导读:本文包含了尿素酶亚单位基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:幽门,尿素,螺杆,基因,单位,免疫,序列。
尿素酶亚单位基因论文文献综述
赵卓[1]（2010）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位（UreB）基因的分段表达及免疫学性质分析》一文中研究指出目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)与多种胃部疾病密切相关,在多种胃肠外疾病中也起作用,国际肿瘤研究机构已将其列为I类致癌因子。H.pylori在全球感染率近50%,在发展中国家,可高达80%以上。目前针对H.pylori感染的联合疗法(抗生素联合质子泵抑制剂)存在明显不足:医疗费用高、较低的患者依从性、易产生耐药性、不能彻底根除细菌、不能防止再感染。H.pylori疫苗接种有助于H.pylori相关性疾病的发病率。目前所研究的H.pylori治疗性疫苗大多采用H.pylori全菌或全菌裂解物,或H.pylori毒性蛋白如尿素酶、空泡毒素、毒素相关蛋白、中性粒细胞激活蛋白等,单独或联合不同佐剂进行接种,在动物模型中均能引起保护性应答。尿素酶是H.pylori中含量最为丰富的蛋白,既是H.pylori的定植因子又是毒力因子,并且在各菌株中相对保守,其B亚单位(UreB)以其无毒性成为疫苗设计的首选保护性抗原。在宿主体内,蛋白抗原主要是通过表位发挥作用的,蛋白抗原引起的细胞反应主要是由免疫优势表位引起的特异性的细胞反应,因此,明确UreB蛋白抗原的表位,特别是优势表位,利于发展更有效的H.pylori疫苗。本课题旨在用基因工程方法分段表达UreB蛋白,并对其进行免疫学性质分析,获得有免疫学活性的UreB片段;用H.pylori全菌皮下免疫C57BL/6小鼠,借助DC2.4细胞的抗原递呈作用,建立体外筛选UreB优势表位的细胞学实验方法,为精确筛选UreB优势表位奠定方法学基础,此研究将为制备高效的表位疫苗提供理论指导。方法1.用DNASTAR和DeepView/Swiss-PdbViewer 3.7 (SP5)软件分析UreB结构和全基因序列,以覆盖该蛋白全长、不遗漏表位为原则,选择UreB全基因序列的分割点,设计UreB五个截断片段U1 (1～185aa)、U2(98～294aa)、U3(179～380aa)、U4(292～476aa)和U5 (375～569aa)。2.以本室前期获得的重组UreB为模板,采用PCR方法扩增U1、U2、U3、U4和U5五个片段,并构建到原核表达载体pET-11c (+)中,通过NdeⅠ/EcoRⅠ酶切鉴定阳性重组子,构建PET-11c -U1、PET-11c -U2、PET-11c-U3、PET-11c-U4和PET-11c -U5五个重组质粒,将重组质粒测序结果与GenBank数据对比。3.将PET-11c -U1、pET-11c -U2、pET-11c -U3、pET-11c-U4和pET-11c -U5五个重组质粒分别转化到大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达, SDS- PAGE鉴定重组蛋白表达,免疫印迹鉴定其抗原性。4.用初步纯化的重组片段U1、U2、U3、U4和U5以100μg/只/次口服免疫BALB/C小鼠,同时做PBS组对照,抗原加弗氏完全佐剂(1:1)乳化初次免疫后,间隔一周加弗氏不完全佐剂(1:1)再次免疫叁次。末次免疫7天后,ELISA检测免疫后抗血清,鉴定重组片段的免疫原性。5.在体外鉴定C57BL/6小鼠细胞的Th1型细胞应答:用H.pylori超声破碎物以100μg/只/次皮下免疫不同性别C57BL/6小鼠,抗原加弗氏完全佐剂(1:1)乳化初次免疫后,间隔一周加弗氏不完全佐剂(1:1)再次免疫叁次。于末次免疫7天后取小鼠淋巴结及脾脏,分别分离其淋巴结细胞和脾细胞。用PMA和离子霉素联合刺激分离出的淋巴结细胞和脾淋巴细胞,流式细胞术检测其中分泌IFN-γ的CD4+T细胞的比例。6.为消除胰酶对DC2.4细胞的影响,未用胰酶处理DC2.4细胞,倒置显微镜观察其细胞形态,流式细胞术测定DC2.4细胞表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD86的表达水平。7.为优化DC2.4细胞的抗原递呈效果,确定DC2.4细胞负载抗原并成熟的最佳条件:用UreB联合LPS及TNF-α刺激DC2.4细胞,于培养的不同时间收集DC2.4细胞悬液,测定DC2.4细胞表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD86的表达率,获得负载UreB抗原的成熟的DC2.4细胞。8.为获得大量的UreB特异性的T细胞,在体外,负载UreB的成熟的DC2.4细胞与H.pylori免疫小鼠的脾淋巴细胞分别以1:1、1:2、1∶5的比例混合培养, 96孔板每孔含1×105个脾淋巴细胞,终体积为200μL,在37℃、50 mL/L CO2培养箱中培养5 d后,再添加IL-2(100 U/mL),继续培养2 d后收集细胞悬液。9.为了确定混合细胞应答的的最适比例,将UreB特异性的T细胞与负载UreB的成熟的DC2.4细胞分别以1:1、1:2、1∶5的比例混合培养,流式细胞术测定分泌IFN-γ的CD4+T细胞的比例。结果1.成功克隆了U1 (1～185aa)、U2(98～294aa)、U3(179～380aa)、U4(292～476aa)和U5 (375～570aa) 5个目的片段,成功构建了PET-11c -U1、PET-11c -U2、PET-11c-U3、PET-11c-U4和PET-11c -U5五个重组质粒;经测序所得产物基因序列与Genbank数据相符。2.将PET-11c -U1、PET-11c -U2、PET-11c -U3、PET-11c-U4和PET-11c -U5五个重组质粒分别转化到宿主菌大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG作用4h诱导表达,经SDS- PAGE显示,重组蛋白U1、U2、U3、U4和U5均在大肠杆菌E.coli BL21中成功表达,诱导出的蛋白分子量分别约为20.0kDa、21.0kDa、22.0kDa、21.0kDa和22.0kD;免疫印迹和ELISA显示五个重组片段均具有良好的抗原性和免疫原性。3.用PMA联合离子霉素刺激分离出的淋巴结细胞和脾淋巴细胞,流式细胞术结果显示雄性C57BL/6小鼠脾淋巴细胞组分泌IFN-γ的CD4+T细胞的比例最高。4.流式细胞术测定DC2.4细胞表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD86的表达水平,显示胰酶消化后DC2.4细胞MHC-II类分子呈低水平表达而协同刺激分子CD86呈高水平表达;而未用胰酶处理的DC2.4细胞MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD86的表达水平均较低。5. UreB负载DC2.4细胞24h,加入LPS及TNFα继续刺激12h, DC2.4细胞表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子的表达均处于较高水平,获得了负载UreB的成熟的DC2.4细胞。6.通过流式细胞术测定CD4+T细胞IFN-γ的分泌水平,确定了混合细胞反应的最适比例:在体外,负载UreB的成熟的DC2.4细胞与H.pylori免疫小鼠的脾淋巴细胞以1:2的比例混合培养,培养的第7天可获得大量的UreB特异性的T细胞,将载UreB的成熟的DC2.4细胞与该UreB特异性的T细胞负再以1:2的比例共培养,细胞群中分泌IFN-γ的CD4+T细胞的比例最高。结论1. UreB的分段表达,为全面精确鉴定UreB表位奠定了实验基础。2. DC2.4是未成熟的永生化的克隆DC细胞,易于培养,可较好递呈UreB蛋白。3.初步建立了UreB免疫优势T细胞表位筛选的体外细胞学实验方法,为分析UreB优势表位,发现新的UreB保护性表位奠定了实验基础。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2010-05-01）
朱卫华,李生迪,宣俊文,陈翠萍[2]（2008）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达》一文中研究指出目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确。3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%。Western blot结果表明,表达的目的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rossetta(DE3)中获得了高效表达。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2008年09期）
代丽萍,段广才,郗园林,范清堂[3]（2004）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位编码基因的克隆与序列分析》一文中研究指出目的 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)尿素酶B亚单位的编码基因(ureB)的克隆和序列分析,为H.pylori基因工程疫苗的研究奠定基础。方法 应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEL-HP27和国际标准参考株H.pylori的ureB基因,通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中,用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒。克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较。结果 重组质粒经双酶切后得到1.71 kb的ureB基因片段,特异PCR可扩增出ureB基因片段,证实H.pyloriureB基因的重组克隆质粒构建成功。经测序,国内分离H.pylori MEL-HP27的ureB基因全长1710bp(Genbank收录号:AY295085),编码由569个氨基酸残基组成的肽链,ureB基因序列与GenBank公布的H.pylori相应基因同源性高达96.08％-98.30％,氨基酸序列同源性在98.77％-99.82％之间。结论 成功克隆了MEL-HP27菌株的ureB基因,其核苷酸序列与国际参考株NCTC11637的同源性为97.67％。(本文来源于《胃肠病学和肝病学杂志》期刊2004年06期）
曾浩,邹全明,张卫军,鲁东水[4]（2004）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因工程菌发酵工艺的研究》一文中研究指出通过不同培养基、不同葡萄糖浓度、不同溶氧条件、补料与非补料对幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因工程菌的菌体生长与外源蛋白表达量的影响的比较 ,建立了稳定、适宜的幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因工程菌发酵工艺。多批实验结果证明 ,菌体单产可达 86 g/L ,目的蛋白的表达率为 38.2 %。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2004年05期）
陈喆[5]（2002）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位和细胞空泡毒素基因的克隆，表达和其融合蛋白免疫反应性的研究》一文中研究指出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染呈全球性分布。发达国家成人的感染率约30～50％，发展中国家则超过80％。大量研究资料证明Hp是人慢性胃炎和消化性溃疡的特异性病原体，长期Hp感染与人胃癌和胃B细胞淋巴瘤的发生密切相关。目前临床上用抗生素治疗Hp的感染，但存在药物副作用、费用较高、再次感染等问题。更为重要的是，长期使用抗生素可诱导Hp耐药菌株产生，这给Hp再次感染时的抗生素治疗带来很大的困难。 接种疫苗所产生的人体特异性免疫力，具有稳定和长期的特异性抗感染作用。已有一些文献报告，Hp全菌裂解液可保护动物免受Hp感染，具有预防作用；也能清除动物体内已感染的Hp，从而具有治疗作用。几种Hp重组蛋白抗原在动物模型中已被证实能诱发保护性免疫反应，还可清除动物体内已感染的Hp。因此，Hp疫苗的研制及其应用对于Hp感染的防治、相关疾病的控制具有极为重要的意义。由于培养Hp的营养要求高、生长周期长、产量低、易污染、菌种保存困难等原因，基因工程疫苗应是Hp疫苗研制的主要方向。 所有Hp菌株均含有尿素酶(urease)，该酶对于细菌在强酸环境中生存、粘附细胞等均有重要意义。由于Hp尿素酶具有细菌外膜中有分布、 浙江大学硕士学位论文 陈 益 高度保守、颗粒状结构、大分子量和强免疫原性等特点，最早作为Hp疫 苗的侯选抗原。业己肯定，尿素酶的抗原性主要取决于 B亚单位（UreB）。 早期的文献根据是否含有细胞毒性相关蛋白（Cytotokic associated protein， C渺）和细胞空泡毒素（vacuolatin Cytoxin protein． vacA）将Hp菌株分 为 agAhacA＋和 cagA－／vaCA－两类，并认为 cagA＋／vacA＋菌株有致病性， 呻－／vacA坝否。从亚洲国家人群分离的Hp菌株中，约75％的菌株为 cagA＋／vacA七因此，CagA和VacA可能是HP疫苗良好的侯选抗原。然 而，不少研究结果证实C渺基因变异很大，其产物C哪不宜作为疫苗的 抗原。vacA基因非常保守，不同 Hp菌株的 vacA基因核苦酸序列的同源 性高达90％以上，氨基酸序列同源性更高。此外，VaCA也具有细菌外膜中 有分布、大分子量和强免疫原性的优点。因此UreB和VaCA应是较为理想 的Hp疫苗抗原。 本文拟克隆 Hp的 ureB和 vacA基因并构建表达系统，其产物将作为 Hp基因工程疫苗的抗原，为 Hp基因工程疫苗的研制奠定基础。 实验方法 1．Hp的分离培养 采集 26例患者胃粘膜标本，匀浆后涂布于含 10％抗凝羊血和抗生素添 加剂的Hp选择性培养基上，微需氧环境中37’C培养扣。若菌落细小、半 透明，菌体革兰染色阴性、呈弧状或“海鸥”状，快速尿素试验阳性，能 与Hp抗血清凝集者为Hp。 2．Hp DNA的制备 采用常规酚－氯仿法、无DNse的RNase消化提取及纯化Hp基因组 DNA。 3．＊C丑 2 浙江大学硕士学位论文 陈 品 ureB基因的扩增：反应体积 50…，内含 lpmol／L引物、5 mol几 dNTP、40 mol／L MgCI。、2．SU Taq酶、IX PCR缓冲液及 100ng 模板。 PCR反应参数：94’C sinifi，ICyCle：94℃30SCC，58℃30SeC，68℃ 90秒，3o Cydes；72℃7mh，2。ydes。ureB扩增引物如下：上游 5’．GGAGAATTCATTAGCAGAAAAGAAMGTTTCT ATG－3’，下游 5’．GThCTCGAGC17ACGAAWCT777’GTTGCTTGACC．3’。 vacA基因的扩增：反应体积5口…，内含1卜mol几引物、5 mol几 dNTP、40 mol／L MgCI。、二．SU Taq酶、IX PCR缓冲液及 100ng 模 板。＊＊R反应参数：94℃sin h，1。y。ie：94℃30s＊。，58℃30s＊c， 68’C90秒，30 cycles；72oC 7min，2 cycles。vacA扩增引物如下： 上游5’－GCGGAATTCATGGAAATACAACAAACACAC－3’，下游 5’．GGGCTCGAGAThGGTACCTGTAGAAACAT．3’。 4．TA克医、测序与表达载体的构建 用QIAqllick柱回收法纯化回收PCR目的片段，与pGEM1Easy载体 连接形成pGEM丁＊卿个acA和pGEM＊卫asyureB重组质粒。阳性菌落 克隆经酶切鉴定后，用双脱氧链末端终止法测定插入片段的核昔酸序列。 所获得的序列与 GeneBank登录的 Hp ureB和 vacA序列进行核昔酸和氨基 酸同源性比较。 原核表达载体 pGEX上 q 的构建：EOOR和 wl双酶切 pGEM－T－Easy vacA和原核表达载体pGEX6 l质粒DNA(本文来源于《浙江大学》期刊2002-04-01）
朱森林,陈旻湖,廖文俊,陈洁,胡品津[6]（2001）在《表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因减毒鼠伤寒沙门疫苗菌的构建和鉴定》一文中研究指出目的 构建表达幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)尿素酶B亚单位 (ureB)基因的重组减毒鼠伤寒沙门疫苗菌。方法 用PCR扩增ureB基因 ,经适当酶切 连接反应将其克隆入高效原核表达质粒 pTrc99A ,进行基因测序 ,重组质粒鉴定后再导入减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1,提取重组疫苗菌质粒 ,PCR和酶切鉴定 ,筛选阳性克隆。重组ureB能在宿主菌中表达 ,用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和薄层扫描进行蛋白分析。重组菌C5 7BL/ 6小鼠喂灌 ,分批 2d和 10d后处死小鼠 ,取脾和末段回肠进行细菌培养 ,挑菌落提质粒鉴定。结果 构建携带ureB的重组原核表达质粒pTrc99A ureB ,并将后者成功转化入减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1,阳性克隆经PCR和酶切证实。SDS PAGE电泳和薄层扫描分析表明 ,重组菌SL32 6 1(pTrc99A ureB)表达相对分子质量为6 6× 10 3的ureB ,约占菌体蛋白总量的 2 6 %。小鼠重组菌喂灌 2d或 10d后 ,脾和末段回肠均发现携目的基因的菌落。结论 构建表达HpureB的减毒鼠伤寒沙门疫苗菌 ,为探索制备Hp口服活疫苗奠定了基础。(本文来源于《中华消化杂志》期刊2001年09期）
吴超,王宁,袁小澎,鲁东水,邹全明[7]（2001）在《幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因克隆表达及临床应用》一文中研究指出目的 获得重组表达的人幽门螺杆菌 (Hp)尿素酶B亚单位蛋白 (UreB) ,并将其运用于Hp感染的临床检测。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编码UreB的基因 (ureB) ,将其克隆于质粒PinPointTMXa Ⅲ上进行序列分析和蛋白表达 ,通过亲和层析得到纯化的重组UreB蛋白并用于 113例消化性溃疡患者Hp感染的酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测。结果 克隆的ureB基因核苷酸序列与GenBank公布的序列相比较 ,同源性为 96 .44 % ,推定氨基酸序列同源性为 99 6 5 %。纯化的重组UreB蛋白相对分子量约为 6 6 0 0 0 ,纯度为 90 %以上 ,并保持较好的免疫原性。应用纯化的重组UreB蛋白联合ELISA法检测 113例消化性溃疡患者Hp感染的灵敏度和特异性分别为 92 .0 %、98.5 %。结论 重组UreB蛋白作为抗原用于ELISA法检测Hp感染 ,保持了较高的灵敏度和特异性 ,可用于Hp感染的临床检测与诊断、疗效判定及流行病学研究(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2001年05期）
施理,王继德,陈烨,张振书,张亚历[8]（2000）在《幽门螺杆菌基因重组尿素酶亚单位免疫预防作用的实验研究》一文中研究指出目的 评价幽门螺杆菌 (Hp)基因重组尿素酶A、B亚单位 (rUreA、rUreB)的免疫预防作用。方法 将BALB/C小鼠分为如下 7组 :阴性对照组 (10只 )、霍乱毒素B亚单位 (CTB)对照组 (10只 )、rUreA对照组 (10只 )、rUreB对照组 (10只 )、rUreA +CTB实验组 (30只 )、rUreB +CTB实验组 (30只 )、Hp超声粉碎物 +CTB实验组 (30只 ) ,胃内分别接种如下物质 :15 0ml磷酸盐缓冲液、5 μgCTB、5 0μgrUreA、5 0 μgrUreB、5 0 μgrUreA +CTB、5 μgrUreB +CTB、40 0 μgHp超声粉碎物 + 5 μgCTB ;2周后胃内接种Hp(10 7～ 10 8CPU/次 ) ;4周、8周、12周后处死小鼠 ,用胃组织切片Giemsa染色、显微镜下检查Hp的方法评价免疫预防作用 ;另外 ,rUreA +CTB毒副作用组 (10只 )、rUreB +CTB毒副作用组 (10只 )小鼠 ,只接种rUreA +CTB或rUreB +CTB ,而不感染Hp ,12周后处死 ,用胃组织切片HE染色、显微镜下观察炎症细胞浸润的方法评价毒副作用。结果 给小鼠胃内单独接种CTB或rUreA或rUreB ,可使免疫小鼠胃粘膜Hp感染数目明显减少。CTB能增强rUreA、rUreB免疫保护作用。接种rUreA +CTB较接种rUreB +CTB或Hp超声粉碎物 +CTB ,免疫保护作用产生的较晚。接种rUreA +CTB或rUreB +CTB或Hp超声粉碎物 +CTB都不能使免疫小鼠完全免受Hp感染(本文来源于《中华医学杂志》期刊2000年11期）
吴超,邹全明,张卫军,郭学青[9]（2000）在《中国人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的基因克隆及序列分析》一文中研究指出目的克隆人幽门螺杆菌 (helicobacter pylori,Hp)尿素酶 B基因 (ure B) ,并分析其核苷酸序列的特性。方法用PCR技术从临床分离的 Hp菌株基因组中扩增出 ure B基因 ,将其克隆至 p HP质粒上进行序列分析。结果克隆得到的 ure B基因长度为 1713bp,其核苷酸序列与 Gen Bank公布的序列有 6 1个碱基存在差异 ,同源为 96 .44 % ,推定的氨基酸序列同源性为99.6 5 %。结论我们所克隆的 ure B基因可用于 Hp保护性抗原 Ure B蛋白的表达并保持原有的免疫原性(本文来源于《免疫学杂志》期刊2000年05期）
施理,张亚历,张振书,张万岱,周殿元[10]（2000）在《基因重组H.pylori尿素酶A或B亚单位生物活性、免疫活性检测》一文中研究指出目的:研究基因重组H.pylori尿素酶A或B亚单位(rUreA、rUreB)的生物学及免疫活性.方法:用酶联免疫吸附试验结合快速尿素酶试验检测rUreA、rUreB生物学及免疫活性.结果:rUreA、rUreB加入尿素酶反应液,37℃作用5分钟,溶液呈黄色,反应时间延长3小时,溶液仍保持黄色,与阴性对照超大型声粉碎物加入尿不比酶反应液,37℃作用5分钟溶液颜色相同,而阳性对照组(尿素酶液中加入H.pylori活菌),2分钟溶液即变为(本文来源于《中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编》期刊2000-09-01）
尿素酶亚单位基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确。3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%。Western blot结果表明,表达的目的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rossetta(DE3)中获得了高效表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
尿素酶亚单位基因论文参考文献
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论文知识图
