一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR方法,研究针对塞内卡病毒3C基因保守区域设计了一对引物和探针,将3C基因克隆到pCR-4 TOPO载体中,以重组质粒为标准品,通过优化PCR反应条件,建立了一种检测SVA的实时荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到2.5×10 copies/μL,灵敏度高于普通PCR;与其他相关病毒及细菌均不发生交叉反应,批内和批间试验重复性的变异系数（CV）均小于4%,具有良好的稳定性。研究建立的一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR方法可以检测SVA的定性和定量,对SVA快速诊断检测具有重要意义。

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 病毒株及主要试剂
•   1.2 引物和探针设计及合成
•   1.3 病毒RNA提取
•   1.4 引物筛选试验
•   1.5 重组质粒标准品制备
•   1.6 实时荧光定量PCR反应条件优化
•   1.7 建立实时荧光定量PCR标准曲线
•   1.8 特异性试验
•   1.9 灵敏性试验
•   1.1 0 重复性试验
•   1.1 1 样品检测
• 2 结果
•   2.1 引物筛选试验结果
•   2.2 实时荧光定量PCR反应条件的优化结果
•   2.3 标准曲线的绘制结果
•   2.4 特异性试验
•   2.5 灵敏性试验结果
•   2.6 重复性试验结果
•   2.7 样品检测结果
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王秀明,陈君彦,魏学峰,刘国英,关平原,范秀丽,张贵刚,武瑾贤,王艳杰,刘建奇

关键词: 塞内卡病毒,实时荧光定量,探针

来源: 畜牧兽医科学(电子版) 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 金宇保灵生物药品有限公司

分类号: S852.65

页码: 1-5

总页数: 5

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