表达,发挥对缺血脑组织的抗炎作用,同时改善了脑缺血后小鼠神经功能缺损,减轻脑水肿,减小梗死体积,起到神经保护作用。(本文来源于《河北医科大学学报》期刊2016年05期）

温雅,张祥建,董立鹏,赵景茹,张聪^[7]（2015）在《旋覆花内酯调控microRNA-155介导的炎症反应减轻实验性脑缺血损伤》一文中研究指出目的过度炎症反应是缺血性脑血管病继发性损伤的关键病理机制。大量研究表明microRNA-155(miR-155)可介导炎性细胞因子表达,旋覆花内酯通过抑制炎性相关基因的表达而发挥有效的抗炎作用。但有关缺血性脑血管病继发性炎症损伤中miR-1 55的作用机制及旋覆花内酯的保护作用少见报道。本实验在小鼠永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)所致脑梗死模型上进行了深入研究。方法采用miR-1 55-/-小鼠和野生型小鼠制备pMCAO模(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）》期刊2015-09-18）

温雅,张祥建,董立鹏,赵景茹,张聪^[8]（2015）在《旋覆花内酯调控microRNA-155介导的炎症反应减轻实验性脑缺血损伤》一文中研究指出目的:过度炎症反应是缺血性脑血管病继发性损伤的关键病理机制。大量研究表明microRNA-155(miR-155)可介导炎性细胞因子表达,旋覆花内酯通过抑制炎性相关基因的表达而发挥有效的抗炎作用。但有关缺血性脑血管病继发性炎症损伤中miR-155的作用机制及旋覆花内酯的保护作用少见报道。本实验在小鼠永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)所致脑梗死模型上进行了深入研究。方法:采用miR-155-/-小鼠和野生型小鼠制备pMCAO模型。术前24h侧脑室注射pAd-miR-155诱导miR-155过表达。缺血缺氧(OGD)诱导的BV2细胞和pMCAO小鼠脑组织用于检测旋覆花内酯和miR-155对促炎因子表达的调节。结果:与对照组相比,旋覆花内酯能明显降低神经功能缺损评分、脑梗死体积(P<0.05),抑制OGD诱导的BV2细胞和缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达。机理研究结果表明旋覆花内酯下调TNF-α和IL-1β的表达的机制是抑制NF-κB、TRL4的表达。进一步研究发现miR-155通过上调TRL4的表达,下调SOCS1和MyD88的表达而促进TNF-α和IL-1β的表达。旋覆花内酯能抑制miR-155靶基因的表达。结论:miR-155通过调节TLR4/MyD88和SOCS1的表达在缺血性脑血管病中介导炎症反应,而旋覆花内酯通过抑制miR-155的表达发挥抗炎作用。结果表明miR-155将成为治疗缺血性脑血管病继发性炎症损伤的新靶点。(本文来源于《第十一次中国中西医结合神经科学术会议论文汇编》期刊2015-09-11）

温雅^[9]（2015）在《旋覆花内酯通过调制miR-155介导的炎症反应对缺血性脑组织发挥保护作用》一文中研究指出脑血管病是危害人类健康的主要“杀手”,是导致成年人残疾的第一原因。在脑血管病中,以脑出血、脑血栓和短暂性脑缺血最为常见,该病具有发病率高、病死率高、致残率高、复发率高的特点。研究表明,脑缺血可以触发一系列复杂的病理级联反应,包括能量代谢异常、炎症反应、氧化应激、兴奋性氨基酸的毒性作用等,直接或者间接导致神经细胞凋亡/死亡,最终导致神经功能缺失。在脑缺血引发的复杂的病理损伤机制中,炎症反应是继发性脑损伤的重要原因之一。在缺血性脑损伤中,从受损的脑组织、血管和坏死细胞中释放的细胞因子激活Toll样受体(TLRs),诱导炎性细胞因子,如白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的合成与释放。这些细胞因子引起脑缺血后的炎症反应,进一步加重原发性脑损伤。炎症相关基因的表达不仅可以通过转录因子在转录水平上进行调控,还可以通过micro RNAs(mi RNAs)在转录后水平进行调控。近年的研究表明,mi RNAs可从多方面参与炎症的调节并影响脑缺血。在多种mi RNAs中,mi R-155是新近发现的一种与炎症反应相关的小分子RNA,其异常表达与癌症、心血管疾病、炎症、自身免疫病及移植排斥反应等疾病的发生有关。研究发现,mi R-155可直接参与巨噬细胞的炎症反应,也可通过NF-κB信号通路增强巨噬细胞促炎因子的表达。另外,mi R-155还可以通过靶向不同的炎症介质,如SHIP1、SOCS1、SMAD2和TAB2,起到促炎与抗炎的双重作用。鉴于mi R-155在脑梗死后炎症反应中的重要性,深入研究其在脑梗死损伤中的作用和机制,可为脑卒中的防治提供新的方向。近年来,在对神经保护剂的研究中发现,一些天然或合成的物质对缺血性脑组织具有很好的保护作用。旋覆花内酯(acetylbritannilactone,ABL)是从欧亚旋覆花中分离的一种抗炎单体化合物。以往研究用脂多糖(LPS)和IFN-γ触发单核/巨噬细胞(RAW264.7)、人血管内皮细胞(ECV304)和血管平滑肌细胞(VSMC)的炎症反应,证实ABL对3种细胞的促炎基因(包括COX-2、i NOS)和细胞黏附分子基因(包括VCAM-1、ICAM-1、OPN、MMP-2、MMP-9和黏蛋白-C)表达均具有显着抑制作用,能明显减轻炎症介质的合成、释放及血管炎性反应,并揭示其作用机制是通过特异性抑制NF-κB抑制蛋白(IκB)激酶(IKK)活性和IκB磷酸化及降解,使IκB不能与NF-κB解离而阻止LPS/IFN-γ诱导的NF-κB核转位(即NF-κB活化)及与靶基因顺式元件的结合活性,进而起到抑制NF-κB依赖的促炎基因和细胞黏附分子基因表达的作用。ABL还能够抑制PDGF诱导的DNA合成和细胞增殖,并通过增高Bax/Bcl-2的比率,激活caspase-9/-3,导致血管平滑肌细胞的凋亡。虽然ABL在巨噬细胞和血管平滑肌细胞中表现出强有力的抗炎和抗增殖作用,但ABL在脑缺血中的作用尚未被揭示。同时,ABL在脑缺血中的抗炎作用是否是通过调制mi R-155表达而实现的,目前仍不清楚。本研究将分叁部分对上述问题进行探讨,现将各部分内容概述如下:第一部分旋覆花内酯对小鼠脑缺血诱发的炎症反应的影响目的:观察ABL在缺血性脑损伤中的抗炎作用。方法:选用成年雄性CD1小鼠,采用改良线栓法制备MCAO小鼠模型。将CD1小鼠随机分为5组:假手术组(sham)、模型组(MCAO)、ABL小剂量组(ABL-L)、ABL中剂量组(ABL-M)、ABL大剂量组(ABL-H)。Sham组:除不插入尼龙线外其余操作同模型组。MCAO组:用线栓法制作右侧大脑中动脉闭塞模型。ABL干预组:在MCAO术前30min,腹腔注射ABL。小剂量组:ABL 10 mg/kg,中剂量组:ABL 20 mg/kg,大剂量组:ABL 30 mg/kg。将BV2小胶质细胞分为对照组(con)和氧糖剥夺处理组(OGD),氧糖剥夺处理组再分为用ABL(100μmol/L)预处理24 h和不用ABL预处理组。ABL预处理组预先用100μmol/L的ABL预处理BV2小胶质细胞24 h。脑缺血后24 h处死动物进行观察、检测。各组取材前进行神经功能评分、TTC染色评价梗死体积、干湿重法测定脑水肿;并应用免疫组化法、Western-blotting和q RT-PCR方法检测脑组织和BV2细胞中TNF-α、IL-1β、NF-κB、TLR-4以及I-κB、My D88和SOCS1的表达。1神经功能评分:MCAO组明显高于sham组(P<0.05);ABL处理后,ABL-M组与ABL-H组神经功能评分明显低于MCAO组(P<0.05);但ABL-L组与MCAO组比较无统计学差异(P>0.05)。2脑组织水含量:MCAO组明显高于sham组(P<0.05);ABL处理后,ABL-H组和ABL-M组脑组织含水量明显低于MCAO组(P<0.05),ABL-L组脑组织含水量与MCAO组差异无统计学意义(P>0.05)。3脑梗死体积:sham组表现为均匀一致的红色,MCAO组出现大范围苍白色梗死区域。ABL处理后,大、中、小叁个剂量组苍白色梗死区域体积均缩小。4 ABL减轻了小鼠局灶性脑缺血损伤后的炎症反应:免疫组化结果显示,MCAO组可见许多深染、固缩核的TNF-α、IL-1β阳性细胞。ABL处理后,阳性细胞数均有减少。Western blotting结果显示,MCAO组TNF-α和IL-1β表达明显升高(P<0.05),而叁种不同剂量的ABL均能降低TNF-α和IL-1β的表达(P<0.05),其中ABL-H组更为明显。q RT-PCR结果显示,MCAO组TNF-α和IL-1β表达明显升高(P<0.05),ABL处理后,TNF-α和IL-1βm RNA表达明显降低(P<0.05)。ELISA结果显示,与MCAO组相比,ABL-M处理组中TNF-α和IL-1β的含量显著下降(P<0.05)。而在细胞水平,BV2细胞被氧糖剥夺处理后,TNF-α、IL-1β表达明显升高(P<0.05)。ABL(100μmol/L)处理后,与单纯氧糖剥夺处理组相比,TNF-α、IL-1β表达明显下降(P<0.05)。5 ABL通过抑制TLR-4/NF-κB信号通路减轻炎症反应:免疫组化结果显示,MCAO组可见许多深染、固缩核的NF-κB和TLR-4阳性细胞。ABL处理后,各剂量组NF-κB和TLR-4阳性细胞数均有减少。Western blotting结果显示,MCAO组NF-κB和TLR-4水平明显升高(P<0.05),而I-κB和TAB2水平显着降低(P<0.05),My D88和SOCS1在MCAO24h水平无明显变化(P>0.05)。叁种不同剂量的ABL均能降低NF-κB和TLR-4的水平(P<0.05),其中ABL-H组更为明显。相反,ABL呈剂量依赖地增加了炎症负性调节炎症因子I-κB、My D88和SOCS1的表达(P<0.05)。而在细胞水平Western blotting结果显示,BV2细胞被氧糖剥夺处理后,NF-κB和TLR-4水平明显升高(P<0.05)。ABL(100μmol/L)处理后,显着减少了NF-κB和TLR-4的水平(P<0.05),增加了I-κB、My D88、SOCS1水平。结论:ABL可显着改善局灶性脑缺血损伤后小鼠神经功能缺损,减轻脑水肿,减小梗死体积,起到神经保护作用;ABL通过抑制脑缺血引发的TLR4/NF-κB信号级联减少TNF-α、IL-1β的表达,同时通过上调TLR4/NF-κB途径中的负调节因子My D88和SOCS-1表达,发挥对脑缺血损伤的抗炎作用。第二部分mi R-155在缺血性脑组织中的表达及旋覆花内酯对mi R-155目的:观察mi R-155是否参与缺血脑组织的炎症反应,以及ABL是否通过调节mi R-155的表达来发挥抗炎作用。方法:实验1:选用成年雄性CD1小鼠,采用改良线栓法制备MCAO小鼠模型。将CD1小鼠随机分为5组:假手术组(sham)、模型组(MCAO)、ABL小剂量组(ABL-L)、ABL中剂量组(ABL-M)、ABL大剂量组(ABL-H)。将BV2小胶质细胞分为对照组(con)和氧糖剥夺处理组(OGD),再分为用ABL(100μmol/L)预处理24 h和不用ABL预处理组。用q RT-PCR和报告基因方法检测脑组织和BV2细胞中mi R-155的表达。实验2:选用8周龄雄性mi R-155基因敲除(mi R-155 KO)小鼠和野生型(wild-type,WT)小鼠,并向WT小鼠侧脑室注射p Ad-mi R-155(p Ad作为对照),以过表达mi R-155。采用改良线栓法制备MCAO小鼠模型。ABL处理组MCAO术前30 min,腹腔注射ABL(20mg/kg)。在BV2小胶质细胞中过表达或敲低mi R-155。腺病毒感染实验用于在BV2中过表达mi R-155;si RNA转染用于在BV2中敲低mi R-155。再分为ABL处理组(100μmol/L)和不用ABL处理组,氧糖剥夺处理24 h。脑缺血后24 h处死动物进行观察、检测。各组取材前进行神经功能评分、TTC染色评价梗死体积;应用Western blotting和q RT-PCR方法检测脑组织和细胞中TNF-α、IL-1β的表达。1缺血脑组织和OGD诱导的BV2细胞中mi R-155的表达:q RT-PCR结果显示,MCAO后24 h,与sham组相比,脑组织中mi R-155的表达显着升高(P<0.05),而ABL处理后,mi R-155表达显着减少,且呈剂量依赖性。BV2小胶质细胞经OGD处理4 h后mi R-155的表达显着升高(P<0.05);用ABL预处理24 h,mi R-155的表达则明显下降(P<0.05)。2神经功能评分:MCAO 24 h后,与WT组相比,mi R-155KO组的神经功能评分明显降低(P<0.05);而ABL处理不再继续降低神经功能评分(P>0.05)。3脑梗死体积:MCAO 24 h后,与WT组相比,mi R-155KO组苍白色梗死体积明显缩小(P<0.05);但ABL处理不再使梗死体积进一步减少(P>0.05)。4 ABL抑制mi R-155介导的炎症反应:Western blotting结果显示,梗死后,mi R-155 KO小鼠缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达显著减少(P<0.05);ABL处理进一步减少了mi R-155 KO小鼠TNF-α和IL-1β的表达。在q RT-PCR结果中,我们观察到相似的变化。通过向WT小鼠侧脑室注射p Ad-mi R-155使mi R-155过表达后,则显着增高缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达水平,两种炎症因子的上调可被ABL轻微抑制。q RT-PCR的结果与蛋白表达变化相一致。细胞水平显示,过表达mi R-155显着增加OGD诱导的BV2小胶质细胞的TNF-α和IL-1β表达(P<0.05)。敲低mi R-155则明显减低了TNF-α和IL-1β的水平(P<0.05),并且ABL处理能进一步减少这两种炎性因子的表达。结论:在缺血脑组织和OGD诱导的BV2细胞中,mi R-155表达显着增加,ABL抑制mi R-155的表达;mi R-155功能获得和缺失实验证实,mi R-155介导TNF-α和IL-1β的表达;ABL通过抑制mi R-155表达来下调TNF-α和IL-1β的水平,从而起到抑制炎症反应的作用。第叁部分旋覆花内酯通过抑制mi R-155介导的炎症反应而发挥脑保护作用目的:揭示ABL调制mi R-155表达及其抗炎作用的分子机制。方法:选用8周龄雄性mi R-155基因敲除(mi R-155 KO)小鼠和野生型(wild-type,WT)小鼠,通过向WT小鼠侧脑室注射p Ad-mi R-155使mi R-155过表达。采用改良线栓法制备MCAO小鼠模型。MCAO前30min,ABL处理组向腹腔注射ABL(20 mg/kg)。在BV2细胞中过表达或敲低mi R-155,腺病毒感染实验用于在BV2细胞中过表达mi R-155,si RNA转染实验用于敲低mi R-155。再分为ABL处理组(100μmol/L)和不用ABL处理组两组。OGD处理24 h。脑缺血后24 h处死动物进行观察、检测。应用Western blotting和q RT-PCR方法检测脑组织和BV2细胞中TLR4、My D88和SOCS1的表达;用Western blotting检测Akt、ERK、JNK和NF-κB等炎症信号转导分子的磷酸化水平。1 ABL通过调制TLR4/My D88和SOCS1表达抑制mi R-155介导的炎症反应:Western blotting结果显示,WT小鼠MCAO后24 h,TLR4条带明显可见,而TLR4表达在mi R-155 KO小鼠中明显降低(P<0.05),同时,TLR4表达在mi R-155 KO小鼠中不再因ABL处理而进一步降低。mi R-155 KO小鼠中My D88和SOCS1的表达显着高于WT小鼠(P<0.05),ABL处理与否对其表达无明显影响。q RT-PCR得到类似的结果。mi R-155过表达小鼠的缺血脑组织中TLR4的表达显着增高(P<0.05);ABL能显着抑制TLR4的表达。相反,mi R-155过表达降低My D88和SOCS1的表达,ABL处理则上调其表达。我们进一步用BV2细胞对整体水平的实验结果进行验证,发现在OGD处理的BV2细胞中,mi R-155过表达促进TLR4,抑制My D88和SOCS1的表达。敲除mi R-155后,TLR4的表达下调,而My D88和SOCS1的表达增加。ABL孵育后,TLR4、My D88和SOCS1的表达变化与整体实验结果相一致。2 ABL不直接作用于炎症信号转导分子:在过表达mi R-155的小鼠,MCAO后缺血脑组织中p-Akt、p-ERK、p-JNK和p-NF-κB水平明显升高。相反,mi R-155敲除则使这些信号转导分子的磷酸化水平降低。说明mi R-155参与Akt、ERK、JNK和NF-κB的表达和/或激活。我们在BV2细胞水平上进一步证实了整体水平上的实验结果。ABL不明显影响Akt、p38、ERK、JNK和NF-κB的磷酸化。结论:ABL通过上调My D88和SOCS1表达对mi R-155介导的炎症反应发挥抑制作用;ABL通过阻抑mi R-155表达而间接调制炎症信号转导分子水平。ABL不直接激活炎症信号转导分子。(本文来源于《河北医科大学》期刊2015-04-01）

董帅,汤江江,高锦明^[10]（2014）在《1-O-乙酰基大花旋覆花内酯抗肿瘤衍生物的合成》一文中研究指出以天然活性物质为先导化合物进行结构修饰仍是开发研究新药的重要策略。1-O-乙酰基大花旋覆花内酯(1-O-acetylbritannilactone,ABL)是菊科旋覆花属植物的1,10-开环的桉叶烷类(1,10-Seco-eudesmane)倍半萜内酯,在欧亚旋覆花植物中含量较高(占花和颈质量的0.3%-0.5%)且具有众多的药理活性[1-3]。本研究以大花旋覆花内酯为先导化合物,将其6-位羟基通过乙酰化保护后,对其9-位进行溴化,并将9-位溴化产物迭氮化后与炔烃经点击反应合成叁唑类化合物,最后评价了它们的细胞毒活性。结果发现溴化和迭氮化衍生物的细胞毒活性均有显着增强,其中3、4b和4c对HeLa细胞的IC50值分别达到5.7、5.1和5.2μM。(本文来源于《中国化学会第29届学术年会摘要集——第07分会：有机化学》期刊2014-08-04）

旋覆花内酯论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的 探讨ABL在心肌细胞肥大中的作用及其机制。方法 体外培养H9C2心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)构建心肌细胞肥大模型;模型组给予1μmol/L AngⅡ刺激24h、ABL处理组给予AngⅡ刺激,同时给予5μmol/L和10μmol/L ABL处理24h。采用心肌细胞肌动蛋白α-actinin染色评价心肌细胞大小,采用RT-PCR检测肥厚相关基因心房利钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、肌球蛋白重链β(β-MHC)的表达;蛋白印迹(Western blot)法检测信号通路蛋白的表达。结果 与模型组比较,5μmol/L和10μmol/L ABL处理组心肌细胞面积明显降低(P<0.05);ANP、BNP、β-MHC肥厚相关基因表达降低(P<0.05),且其抗心肌细胞肥大呈现剂量依赖性(P<0.05)。Western blot法检测结果显示ABL处理组AMPKa磷酸化水平增高(P<0.05),而Akt、m TOR、GSK3β的磷酸化明显抑制(P<0.05);AMPKa拮抗剂Compound C可阻断ABL的心肌保护作用。结论 ABL可通过激活AMPKa信号通路,调节Akt/Mtor/GSK3β对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大发挥保护性作用。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

旋覆花内酯论文参考文献

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[9].温雅.旋覆花内酯通过调制miR-155介导的炎症反应对缺血性脑组织发挥保护作用[D].河北医科大学.2015

[10].董帅,汤江江,高锦明.1-O-乙酰基大花旋覆花内酯抗肿瘤衍生物的合成[C].中国化学会第29届学术年会摘要集——第07分会：有机化学.2014

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