导读:本文包含了移植物抗肿瘤作用论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:红树植物,抗肿瘤,机制
移植物抗肿瘤作用论文文献综述
韦林垚,侯小涛,郝二伟,谢滟,杜正彩[1]（2018）在《药用红树植物抗肿瘤药理作用及其机制的研究进展》一文中研究指出红树植物在全世界118个国家皆有分布,在中国主要分布于东南部沿海地区,且大多具有药用价值。据调研,中国的红树植物共有20科37种,其中具有药用价值的有23种。研究表明,23种药用红树植物均具有不同程度的抗肿瘤作用,具有很大的开发前景。本文主要对近20年来国内外97篇涉及中国现有23种药用红树植物抗肿瘤药理作用及其机制的文献进行综述,为利用药用红树植物开发抗癌药物提供有益的参考。(本文来源于《中国海洋药物》期刊2018年03期）
杨秀秀[2]（2017）在《草胡椒属植物抗肿瘤作用及其作用机理研究》一文中研究指出天然产物是抗肿瘤药物研发的重要源泉,目前40%以上的临床用药来源于天然产物及其衍生物,其中包括紫杉醇、长春碱、鬼臼毒素和喜树碱等。草胡椒属植物在云南、贵州等地民间被用作传统抗肿瘤药物,但对其抗肿瘤的相关分子机制介绍并不多见。本论文以叁种草胡椒属植物为研究对象进行抗肿瘤活性的初步分析,并对抗肿瘤活性较强的豆瓣绿进行了机制研究,初步阐明了豆瓣绿及其化学成分抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的分子机制。同时对豆瓣绿乙醇提取物的不同萃取部位及单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选确定。(1)运用MTT法评价了石蝉草、豆瓣绿、草胡椒的乙醇提取物对人单核细胞白血病U937细胞增殖的影响。结果表明这叁种植物均可以显着抑制U937细胞增殖,且豆瓣绿抑制细胞增殖的活性最强。然后我们考察了豆瓣绿乙醇提取物、乙酸乙酯萃取部位和萃余水层抑制U937细胞增殖的活性,结果发现其乙酸乙酯萃取部位具有最强的活性,推测其可能是豆瓣绿抗肿瘤的有效部位。(2)探讨了豆瓣绿提取物对人单核细胞白血病U937细胞凋亡的分子机制。采用Hoechst 33342荧光染色观察发现豆瓣绿乙醇提取物和乙酸乙酯萃取部位均可诱导U937细胞凋亡。采用Annexin V-FITC和PI染色,发现其乙酸乙酯萃取部位呈量效和时效关系诱导细胞凋亡。通过PI染色,发现豆瓣绿的乙醇提取物和乙酸乙酯萃取部位还可使U937细胞细胞周期发生阻滞,表现为G2/M期细胞比例明显减少、S期增多、G1期减少。采用Westren Blot技术,发现豆瓣绿乙酸乙酯萃取部位引起U937细胞细胞周期相关蛋白:细胞周期蛋白D1(CCND1)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)和周期蛋白依赖性蛋白激酶1(CDK1)表达显着减少。进一步的研究表明,豆瓣绿的乙酸乙酯萃取部位可激活半胱天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8),促凋亡蛋白Bid裂解,下游的效应Caspase半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)被激活;另一方面,乙酸乙酯萃取部位还可引起活性氧(ROS)升高,线粒体膜电位(MMP)下降,Bax表达升高,半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)活化和Caspase-3激活。由此得出豆瓣绿乙酸乙酯萃取部位可通过Caspase依赖的外源途径和线粒体调节的内源途径诱导细胞凋亡。(3)筛选了豆瓣绿乙酸乙酯部位抗肿瘤的活性成分。为探究豆瓣绿乙醇提取物抑制U937细胞增殖的主要活性部位,对豆瓣绿乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂萃取部位和萃余水层的抗肿瘤活性进行了检测。结果表明,豆瓣绿的石油醚部位和乙酸乙酯部位具有较强的抑制U937细胞增殖的活性。选用豆瓣绿乙酸乙酯部位,通过硅胶柱色谱法,用氯仿和甲醇进行梯度洗脱,得到7个不同组分1-7。检测各组分细胞毒活性发现:组分1、2和7均具有抑制U937细胞增殖的活性,且组分1的活性最强。我们从豆瓣绿乙酸乙酯部位中分离纯化得到3个单体化合物。随后我们考察了叁个化合物对人单核细胞白血病细胞U937,黑色素瘤细胞A375,人皮肤鳞状表皮癌细胞A431和膀胱癌细胞T24细胞增殖的影响。结果表明:化合物1(Peperobtusin A)的细胞毒活性最好,对多种肿瘤细胞均具有显着抑制增殖的活性。化合物2和3对几种肿瘤细胞敏感性较差。以上结果说明组分1是豆瓣绿乙酸乙酯部位抗U937细胞增殖的主要活性成分,而Peperobtusin A可能是其发挥细胞毒作用的主要活性成分之一。(4)研究了Peperobtusin A对人单核细胞白血病U937细胞凋亡的分子机制。运用Annexin V-FITC染色,对Peperobtusin A引起A431和U937细胞凋亡进行检测,发现相同作用浓度下Peperobtusin A引起U937细胞凋亡更明显。研究还发现Peperobtusin A使U937细胞细胞周期发生S期阻滞。进一步研究表明,Peperobtusin A能够引起U937细胞活性氧升高,线粒体膜电位降低,Caspase-8、Bid、Caspase-9和Caspase-3蛋白裂解增加,Bax表达升高。同时,发现用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理后可显着降低Peperobtusin A引起的U937细胞凋亡率,结合抑制剂处理后Western Blot结果,推断Peperobtusin A通过Caspase依赖性凋亡途径诱导细胞凋亡。有研究表明有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路与细胞凋亡密切相关。对P38MAPK信号途径中的P38和P-P38进行研究,分析药物单独处理和Z-VAD-FMK、B203580分别预处理后结果,表明P38MAPK-Caspase-9参与Peperobtusin A诱导的细胞凋亡。(本文来源于《大连大学》期刊2017-05-27）
苟卓越,邱晓红,马满玲[3]（2013）在《葱属植物抗肿瘤作用的研究进展》一文中研究指出目的:了解近年来国内、外学者对葱属植物抗肿瘤作用的研究进展。方法:查阅国内、外葱属植物相关文献资料,并进行汇总、综述。结果与结论:葱属植物对多种肿瘤细胞均有不同程度的细胞毒作用。葱属植物作为低毒植物药,具有很大的开发潜力和应用价值,应进一步对其进行系统研究,为开发新型、高效、安全的药物提供科学依据。(本文来源于《中国药房》期刊2013年47期）
滕蓉,林喜建,张雅萍[4]（2013）在《鬼针草属植物抗肿瘤作用的研究概况》一文中研究指出目的掌握鬼针草属植物抗肿瘤作用研究概况。方法查阅国内外近年来相关的文献资料并进行分析和综述。结果鬼针草属植物通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡、调节免疫、抗氧化、清除自由基等发挥抗肿瘤的作用。结论鬼针草属植物具有一定的抗肿瘤活性,应加强抗肿瘤活性成分及作用机制的研究。(本文来源于《海峡药学》期刊2013年11期）
王传明[5]（2013）在《猕猴桃属植物抗肿瘤作用研究进展综述》一文中研究指出在广泛文献检索基础上,对猕猴桃属植物的抗肿瘤作用的研究进展进行综述,发现猕猴桃属植物的根具有较好的抗肿瘤作用,有很好的发展和开发前景。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2013年17期）
陈姗[6]（2011）在《靶向EGFR及VEGFR2的siRNA治疗增强顺铂对非小细胞肺癌移植物的抗肿瘤作用》一文中研究指出一、研究背景1998年,Fire及其同事在线虫类秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)中发现RNA干扰(RNAi)现象,其后3年,Tuschl及其同事化学合成了短双链RNA/小干扰RNA(siRNA),证明了哺乳动物细胞中同样存在RNA干扰现象。由于RNAi现象可以调节基因表达,不仅能作为生物学研究的有力工具,同样可以作为一种极具潜力的疾病治疗方案。癌症,病毒感染,自体免疫疾病,神经性病变已成为RNA干扰治疗的热门疾病靶点。已有RNA干扰药物进入临床试验并显示出极大的治疗效率,首例癌症靶向治疗药物——以环糊精为载体、转铁蛋白为靶向基团的系统给药siRNA制剂(CALAA-01；Calando Pharmaceuticals, Pasadena,CA,USA,phaseⅠ)也已宣告进入一期临床试验。在肿瘤形成早期由于肿瘤组织低氧环境、癌基因激活以及代谢性应激的诱导,使得成熟血管休眠期被打破,促血管新生因子表达上调,发生血管新生。血管新生不仅在生长、繁殖、修复等过程中起着重要的作用,同时也对肿瘤形成、转移及其它许多非肿瘤疾病起决定性作用。如果没有血管的营养供给,肿瘤只能生长1-2mm,因而抑制血管新生为抑制肿瘤的关键,抑制血管新生相关信号通路为抗肿瘤热门靶点。VEGF/VEGFR2通路在肿瘤血管新生中起关键作用,研究发现多种类型的癌症均有血管内皮生长因子(VEGF)的过表达,而血管内皮生长因子受体-2是促VEGF的促血管新生活动的主要受体,两者均是抗肿瘤血管新生疗法的主要靶点。表皮生长因子受体(EGFR)及其配体表皮生长因子(EGF),在癌症进展过程中的肿瘤细胞增殖,凋亡,血管新生,转移等过程起关键作用。EGFR通过激活抗凋亡Akt信号通路对肿瘤细胞提供生存信号,且许多上皮及胶质区域的肿瘤皆有EGFR的过表达。VEGFR2及EGFR是目前研究的最多的抗癌药物靶点,也是非小细胞肺癌(NSCLC)确定的治疗靶点。本研究拟筛选体外高效沉默VEGFR2表达的siRNA,通过阳离子聚合物聚乙烯酰胺(PEI)的包裹作用,给予人非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤移植物裸鼠模型,观察由siRNA介导的VEGFR2表达抑制对肿瘤生长抑制作用及对荷瘤小鼠生存期的改善。同时,我们还探究了EGFR siRNA, EGFRsiRNA联合VEGFR2 siRNA的siRNA联合疗法,单一化疗,以及化疗联合两种siRNA的疗法,共8个实验组介导的肿瘤生长抑制作用及对荷瘤小鼠生存期的改善。此外,我们还对荷瘤小鼠的肿瘤组织提取了RNA及蛋白,分别应用实时定量PCR和免疫蛋白印迹方法来检测VEGFR2及EGFR的mRNA及蛋白表达水平,进一步探讨肿瘤进展分子机制。二、研究目的1.以小鼠VEGFR2 mRNA序列为靶设计并合成高效沉默VEGFR2表达的siRNA序列,并在体外细胞实验中验证其沉默效率。2.以聚乙烯酰胺(PEI)作为siRNA体内给药载体,比较VEGFR2 siRNA和／或EGFR siRNA介导的抗血管新生疗法,顺铂所代表的化疗,以及VEGFR2 siRNA和EGFR siRNA加上顺铂的联合抗肿瘤疗法之间在人非小细胞肺癌移植瘤裸鼠模型上的肿瘤生长抑制效果及对荷瘤小鼠生存时间的影响。3.通过进一步在mRNA和蛋白水平上对肿瘤组织VEGFR2及EGFR表达量进行检测,探寻各疗法抗肿瘤分子机制。叁、实验方法1.根据NCBI公布的小鼠VEGFR2 mRNA序列(NM_010612),设计出3对siRNA序列(siRNA1, siRNA2, siRNA3),加上我们之前研究中所引用过的siRNA序列(siRNA4),一共四个VEGFR2 siRNA分子序列。利用Lipofectamine2000进行体外细胞转染,将各个VEGFR2 siRNA及作为对照的乱序siRNA分子转染进MSl细胞,同时设置未处理组及阴性对照组(仅加入Lipofectamine2000)。转染结束后48小时提取细胞总RNA进行半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR)和实时定量PCR(Quantitative real time PCR)以检测VEGFR2 mRNA表达情况。VEGFR2蛋白表达情况则在转染结束后72小时提取细胞总蛋白用免疫蛋白印迹(western blot)方法进行分析。对所有组的目的蛋白及mRNA表达量以内参表达量进行上样量标准化后,以control siRNA作为对照进行归一,采用one-way ANOVA统计方法,根据方差是否齐性选择LSD或者Dunnett T3检验,比较各组mRNA和蛋白表达水平差异显着性。2.对裸鼠皮下接种5×106个A549人非小细胞肺癌细胞以建立肿瘤模型,每隔叁天测量小鼠体重及肿瘤体积。肿瘤体积以游标卡尺测量,计算公式为1/2×a×b2,其中a代表长直径,b代表短直径。待肿瘤长至30-100 mm3,将荷瘤小鼠随机分为8组,每组含4-5只。利用阳离子聚合物PEI包裹各个siRNA分子(N/P比为8)形成siRNA/PEI复合物以备瘤内注射用。每组小鼠分别给予(1) saline(生理缓冲液)(瘤内注射,一周两次),(2)PEI(瘤内注射,一周两次),(3) 0.5nmol VEGFR2 siRNA瘤内注射,一周两次),(4) 0.5nmol EGFR siRNA(瘤内注射,一周两次),(5) 0.5nmol Control siRNA(瘤内注射,一周两次),(6) 0.25nmol VEGFR2 siRNA+0.25nmol EGFR siRNA(瘤内注射,一周两次),(7) 5mg/kg顺铂(腹腔注射,一周一次),(8) 0.25nmol VEGFR2 siRNA +0.25nmol EGFR siRNA+3mg/kg顺铂(siRNA治疗：瘤内注射,一周两次.顺铂：在每周第一次siRNA给药后的第二天给予腹腔注射,一周一次).实验进行到第40天时,或当老鼠垂死前,对其拍照后进行水合氯醛麻醉,剥离肿瘤组织,对肿瘤组织拍照后立即投入液氮以备RNA及蛋白提取分析。应用析因方差分析比较给药各组肿瘤体积和荷瘤鼠体重是否有统计学差异。对小鼠生存时间进行Kplan-Meier生存分析,并绘制生存曲线得出各组中位生存时间,利用Log-Rank(Mantel-Cox), Breslow(Generalized Wilcoxon),Tarone-Ware检验各组生存时间差异显着性。3.将各实验组冷冻肿瘤组织提取总RNA进行实时定量PCR (Quantitative real time PCR)以检测VEGFR2及EGFR mRNA表达情况,并提取总蛋白用免疫蛋白印迹(western blot)方法进行分析VEGFR2及EGFR蛋白表达量。对所有组的目的蛋白及mRNA表达量以内参表达量进行上样量标准化后,以control siRNA作为对照进行归一,采用one-way ANOVA统计方法,根据方差是否齐性选择LSD或者Dunnett T3检验,比较各组mRNA和蛋白表达水平差异显着性。结果：1.体外MSl细胞转染验证VEGFR2 mRNA及蛋白表达水平筛选高效沉默siRNA序列。1.1提取转染后48小时MSl细胞总RNA,半定量RT-PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳后UV光下拍照,Image J软件扫描分析各组VEGFR2及β-actin条带光密度值,VEGFR2/β-actin条带光密度比值作为VEGFR2 mRNA的相对表达量。采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组VEGFR2 mRNA表达水平,显示具有显着性差异(F=20.995,P=0.000),根据方差齐性(P>0.05)采用LSD法进行各组间两两比较。统计结果表明,与control siRNA组的VEGFR2 mRNA表达水平相比,各VEGFR2 siRNA序列所转染的MSl细胞VEGFR2 mRNA表达水平均显着下调,沉默效率分别为：siRNA1,58.6%(P=0.000); siRNA2,69.7% (P=0.000); siRNA3,57.2%(P=0.000); siRNA4,40.5%(P=0.000)。siRNA1 (P<0.05)、siRNA2 (P<0.01)、siRNA3 (P<0.05)沉默效率显着高于siRNA4, siRNA2与siRNA1、siRNA3之间无显着性差异,siRNAl和siRNA3之间无显着性差异。1.2各组实时定量PCR (Quantitative real time PCR)结果根据公式计算出VEGFR2 mRNA表达量,△△Ct=各组△Ct/control siRNA△Ct=(VEGFR2Ct值-GAPDH Ct值)/control siRNA△Ct,各组VEGFR2 mRNA表达量＝2△-△△Ct。采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组VEGFR2 mRNA表达水平,显示具有显着性差异(F=1325.255,P=0.000),根据方差不齐(P<0.05)采用Dunnett T3法进行各组间两两比较。统计结果表明,与control siRNA组的VEGFR2 mRNA表达水平相比,各VEGFR2 siRNA序列所转染的MSl细胞VEGFR2 mRNA表达水平均显着下调,沉默效率分别为：siRNA1,96.0% (P=0.000); siRNA2,98.7%(P=0.000); siRNA3,86.0%(P=0.000); siRNA4, 97.6%(P=0.000)。siRNA1 (P＜0.05)、siRNA2 (P＜0.01)、siRNA4 (P<0.05)沉默效率显着高于siRNA3, siRNA2的沉默效率与siRNA1、siRNA4之间无显着性差异。1.3体外MSl细胞转染结束72小时后,提取细胞总蛋白用免疫蛋白印迹(western blot)方法分析各组VEGFR2蛋白表达水平。用Image J软件扫描得到各组VEGFR2及β-actin条带的光密度值,每组VEGFR2蛋白条带光密度值除以β-actin条带的光密度值即为各组VEGFR2蛋白相对表达量,以control siRNA作为对照进行归一。采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组VEGFR2蛋白表达水平,显示具有显着性差异(F=109.438,P=0.000),根据方差不齐(P<0.05)采用Dunnett T3法进行各组间两两比较。与control siRNA组的VEGFR2蛋白表达水平相比,siRNA4无显着性差异,而siRNA1 (P＜0.05)、siRNA2 (P＜0.01)、siRNA3 (P<0.05) VEGFR2蛋白表达水平显着减少。SiRNA2的沉默效率显着高于siRNA1 (P＜0.05)、siRNA3 (P<0.05)和siRNA4 (P<0.05)。2.A549人非小细胞肺癌肿瘤移植物裸鼠模型体内肿瘤生长抑制实验,观察小鼠体重、肿瘤体积、生存时间。2.1每叁天检测小鼠体重及肿瘤体积,采用析因方差分析方法比较各组肿瘤体积和荷瘤鼠体重变化,各组间体重有显着性差异(F=5.923,P=0.000)。control siRNA组的体重明显小于PEI组(P＜0.01)、saline组(P<0.01)、EGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P<0.01)。EGFR2 siRNA+EGFR siRNA组的体重明显小于saline组(P<0.05)。各组间肿瘤体积有显着性差异(F=57.301,P=0.000), VGFR2 siRNA组(P＜0.01)、5mg/kg顺铂组(P<0.01)、EGFR siRNA组(P<0.01)、EGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P<0.01)显着减小肿瘤体积。2.2对荷瘤小鼠生存时间采用Kplan-Meier生存分析,并绘制生存曲线得出各组中位生存时间,利用Log-Rank(Mantel-Cox) (Chi-Square=0.135,P=0.713), Breslow(Generalized Wilcoxon) (Chi-Square=0.400,P=0.527),Tarone-Ware (Chi-Square=0.034,P=0.853)检验各组生存时间无显着性差异。3.小鼠肿瘤内VEGFR2, EGFR两种基因蛋白表达水平的检测。3.1肿瘤组织提取总蛋白,进行Western blot检测。Image J软件扫描得到各组VEGFR2、EGFR及β-actin条带的光密度值,每组VEGFR2或EGFR蛋白条带光密度值除以β-actin条带的光密度值即为各组VEGFR2或EGFR蛋白相对表达量,以control siRNA作为对照进行归一。采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组EGFR蛋白表达水平(F=126.255,P=0.000),显示具有显着性差异,根据方差不齐(P<0.05)采用Dunnett T3法进行各组间两两比较。跟PEI组相比,VEGFR2 siRNA组(P<0.05), EGFR siRNA组(P＜0.05),5mg/kg顺铂组(P<0.05), VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组(P＜0.05), VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P<0.05)的EGFR蛋白表达水平均显着减少。EGFR siRNA组的EGFR蛋白表达量显着高于5mg/kg顺铂组(P＜0.01), VEGFR2 siRNA+ EGFR siRNA组(P＜.01), VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P<0.01)。VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组EGFR蛋白水平显着高于VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P<0.05)。VEGFR2 siRNA的EGFR表达量与EGFR siRNA组、5mg/kg顺铂组,VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组,VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组间无显着性差异。5mg/kg顺铂组与VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组,VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组间无显着性差异。3.2采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组VEGFR2蛋白表达水平(F=44.950,P=0.000),显示具有显着性差异,根据方差齐性(P>0.05)采用LSD法进行各组间两两比较。与PEI组相比各组VEGFR2蛋白表达水平均显着减少(P=0.000)。5mg/kg顺铂组的VEGFR2蛋白水平显着低于VEGFR2 siRNA组(P＜0.01)、EGFR siRNA组(P<0.05)及VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P＜0.01)。VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA的VEGFR2蛋白水平显着低于VEGFR2 siRNA组(P＜0.05)、EGFR siRNA组(P<0.05)及VEGFR2 siRNA+ EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P＜0.01)。VEGFR2 siRNA组和EGFR siRNA组之间,5mg/kg顺铂组和VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组之间,VEGFR2 siRNA+ EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组与VEGFR2 siRNA或EGFR siRNA组之间均无显着性差异。4.小鼠肿瘤内VEGFR2, EGFR两种基因mRNA表达水平的检测。4.1肿瘤组织提取总RNA进行实时定量PCR (Quantitative real time PCR)以检测VEGFR2 mRNA表达情况。采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组VEGFR2 mRNA表达水平(F=208.483,P=0.000),显示具有显着性差异,根据方差齐性(P>0.05)采用LSD法进行各组间两两比较。与PEI组相比各组VEGFR2 mRNA表达水平均显着上调,VEGFR2 siRNA组(P<0.05), EGFR siRNA组(P=0.000),5mg/kg顺铂组(P<0.05), VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组(P=0.000), VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P=0.000)。EGFR siRNA组的VEGFR2 mRNA显着高于VEGFR2 siRNA组、5mg/kg顺铂组、VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组、VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组(P=0.000)。VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组显着高于VEGFR2 siRNA组(P<0.05)和5mg/kg顺铂组(P<0.05)。VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组显着高于VEGFR2 siRNA组(P<0.01)和5mg/kg顺铂组(P<0.01)。VEGFR2 siRNA组和5mg/kg顺铂组之间,VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA组和VEGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组之间无显着性差异。4.2小鼠肿瘤内EGFR mRNA表达情况,采用单向方差分析(one-way ANOVA)方法比较给药各组EGFR mRNA表达水平(F=1 0.704,P=0.000),显示具有显着性差异,根据方差不齐(P<0.05)采用Dunnett T3法进行各组间两两比较。EGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组显着低于saline组(P<0.05)、VGFR2 siRNA组(P<0.05)、5mg/kg顺铂组(P<0.05)。结论：1.从mRNA水平和蛋白水平的沉默效率来看,VEGFR2 siRNA2显着高于siRNA1、siRNA3和siRNA4,因而选为后续动物体内抗肿瘤实验序列。2. VGFR2 siRNA组、5mg/kg顺铂组、EGFR siRNA组、EGFR2 siRNA+EGFR siRNA+3mg/kg顺铂组可抑制肿瘤生长,显着减小肿瘤体积,但各疗法之间无显着性差异。EGFR2 siRNA+EGFR siRNA和control siRNA可引起荷瘤小鼠体重明显减轻。在生存期方面,各组中位生存时间的两两比较没有显着性差异。3.小鼠肿瘤内VEGFR2, EGFR两种基因表达水平的检测揭示了各组抗肿瘤的分子机制是由于直接和／或间接减少了VEGFR2, EGFR两种基因蛋白表达水平。4.靶向VEGFR2和EGFR的siRNA联合化疗药物可减少化疗药物的使用,增强肿瘤生长抑制作用,减少副作用,延长生存时间。(本文来源于《南方医科大学》期刊2011-04-01）
周媛媛,王栋[7]（2010）在《胡桃属植物抗肿瘤作用化学成分研究进展》一文中研究指出随着人类生存环境的变化和生活水平的提高,人类疾病谱也发生了较大的变化,恶性肿瘤是目前危害人民生命和健康的严重疾病之一。近年来对恶性肿瘤治疗中发现植物原料药与化学合成药物相比具有独特的优势[1],而胡桃属植物普遍(本文来源于《中国药房》期刊2010年43期）
孙颖桢[8]（2008）在《3种卷柏属药用植物抗肿瘤作用的实验研究》一文中研究指出目的:探索卷柏属3种药用植物中黄酮类化合物的抗肿瘤作用,并阐明其作用机理。方法:体外培养肺癌A549,肝癌Bel-7402和结肠癌HT-29叁种人类癌细胞,将卷柏属药用植物的不同提取物作用于癌细胞。(1)通过倒置显微镜对各药物组作用后细胞的形态改变进行观察;(2)应用MTT法计算出各种药物不同浓度、不同作用时间对3种癌细胞生长的抑制率,分析其对细胞增殖的影响;(3)用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。(4)采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptionpolymerase chain reation,RT-PCR)法检测COX-2的mRNA水平,用电泳凝胶成像自动分析系统检测各扩增带的产物含量,用下列公式表示:灰度值=COX-2mRNA密度/β-actin mRNA密度。结果:卷柏属药用植物7种活性成分和活性部位作用于肿瘤细胞后,光镜下可见癌细胞出现凋亡的形态改变。细叶卷柏中5种(组)双黄酮类化合物对3种癌细胞系有显着抑制作用,并能诱导这些肿瘤细胞的凋亡,其抑制作用与时间、浓度呈正相关。翠云草总黄酮和江南卷柏总黄酮可以在mRNA水平上抑制COX-2的表达。结论:发现了细叶卷柏中5种双黄酮类化合物可抑制3种肿瘤细胞的生长,流式细胞术检测进一步证实诱导细胞凋亡是其抗癌机制之一。COX-2在各肿瘤组织中都有较高的表达,翠云草总黄酮和江南卷柏总黄酮能在mRNA水平上抑制COX-2,进而抑制COX-2蛋白质表达,降低PGE_2产量,可能是这两种药用植物抗肿瘤作用的机制之一。本研究为卷柏属药用植物黄酮类提取物用于癌证治疗提供了一定的理论依据,将有助于拓展卷柏的药用价值。(本文来源于《湖北中医学院》期刊2008-04-28）
陆欣[9]（2008）在《第叁者骨髓间充质干细胞对MHC不相合造血干细胞移植后移植物抗肿瘤作用影响的实验研究》一文中研究指出目的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前治愈恶性血液系统疾病最有效的手段之一。移植物抗肿瘤(GVT)效应是allo-HSCT后供者免疫细胞清除肿瘤细胞和防止复发的主要机制。GVHD和GVT作用常同时存在,在一些减轻GVHD的治疗方法影响下,GVT作用也被削弱。间充质干细胞(MSC)和造血干细胞(HSC)联合移植能够改善造血微环境促进造血干细胞的植入,发挥有效的免疫抑制作用,减轻GVHD。本研究利用纯系小鼠C57BL/6H-2b→BALB/cH-2d建立MHC不相合造血干细胞移植荷瘤动物模型,将封闭群KM小鼠骨髓MSC经体外培养后与供鼠的脾脏及骨髓细胞进行联合移植,探讨第叁者来源的MSC在促进MHC不相合HSCT后的造血重建、诱导免疫耐受同时,对GVT作用的影响。方法1实验动物清洁级造血干细胞供鼠C57BL/6~(H-2b)(B6),6~8周龄,雌雄兼用;受鼠BALB/c~(H-2d),6~8周龄,雌雄兼用;第叁者BMMSC供鼠,KM小鼠,6~8周龄,雌雄兼用。以上动物由河北省实验动物中心提供,合格证编号为803177。饲养于百级层流洁净动物饲养柜。2 BMMSCs的培养、扩增将BMMSCs供鼠颈椎脱臼处死,无菌分离小鼠股骨及胫骨,以含F12-DMEM为完全培养基(CCM,含青霉素100μg/ml、链霉素100μg/ml、HEPES液0.03mol/L以及20%FBS)冲出骨髓。直接接种于25cm~2一次性无菌塑料培养瓶中,37℃,5%CO_2饱和湿度培养,每48小时半量换液一次,换液两次后,改为3-4天全量换液。当贴壁细胞层达到90%以上融合时,以0.25%胰酶消化,传至第3代以后的细胞,纯度>90%用于移植。3制备小鼠脾脏(SPC)及骨髓细胞(BMC)取B6小鼠脱颈椎处死后,无菌分离脾脏、双侧股骨和胫骨。常规制备SPC及BMC悬液,锥虫蓝计数,拒染率>95%,调整至所需细胞浓度备用。4 B16细胞的体内传代小鼠黑色素细胞瘤B16购于河北医科大学实验动物学部。常规培养传代后,制备1×10~7/ml细胞悬液,接种于BALB/c小鼠右前腋下,每鼠约1×10~6细胞,在移植当天无菌条件下取出肿瘤块,并制得单细胞悬液,锥虫蓝计数,拒染率>95%;调整细胞浓度至1×10~7/ml备用。5 MHC不相合造血干细胞移植荷瘤动物模型的建立供受鼠均于移植前3天开始饮用酸化水。将研磨制得的小鼠B16细胞接种于受鼠BALB/c右前腋下,0.1ml/鼠(1×10~6细胞),24小时后接受~(60)Coγ射线亚致死性全身照射(TBI)8.5Gy,剂量率0.63Gy/min,预处理后4小时内接受(BMC 5×10~6+SPC 1×10~7)_(B6)/0.2ml/鼠,实验组同时输注不同数量的BMMSC_(KM/B6) ,对照组输注生理盐水/0.2ml/鼠。6动物分组a.低数量第叁者MSC移植组: B16+TBI+(BMC+SPC)_(B6)+BMMSCKM(5×10~3)→BALB/cb.中数量第叁者MSC移植组: B16+TBI+(BMC+SPC)_(B6)+BMMSCKM(5×10~4)→BALB/cc.高数量第叁者MSC移植组: B16+TBI+(BMC+SPC)_(B6)+BMMSCKM(5×10~5)→BALB/cd.高数量供鼠MSC移植对照组: B16+TBI+(BMC+SPC)_(B6)+BMMSC_(B6)(5×10~5)→BALB/ce.无MSC移植组: B16+TBI +(BMC+SPC)_(B6)→BALB/cf.单纯TBI对照组: TBI→BALB/cg.TBI+B16对照组: B16+TBI→BALB/ch.B16成瘤对照组: B16→BALB/c注:每组动物4～5只(不包括在移植后不同时间活杀,留取标本的动物),每组实验重复2次。7结果判断标准7.1移植失败:动物死亡时WBC≤1×10~9/L,或者移植15天后WBC≤1.5×10~9/L。7.2 GVHD判断:WBC>1.0×10~9/L并伴有以下症状3种以上的动物定为GVHD:精神萎靡,翘毛,脱毛,皮损,腹泻,弓背,眼炎,体重骤减甚至死亡; d+10天内出现症状者为超急性GVHD(saGVHD);d+10～d+30天出现者为aGVHD。7.3肿瘤导致死亡的判断:动物死亡时WBC>1.5×109/L,肿瘤明显增大,破溃坏死,无明显GVHD表现。7.4长期生存:生存时间大于30天记为长期生存。若生存期大于60天按60天计算。8移植动物观察内容移植后每天观察小鼠进食及精神的状况,有无aGVHD的表现;每天称量体重;可触及的肿瘤出现为肿瘤出现时间,每隔3天用游标卡尺测量肿瘤大小;记录小鼠的存活时间及原因。隔日采集小鼠尾静脉血,计数WBC数。择时取小鼠的肺、肝、小肠进行病理学检查,并观察变化和差异。9统计学分析采用SPSS13.0统计软件包处理,实验数据采用X士SD表示,多个样本两两比较采用q检验(SNK法), P<0.05为有统计学差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线。结果1 BMMSC对造血重建的影响各移植组植入率均为100%(40/40)。a、b、c、d、e、f各组外周血白细胞均于+4d内达最低,造血重建时间依次为6.0±0.76d,5.3±0.64d,4.9±0.6d,5.0±0.53d,6.7±0.74d,12.0±1.31d。b、c、d组与e组比较造血重建时间明显缩短(p<0.05);a组与e组比较,造血重建时间没有显着差异(p>0.05)。a、b、c组造血重建时间随BMMSC输注数量的增多,时间依次缩短,各组之间比较均有显着差异(p<0.05);c组与d组造血恢复时间无明显差异(p>0.05);在观察期内f组外周血WBC达最低点后缓慢回升,并可长期生存,但WBC始终低于正常。2 BMMSC对GVHD发生情况的影响2.1各组体重变化a、b、c、d各移植组体重于d+7左右达到最低水平,之后随着造血的重建,GVHD和肿瘤生长共同作用下,体重变化呈异质性。f和g组体重均于d+10左右达到最低,但f组体重缓慢恢复,并获得长生存;g组体重则随肿瘤体积的增大恢复较快,超过其他各组的增长速度,但很快衰竭死亡;h组体重随肿瘤生长持续增长,直至死亡。2.2 aGVHD一般情况观察a、b、c、d、e组出现aGVHD的时间依次为7.00±1.07d,12.6±1.06d,14.75±1.28d,14.63±0.92d,5.88±0.83d;a、b、c、d组与e组比较,aGVHD出现的时间推迟,病变程度减轻(p<0.05);随BMMSC输注数量的增加,a、b、c组aGVHD出现的时间推迟,病变程度依次减轻,各组之间比较均有显着差异(p<0.05);c组和d组小鼠移植早期仅有轻度脱毛和体重减轻,精神状态良好,aGVHD发生时间最晚,两组发病时间基本一致(p>0.05)。2.3 BMMSC对aGVHD后肺、肝、小肠病理情况的影响各组GVHD发生时基本病理变化一致。a组和e组病变程度最严重:肺组织明显充血,肺泡腔出血;肝细胞水肿并伴有大片灶性坏死,汇管区及中央静脉和肝血窦明显扩张、淤血,并伴有炎性细胞浸润;小肠腺体及局部粘膜上皮坏死,肠腔内有大量脱落的坏死上皮细胞。b、c、d各组病变程度则明显减轻,其各组间无明显差别。3 BMMSC对小鼠移植后肿瘤生长的影响a组和e组小鼠因移植后很快出现较重的GVHD而死亡,未形成瘤块。b、c、d、g、h各组肿瘤出现时间依次为9.00±0.53d,8.50±0.93d,8.75±0.71d,7.63 d±1.06d,6.38 d±0.92d。d+15测量各组肿瘤大小依次为0.235±0.070 cm3,0.312±0.041 cm3,0.299±0.038 cm3,2.543±0.233 cm3,2.132±0.239 cm3。b、c、d各组小鼠肿瘤出现时间比较无显着差别;d+15肿瘤大小虽随着BMMSC输注数量的增加,肿瘤稍有增大的趋势,但均明显小于g组,各组间比较无显着差别(p>0.05)。说明移植后发生了GVT作用,且BMMSC的输注对GVT没有显着抑制作用。c组和d组肿瘤出现的时间和大小比较无明显区别,p>0.05;提示第叁者小鼠BMMSC和供者来源BMMSC对GVT的影响作用无显着差别。4 BM MSC对小鼠生存情况影响a-h组各组生存时间依次为9.13±0.99d,18.25±1.39d,27.13±3.18d , 26.25±2.60d , 8.25±0.89d , 39.00±2.73d ,17.16±0.98d,36.88±2.90d,移植组小鼠最终均死于GVHD。a组与e组存活时间存活时间无差别;b、c、d各组生存时间较e组明显延长p<0.05。c组与b组比较生存时间延长,p<0.05;提示BMMSC延长小鼠生存时间,且作用效果与BMMSC移植数量正相关;c组与d组生存时间比较,p>0.05,即第叁者BMMSC移植组小鼠和供者BMMSC移植组生存时间无明显差别。结论1供者及第叁者来源的BMMSC均可促进MHC不相合HSCT后造血重建,作用的效果与BMMSC数量有关但与BMMSC来源无关。2供者及第叁者来源的BMMSC均可减轻MHC不相合HSCT后的aGVHD反应,延长生存时间,其作用效果与BMMSC数量有关,与BMMSC来源无关。3供者及第叁者BMMSC在减轻MHC不相合HSCT后aGVHD的同时,对GVT的抑制作用不明显。(本文来源于《河北医科大学》期刊2008-03-01）
余家密,陈强,叶韵斌[10]（2007）在《免疫细胞在移植物抗肿瘤效应中的作用》一文中研究指出近年来异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)由于存在移植物抗肿瘤效应(GVT)而备受关注,尽管GVT的效应细胞和分子机制尚未明了,但一些临床和动物实验资料表明,不同亚群的T细胞、异源反应性自然杀伤(NK)细胞在GVT中发挥了重要作用。我们就免疫细胞在(本文来源于《中国肿瘤临床与康复》期刊2007年02期）
移植物抗肿瘤作用论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
天然产物是抗肿瘤药物研发的重要源泉,目前40%以上的临床用药来源于天然产物及其衍生物,其中包括紫杉醇、长春碱、鬼臼毒素和喜树碱等。草胡椒属植物在云南、贵州等地民间被用作传统抗肿瘤药物,但对其抗肿瘤的相关分子机制介绍并不多见。本论文以叁种草胡椒属植物为研究对象进行抗肿瘤活性的初步分析,并对抗肿瘤活性较强的豆瓣绿进行了机制研究,初步阐明了豆瓣绿及其化学成分抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的分子机制。同时对豆瓣绿乙醇提取物的不同萃取部位及单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选确定。(1)运用MTT法评价了石蝉草、豆瓣绿、草胡椒的乙醇提取物对人单核细胞白血病U937细胞增殖的影响。结果表明这叁种植物均可以显着抑制U937细胞增殖,且豆瓣绿抑制细胞增殖的活性最强。然后我们考察了豆瓣绿乙醇提取物、乙酸乙酯萃取部位和萃余水层抑制U937细胞增殖的活性,结果发现其乙酸乙酯萃取部位具有最强的活性,推测其可能是豆瓣绿抗肿瘤的有效部位。(2)探讨了豆瓣绿提取物对人单核细胞白血病U937细胞凋亡的分子机制。采用Hoechst 33342荧光染色观察发现豆瓣绿乙醇提取物和乙酸乙酯萃取部位均可诱导U937细胞凋亡。采用Annexin V-FITC和PI染色,发现其乙酸乙酯萃取部位呈量效和时效关系诱导细胞凋亡。通过PI染色,发现豆瓣绿的乙醇提取物和乙酸乙酯萃取部位还可使U937细胞细胞周期发生阻滞,表现为G2/M期细胞比例明显减少、S期增多、G1期减少。采用Westren Blot技术,发现豆瓣绿乙酸乙酯萃取部位引起U937细胞细胞周期相关蛋白:细胞周期蛋白D1(CCND1)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)和周期蛋白依赖性蛋白激酶1(CDK1)表达显着减少。进一步的研究表明,豆瓣绿的乙酸乙酯萃取部位可激活半胱天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8),促凋亡蛋白Bid裂解,下游的效应Caspase半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)被激活;另一方面,乙酸乙酯萃取部位还可引起活性氧(ROS)升高,线粒体膜电位(MMP)下降,Bax表达升高,半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)活化和Caspase-3激活。由此得出豆瓣绿乙酸乙酯萃取部位可通过Caspase依赖的外源途径和线粒体调节的内源途径诱导细胞凋亡。(3)筛选了豆瓣绿乙酸乙酯部位抗肿瘤的活性成分。为探究豆瓣绿乙醇提取物抑制U937细胞增殖的主要活性部位,对豆瓣绿乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂萃取部位和萃余水层的抗肿瘤活性进行了检测。结果表明,豆瓣绿的石油醚部位和乙酸乙酯部位具有较强的抑制U937细胞增殖的活性。选用豆瓣绿乙酸乙酯部位,通过硅胶柱色谱法,用氯仿和甲醇进行梯度洗脱,得到7个不同组分1-7。检测各组分细胞毒活性发现:组分1、2和7均具有抑制U937细胞增殖的活性,且组分1的活性最强。我们从豆瓣绿乙酸乙酯部位中分离纯化得到3个单体化合物。随后我们考察了叁个化合物对人单核细胞白血病细胞U937,黑色素瘤细胞A375,人皮肤鳞状表皮癌细胞A431和膀胱癌细胞T24细胞增殖的影响。结果表明:化合物1(Peperobtusin A)的细胞毒活性最好,对多种肿瘤细胞均具有显着抑制增殖的活性。化合物2和3对几种肿瘤细胞敏感性较差。以上结果说明组分1是豆瓣绿乙酸乙酯部位抗U937细胞增殖的主要活性成分,而Peperobtusin A可能是其发挥细胞毒作用的主要活性成分之一。(4)研究了Peperobtusin A对人单核细胞白血病U937细胞凋亡的分子机制。运用Annexin V-FITC染色,对Peperobtusin A引起A431和U937细胞凋亡进行检测,发现相同作用浓度下Peperobtusin A引起U937细胞凋亡更明显。研究还发现Peperobtusin A使U937细胞细胞周期发生S期阻滞。进一步研究表明,Peperobtusin A能够引起U937细胞活性氧升高,线粒体膜电位降低,Caspase-8、Bid、Caspase-9和Caspase-3蛋白裂解增加,Bax表达升高。同时,发现用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理后可显着降低Peperobtusin A引起的U937细胞凋亡率,结合抑制剂处理后Western Blot结果,推断Peperobtusin A通过Caspase依赖性凋亡途径诱导细胞凋亡。有研究表明有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路与细胞凋亡密切相关。对P38MAPK信号途径中的P38和P-P38进行研究,分析药物单独处理和Z-VAD-FMK、B203580分别预处理后结果,表明P38MAPK-Caspase-9参与Peperobtusin A诱导的细胞凋亡。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
移植物抗肿瘤作用论文参考文献
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[10].余家密,陈强,叶韵斌.免疫细胞在移植物抗肿瘤效应中的作用[J].中国肿瘤临床与康复.2007