导读:本文包含了多价转基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:转基因甘蔗,多重PCR,检测
多价转基因论文文献综述
马宗艺,张小兰,王金利,曹干,王继华[1]（2017）在《多重PCR检测多价转基因甘蔗》一文中研究指出甘蔗(Saccharum officinarum)是制造蔗糖、提炼乙醇的主要原料。随着甘蔗转基因育种的开展,建立一套快速精准转基因分子检测技术在甘蔗转基因研究中有重要的应用前景。本研究以二价抗虫转基因甘蔗为材料,利用多重PCR建立同时检测Bar基因、Bt基因和马铃薯蛋白酶抑制剂基因(PinⅡ基因)。研究表明,该多重PCR检测体系的最佳退火温度为53℃,有效扩增Bar基因(415 bp)、Bt基因(780 bp)和PinⅡ(1 000 bp)3个基因片段。多重PCR技术进行外源基因的检测,节省时间、降低成本、提高效率并可以对该转化植物进行特异性鉴定。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年09期）
李昱,宋贵军,林璐璐,辛世萌,曹云鹏[2]（2017）在《Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫阿尔茨海默病转基因鼠的炎症反应研究》一文中研究指出目的探讨基因重组腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG鼻粘膜免疫APPswe/PSEN1d E9双转基因鼠诱导的炎症反应。方法 18只雄性10月龄APPswe/PSEN1dE9鼠,随机分为3组,分别以Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗AdAβ_((3-10)10)-CpG、空腺病毒载体鼻粘膜免疫及Aβ_(1-42)肽肌内注射免疫,用MTT法检测脾细胞增殖反应、ELISA法检测脾细胞培养上清和脑组织匀浆中IL-4和INF-γ水平,免疫组化法检测脑内星形胶质细胞及淋巴细胞浸润。结果 Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组和Aβ_(1-42)组,在相对应的免疫原刺激孔产生较高水平的增殖率,高于非相应免疫原刺激孔(P<0.05),但低于Con A刺激孔(P<0.05)。皮质和海马区GFAP阳性细胞所占面积百分比为:空腺病毒载体组>Aβ_(1-42)组>Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组。各组小鼠脑组织在血管内和脑实质偶尔发现个别CD3、CD5阳性细胞,3组没有显着差异。Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组和Aβ_(1-42)组中在其相对应的免疫原刺激时检测到较高水平的IL-4、IFN-γ。Aβ_(1-42)组在Aβ_(1-42)肽刺激孔的IFN-γ水平显著高于Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组在Aβ_(3-10)肽刺激孔的IFN-γ水平(P<0.05)。AdAβ_((3-10)10)-CpG组脑组织匀浆IL-4水平大于Aβ_(1-42)组,但没有显着性差异(P>0.05),Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组脑组织匀浆中IFN-γ水平显著小于Aβ_(1-42)组(P<0.05)。结论腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG鼻粘膜免疫APPswe/PSEN1dE9双转基因鼠主要产生Th2型免疫应答,可以减少脑内星形胶质细胞活化,未引起脑内炎症反应,即避免了Aβ_(1-42)全肽段所引起的炎症反应。(本文来源于《中风与神经疾病杂志》期刊2017年05期）
李昱,张慧,林璐璐,辛世萌,曹云鹏[3]（2017）在《Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠的治疗效果研究》一文中研究指出目的探讨Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠的治疗效果。方法 18只雄性10月龄AD转基因鼠,随机分为3组,分别以Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G、空腺病毒载体及Aβ1-42免疫,ELISA法检测血清抗Aβ抗体滴度及亚型,Morris水迷宫检测转基因鼠的学习记忆能力,免疫组化法检测转基因鼠脑内Aβ沉积;ELISA法检测转基因鼠脑组织匀浆和血清中可溶性Aβ42水平。结果 Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组和Aβ1-42组抗体水平随着免疫次数逐渐增加,第7次免疫后Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组和Aβ1-42组血清中抗Aβ抗体水平分别为(67.42±13.68)μg/ml和(94.41±14.01)μg/ml,而空载体组一直在基线水平。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组Ig G1/Ig G2a比值明显高于Aβ1-42组(P<0.05)。在Morris水迷宫实验中Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组的逃避潜伏期明显小于空载体组(P<0.01);Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组在靶象限的停留时间明显长于空载体组(P<0.01);Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组穿越平台所在位置的次数明显多于空载体组(P<0.05)。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组脑组织Aβ沉积所占面积百分比与空载体组比较明显减少(P<0.01)。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组脑组织匀浆和血清中可溶性Aβ42水平明显高于空载体组(P<0.01)。结论 Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠,主要引起Th2型免疫应答,可以改善AD转基因鼠学习和记忆能力,促进转基因鼠脑内Aβ清除,可以减少由细胞免疫应答引起的炎症反应。Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗是AD免疫治疗的安全有效的候选疫苗。(本文来源于《中风与神经疾病杂志》期刊2017年01期）
张莎莎[4]（2012）在《苘麻epsps多价载体的构建及转基因棉花初步研究》一文中研究指出抗草甘膦转基因棉花的育成及应用极大的拓宽了草甘膦在生产应用上的机动性和范围，为棉田杂草防治带来了深刻的变革。不同品种和类型抗草甘膦棉花的出现为经济和环境都带来巨大的收益，随着抗草甘膦棉花的推广应用，培育具有自主知识产权商品化的抗草甘膦转基因棉花将对我国农业生产带来深远影响。本文利用实验室已经克隆获得对草甘膦具有一定抗性的苘麻epsps优化基因、棉花生殖器官特异表达启动子arf1、棉花花药特异表达启动子GhPG2、棉花绿色组织特异表达启动子PsbP、棉花草甘膦特异诱导表达启动子ag2等，结合组成型CaMV35S启动子分别驱动苘麻epsps优化基因，进行排列组合构建植物表达载体，转化棉花，取得了如下主要实验结果：1.构建了4个叁价植物表达载体，分别是（1）由CaMV35S启动子驱动苘麻epsps优化基因的叁价植物表达载体pGBI-P35S:E-P35S:E-P35S:E；（2）分别由CaMV35S、arf1和ag2启动子驱动苘麻epsps优化基因的叁价植物表达载体pGBI-P35S:E-Parf1:E-Pag2:E；（3）分别由CaMV35S、PsbP和ag2启动子驱动苘麻epsps优化基因的叁价植物表达载体pGBI-P35S:E-PPsbP:E-Pag2:E；（4）分别由GhPG2、PsbP和ag2启动子驱动苘麻epsps优化基因的叁价植物表达载体pGBI-PPsbP:E-PPG2:E-Pag2:E。在叁价载体构建过程中还完成5个单价和4个双价植物表达载体的构建，以及单价载体上酶切位点的改造工作。2.农杆菌喷花法转化棉花，对T0代植株的叁次草甘膦抗性或Kanamycin抗性筛选，并结合PCR鉴定及测序获得分别转pGBI-P35S:E-P35S:E-P35S:E载体棉花15株，转pGBI-P35S:E-Parf1:E-Pag2:E载体棉花8株，转pGBI-P35S:E-PPsbP:E-Pag2:E载体棉花7株，和转pGBI-PPsbP:E-PPG2:E-Pag2:E载体棉花7株。部分单株的RT-PCR及测序结果表明外源基因已经在棉花中获得转录。Real-time PCR分析了T0代各载体转化单株中外源基因在棉花4个组织中的相对表达量，结果表明各组织中外源基因的时空表达与载体中各启动子的功能有关，为将此种表达模式运用到其它功能基因在其它物种中的表达提供了理论依据和试验基础。3.草甘膦抗性筛选结合PCR鉴定获得T1代转基因棉花，部分单株的RT-PCR及其测序结果表明目的基因已经获得转录。4.构建带有苘麻epsps优化基因的原核表达载体，转入大肠杆菌中并获得表达，为制备苘麻EPSPS抗体检测转抗除草剂基因棉花打下了基础。综上所述，本文首次构建了多个由来自棉花自身的不同启动子驱动苘麻epsps优化基因的单价、双价和叁价植物表达载体，通过田间草甘膦筛选获得转不同叁价载体的T0代和T1代转基因棉花植株，并对其进行了初步的分子生物学分析，为通过转多启动子增加抗除草剂基因拷贝数的手段来提高棉花对草甘膦的抗性提供了理论依据。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2012-06-01）
赫福霞[5]（2008）在《抗虫/耐草甘膦多价转基因玉米的研究》一文中研究指出玉米是大宗粮食作物,又是重要的饲料和工业原料,由于虫害和草害的威胁,导致其产量和质量严重下降。基因工程的诞生为玉米虫害和草害的防治提供了有效手段。G2-epsps基因是从草甘膦长期污染的极端环境中分离的荧光假单胞菌(psedomonas fluorescens G2)中克隆的新基因,具有自主知识产权。为提高耐草甘膦基因G2-epsps在转基因玉米中的表达水平,首先对基因进行了植物密码子优化,改造后的基因命名为2mG2-epsps基因,优化后基因的G+C含量由原来的58%调整到了53%,与G2-epsps基因核苷酸序列相似性为89%。为使该草甘膦抗性基因编码产物正确定位于叶绿体,克隆了拟南芥的EPSPS酶的叶绿体转运肽序列,大小为244bp,测序结果表明该序列与已知序列的相似性为100%。Bt cry1Ah基因是从我国自行分离的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BT8中克隆的新型杀虫蛋白基因,cry1Ah基因的编码产物对鳞翅目害虫的杀虫活性强于目前使用的cry1Ac或者cry1Ab基因。cry1Ie基因是本研究组克隆的另一个具有自主知识产权的Bt杀虫基因,其编码蛋白对敏感玉米螟和抗性玉米螟均有一定毒力。cry1Ie与cry1Ab和cry1Ac无交互抗性,将cry1Ah和cry1Ie构建到同一表达载体中,能够更为有效地克服现有Bt基因同源性高、种类单一、昆虫对Bt蛋白产生抗性等问题,同时可望获得抗虫性更好的转基因植物。本研究利用抗虫基因cry1Ah和耐草甘膦基因2mG2-epsps构建了双价植物表达载体,通过基因枪轰击转化玉米,以2mG2-epsps为筛选标记基因,以草甘膦异丙胺盐作为筛选剂,获得到了抗性较好的T0代转化植株80株。通过对T0、T1、T2代转基因植株的分子检测、抗虫生物活性检测、田间草甘膦抗性检测表明,共获得了5个能够稳定遗传具有抗虫性和草甘膦耐受性的转基因玉米品系。同时构建了含有Bt cry1Ah和cry1Ie基因和耐草甘膦2mG2-epsps基因的叁价植物表达载体,通过基因枪轰击法转化玉米愈伤组织,以2mG2-epsps为筛选标记基因,以草甘膦异丙胺盐作为筛选剂,获得T0代转化植株69株,PCR检测结果表明:有17株已完整的整合有抗虫基因cry1Ah、cry1Ie和耐草甘膦基因2mG2-epsps的3个目的基因,RT-PCR分析外源基因可以正确转录,已获得结实转基因植株。叁价转基因玉米的获得为我国多基因双抗性转基因玉米的研究打下了基础,为下一步的玉米育种提供了材料。实验中以2mG2-epsps基因作为筛选标记基因,为确定其筛选时间及筛选压力,进行了玉米愈伤组织对不同浓度草甘膦的抗性实验,确定向培养基中添加浓度为1mM的草甘膦异丙胺盐筛选15天能有效的抑制非转基因玉米愈伤组织的分化,本研究的再生植株的阳性率为45%,为玉米及其它单子叶作物转化提供了一种有效、安全的筛选体系。(本文来源于《东北农业大学》期刊2008-04-10）
赵志鹏[6]（2007）在《多价抗病虫抗除草剂转基因水稻选育的研究》一文中研究指出水稻是受病虫草害侵袭最为严重的粮食作物之一,理想的水稻品种不仅要求高产优质而且还要多抗,因此,培育出可供生产上利用的多抗转基因水稻新品种,可为水稻的高产与稳产提供重要保证,同时也可减少化学农药的使用量,改善生态环境。本研究是将转基因技术和常规育种技术相结合,把抗病基因Ap1、抗虫基因Bt和GNA及抗除草剂基因Bar聚合到具有优良农艺性状的同一粳稻品种—广陵香粳中,选育出多价转基因水稻新品系,并对多价转基因水稻的抗病、抗虫、抗除草剂以及田间表现等作了较详细的评价。所得主要实验结果如下:1、多价转基因水稻的选育。以源于广陵香粳的分别含有GNA基因与Bar基因、Bt基因与Ap1基因的双价转基因水稻3015-1-1和D10(或D19)为亲本,通过有性杂交,并结合基因特异的分子标记辅助选择获得了2个双价(GNA+Bar、Ap1+Bt)、2个叁价(Ap1+GNA+Bar或Bt+GNA+Bar)和1个四价(Ap1+Bt+GNA+Bar)转基因水稻新品系。经PCR和Southern杂交分析,其中的多价基因都呈纯合状态,并能稳定遗传。2、多价转基因水稻表现抗病、虫/或抗除草剂的抗性。抗性检测结果表明,所选育的多价转基因水稻表现出预期的多抗特性。含有Ap1基因的多价转基因水稻对白叶枯病菌KS-1-20和纹枯病菌RH-9的抗性明显提高,均达到抗病级别,而未转化对照分别表现为中抗和中感级别。含有Bt基因的多价转基因水稻植株对稻纵卷叶螟幼虫的致死率达100%,对二化螟、叁化螟和稻纵卷叶螟均表现出良好的抗性,而未转化对照植株对上述螟虫都不抗。与未转化对照相比,含有GNA基因的多价转基因水稻对褐飞虱进食量具有显着的抑制作用。此外,含有Bar基因的多价转基因水稻对除草剂也表现出良好抗性。3、多价多抗转基因水稻具有优良的农艺性状和品质性状。对所获得的多价转基因水稻的主要农艺性状和稻米品质性状进行调查,结果显示经过多代定向选择的多价多抗转基因水稻新品系的大多数农艺与品质性状仍与原亲本广陵香粳相似,也有一些农艺性状稍有改变,如株高稍高、单株有效穗数与千粒重增加等。综合抗性与农艺性状分析,本实验选育的多价多抗转基因水稻新品系将具有很好的应用潜力。(本文来源于《扬州大学》期刊2007-06-01）
赵志鹏,于恒秀,王玲,刘巧泉,顾铭洪[7]（2006）在《抗病虫抗除草剂多价转基因水稻的培育及其田间试验》一文中研究指出水稻是受病虫草害侵袭最为严重的粮食作物,据不完全统计,我国每年因虫害造成的损失占水稻总产量的5%以上。通过化学农药控制水稻病虫害,不仅生产成本高,且造成生态环境的恶化,同时对人畜也产生严重危害。因此,发展新型高效、低毒的农药和培育具有抗病虫能力的水稻新品种是控制水稻病虫害的重要途径。(本文来源于《江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编》期刊2006-09-01）
武国军[8]（2006）在《转基因和基因敲入小鼠前列腺癌模型的实验研究和多价抗前列腺癌单链抗体的制备》一文中研究指出目的：前列腺癌是男性特有的肿瘤。小鼠中没有自然发生的前列腺癌，利用基因工程技术建立小鼠前列腺癌模型对临床前期前列腺癌的研究具有至关重要的意义。最近，利用前列腺分泌性蛋白94氨基酸(PSP94)启动子建立了转基因前列腺癌小鼠模型(TGMAP)和基因敲入前列腺癌小鼠模型(KIMAP)，后者尤其显示了与人类相近的肿瘤特征。本课题利用与临床Gleason分级系统相近的小鼠组织学分级系统、流式细胞仪和基因芯片技术，分析比较了KIMAP模型与人类前列腺癌和TGMAP模型。本课题首次应用叁维超声微成像监测TGMAP模型小鼠的前列腺肿瘤生长，建立小鼠前列腺癌的血清学肿瘤标志物PSP94检测系统。为了提高以往构建的抗人γ-精浆蛋白(γ-Sm)单链抗体(scFv)的亲和活性，我们应用人p53四聚功能域基因构建了四价scFv，并进行真核表达和活性测定。 方法：①依照前列腺癌临床诊断的Gleason五级10分制的组织学分级和评分标准，建立了基因工程小鼠模型的分析标准。对96例KIMAP和44例TGMAP前列腺癌标本进行了分析，并与临床前列腺癌进行了比(本文来源于《第四军医大学》期刊2006-04-01）
索勋,郝力力[9]（2005）在《转基因球虫-防治动物和禽类疾病的新型多价疫苗载体》一文中研究指出养殖业的大规模发展依赖于动物不受球虫、病毒和细菌等病原的感染。我们正在研究一种新型的转基因球虫载体系统以作为多价疫苗的载体,从而有效的预防养殖业中危害较大的一些疾病。此种载体系统的优点是:可以口服接种,操作方便,而且可同时激发机体的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫,从而使动物机体产生对病源的足够的免疫力。此种疫苗载体系统的建立充分依赖和利用了球虫独有的生物学特性,即:接种后球虫在宿主体内可以大量繁殖,从而表达其携带的相关病源的主要免疫原蛋白,使机(本文来源于《2005年寄生虫学国际学术研讨会暨中国动物学会寄生虫专业委员会第十次学术研讨会论文摘要汇编》期刊2005-10-01）
张春涛[10]（2004）在《新型多价人CTL肽构建物可诱导HLA-A~*0201转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答》一文中研究指出1型人类嗜 T淋巴细胞病毒 ( HTLV- 1 )是成人 T淋巴细胞白血病 ( ATL )和 HTLV-1相关的脊髓病 /热带痉挛性截瘫 ( HAM/TSP)的致病因素 ,特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要 ,而多肽类细胞毒性 T细胞 ( CT(本文来源于《国外医学(预防、诊断、治疗用生物制品分册)》期刊2004年05期）
多价转基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨基因重组腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG鼻粘膜免疫APPswe/PSEN1d E9双转基因鼠诱导的炎症反应。方法 18只雄性10月龄APPswe/PSEN1dE9鼠,随机分为3组,分别以Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗AdAβ_((3-10)10)-CpG、空腺病毒载体鼻粘膜免疫及Aβ_(1-42)肽肌内注射免疫,用MTT法检测脾细胞增殖反应、ELISA法检测脾细胞培养上清和脑组织匀浆中IL-4和INF-γ水平,免疫组化法检测脑内星形胶质细胞及淋巴细胞浸润。结果 Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组和Aβ_(1-42)组,在相对应的免疫原刺激孔产生较高水平的增殖率,高于非相应免疫原刺激孔(P<0.05),但低于Con A刺激孔(P<0.05)。皮质和海马区GFAP阳性细胞所占面积百分比为:空腺病毒载体组>Aβ_(1-42)组>Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组。各组小鼠脑组织在血管内和脑实质偶尔发现个别CD3、CD5阳性细胞,3组没有显着差异。Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组和Aβ_(1-42)组中在其相对应的免疫原刺激时检测到较高水平的IL-4、IFN-γ。Aβ_(1-42)组在Aβ_(1-42)肽刺激孔的IFN-γ水平显著高于Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组在Aβ_(3-10)肽刺激孔的IFN-γ水平(P<0.05)。AdAβ_((3-10)10)-CpG组脑组织匀浆IL-4水平大于Aβ_(1-42)组,但没有显着性差异(P>0.05),Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG组脑组织匀浆中IFN-γ水平显著小于Aβ_(1-42)组(P<0.05)。结论腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-CpG鼻粘膜免疫APPswe/PSEN1dE9双转基因鼠主要产生Th2型免疫应答,可以减少脑内星形胶质细胞活化,未引起脑内炎症反应,即避免了Aβ_(1-42)全肽段所引起的炎症反应。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多价转基因论文参考文献
[1].马宗艺,张小兰,王金利,曹干,王继华.多重PCR检测多价转基因甘蔗[J].分子植物育种.2017
[2].李昱,宋贵军,林璐璐,辛世萌,曹云鹏.Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫阿尔茨海默病转基因鼠的炎症反应研究[J].中风与神经疾病杂志.2017
[3].李昱,张慧,林璐璐,辛世萌,曹云鹏.Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠的治疗效果研究[J].中风与神经疾病杂志.2017
[4].张莎莎.苘麻epsps多价载体的构建及转基因棉花初步研究[D].中国农业科学院.2012
[5].赫福霞.抗虫/耐草甘膦多价转基因玉米的研究[D].东北农业大学.2008
[6].赵志鹏.多价抗病虫抗除草剂转基因水稻选育的研究[D].扬州大学.2007
[7].赵志鹏,于恒秀,王玲,刘巧泉,顾铭洪.抗病虫抗除草剂多价转基因水稻的培育及其田间试验[C].江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编.2006
[8].武国军.转基因和基因敲入小鼠前列腺癌模型的实验研究和多价抗前列腺癌单链抗体的制备[D].第四军医大学.2006
[9].索勋,郝力力.转基因球虫-防治动物和禽类疾病的新型多价疫苗载体[C].2005年寄生虫学国际学术研讨会暨中国动物学会寄生虫专业委员会第十次学术研讨会论文摘要汇编.2005
[10].张春涛.新型多价人CTL肽构建物可诱导HLA-A~*0201转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答[J].国外医学(预防、诊断、治疗用生物制品分册).2004