生物素标记探针论文_尤玲,刘晓艳,黄文斐,王敏,苏航

导读:本文包含了生物素标记探针论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:探针,生物,标记,核酸,原位,苦杏仁,病毒。

生物素标记探针论文文献综述

尤玲,刘晓艳,黄文斐,王敏,苏航[1](2015)在《灯盏乙素生物素标记探针的合成及其抗肿瘤活性研究》一文中研究指出目的:设计合成灯盏乙素生物素标记探针4和10,并考查其抗肿瘤活性。方法:以灯盏乙素苷元与生物素为原料,经过酯化反应、酰胺反应、水解反应、取代反应等,在灯盏乙素苷元的4'位引入生物素标记,得到灯盏乙素生物素标记探针4和10,并对其进行细胞水平的抗肿瘤活性研究。结果:合成的探针化合物及中间体均经过1H-NMR,13C-NMR,ESI-MS进行了结构表征,确证结构与目标产物一致。细胞实验结果表明灯盏乙素生物素标记探针4和10均具有较好的抗肿瘤活性。结论:灯盏乙素生物素标记探针4和10均表现出与灯盏乙素相当的抗肿瘤活性,将为进一步的灯盏乙素抗肿瘤靶标的发现奠定基础。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2015年19期)

陈瑜,胡爱国[2](2015)在《新型生物素标记的苦杏仁苷活性探针的合成》一文中研究指出以苦杏仁苷结构中的糖羟基作为反应位点进行生物素化修饰,经酯化、缩醛化、Sonogashira偶联等反应合成了一个新型的生物素标记的苦杏仁苷活性探针,其结构经1H NMR,13C NMR,IR和HR-ESI-MS表征。(本文来源于《合成化学》期刊2015年04期)

郭跃辉,刘立宾,徐芒华,郭竹英,姜斌[3](2012)在《生物素标记探针-液相杂交-非变性PAGE检测非编码小RNA方法的建立和优化》一文中研究指出目的建立生物素标记探针-液相杂交-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测非编码小RNA(sRNA)的方法。方法将生物素标记的sRNAU6寡核苷酸探针经非变性PAGE电泳后转印至尼龙膜上,然后用辣根过氧化物酶(HRP)耦联链霉亲和素进行检测。从细胞中提取总RNA,用已标记U6探针优化液相杂交退火条件及杂交缓冲液;用建立的方法检测并计算BEAS-2B、A549细胞中sRNAU6与miRNA145的含量。结果将Biotin-11-dUTP成功标记至寡核苷酸上,随着寡核苷酸浓度增加,检测信号强度越强,10μmol/L时达到最强。采用水浴反应条件与采用聚合酶链反应(PCR)仪梯次降温反应条件下得到的杂化链无明显差异;以磷酸盐缓冲液作为杂交缓冲液优于Tris-HCl、DEPC水;BEAS-2B、A549细胞5μgRNA中U6含量接近;BEAS-2B细胞中miRNA145绝对含量高于A549细胞。结论成功建立并优化了sRNA检测新方法 ,为简单、易行、可靠地检测sRNA提供了可能。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2012年06期)

程安春,廖永洪,汪铭书,袁桂萍,徐超[4](2009)在《生物素标记寡核苷酸探针原位检测石蜡切片鸭瘟病毒核酸》一文中研究指出据GenBank中有关鸭瘟病毒(DPV)的1个765 bp的EcoRⅠ片段序列,用Oligo软件设计长度为37 bp的寡核苷酸并用生物素标记制备探针,经blast分析和斑点杂交检测探针的特异性后,建立从石蜡切片中检测出DPV核酸的原位杂交方法并对人工感染死亡鸭的各组织器官进行检测,结果显示:(1)寡核苷酸探针能特异性检测到DPV强毒CHv株DNA,对鸭病毒性肝炎病毒QL79株RNA、血清1型鸭疫里默氏杆菌DNA、鸭源多杀性巴氏杆菌DNA、鸭沙门菌DNA和大肠杆菌DNA的检测结果为阴性。(2)以寡核苷酸探针建立的从石蜡切片中检测出DPV核酸的原位杂交方法的最佳反应条件为:组织切片先用0.2 mol/L HCl 37℃处理20 min,然后用100 mg/L的蛋白酶K 37℃消化15 min左右;杂交时探针工作浓度为350μg/L;Avidin-AP的工作稀释度为1∶100。(3)以所建立的原位杂交法检测DPV-CHv强毒人工感染死亡鸭的各组织器官,结果肝脏、肠道、法氏囊、脾脏、食道、肺脏和肾脏呈阳性反应,DPV的DNA分布于特定细胞的细胞浆和细胞核。结果表明,原位杂交检测石蜡切片中DPV的方法具有直观、特异性强的优点,是对DPV进行检测和病原定位的良好方法,可用于DPV的侵染过程和致病机理研究及回顾性诊断检测。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2009年04期)

聂胜洁,赵继智,易晓佳,景强,吴静[5](2009)在《生物素标记探针检测外周血白细胞端粒长度的应用研究》一文中研究指出目的建立生物素标记测定端粒DNA长度的方法,探讨其法医学应用价值.方法基因组DNA经RsaI和HinfI限制性内切酶消化,0.8%琼脂糖凝胶电泳,Southern印迹转移,以5'末端生物素标记寡核苷酸(TTAGGG)3为探针进行杂交,化学发光检测DNA谱带,与DNA标准分子量比较计算端粒长度.结果通过严格控制印迹转移条件、探针的工作浓度、杂交温度等主要影响因素,获得了比较好的杂交条带.结论生物素标记探针检测端粒DNA长度方法稳定、可靠,无放射污染,杂交信号明显.(本文来源于《昆明医学院学报》期刊2009年03期)

赵英,牛建新[6](2008)在《生物素标记cDNA探针检测苹果锈果类病毒》一文中研究指出以含苹果锈果类病毒(ASSVd)全长序列的重组质粒PUC为模板DNA,加入ASSVd类病毒特异性引物,应用聚合酶链式反应技术(PCR)合成了生物素标记的cDNA探针,在斑点杂交反应中,探针最适使用浓度为1/10,探针检测感病的ASSVd类病毒的最大稀释倍数是1/100。利用制备的探针进行田间检测,结果与RT-PCR检测结果一致,阴性对照均无杂交信号出现。(本文来源于《西北农业学报》期刊2008年03期)

王利平,王国平,谭荣荣,洪霓[7](2006)在《生物素标记cDNA探针杂交检测梨树上3种潜隐病毒研究》一文中研究指出本研究合成了苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的生物素标记cDNA探针,对斑点杂交和免疫印迹杂交检测这3种病毒的效果进行了分析。以含ACLSV和ASGV克隆片段的大肠杆菌菌液为样品时,斑点杂交检测灵敏度分别为80 cfu/μL和50 cfu/μL。以离体培养砂梨植株为材料,采用斑点杂交法检测砂梨离体培养植株粗提液中的3种病毒,均产生强的杂交信号,且特异性好。比较斑点杂交和ELISA检测病毒含量相对较低的热处理再生植株中ASGV和ACLSV,结果表明斑点杂交具有较高的灵敏度。组织印迹杂交检测砂梨离体植株ASGV和ACLSV的结果显示,这2种病毒在离体植株的各部位均有分布,自基部至茎尖各部位印迹均产生很强的杂交信号。(本文来源于《植物病理学报》期刊2006年06期)

韩盛,刘升学,向本春,曹连莆[8](2006)在《叁种PCR引物法制备生物素标记的HpLV衣壳蛋白基因cDNA探针检测效果的比较》一文中研究指出采用正义、反义引物及正义和反义引物双链PCR法制备了生物素标记的HpLV衣壳蛋白基因的cDNA探针。检测结果表明,叁种PCR引物法标记的cDNA探针显色灵敏度均可达到10pg/μL,对目标基因DNA的检测灵敏度可达90pg/μL,但反义引物PCR法标记探针的检测效果要好于正义和反义引物双链PCR法制备的探针;在目标基因DNA浓度一定的情况下,探针的浓度对检测效果的影响并不大;正义、反义引物PCR法制备的探针可不经煮沸变性处理直接使用;用50ng/mL浓度的反义引物PCR法制备的生物素标记cDNA探针可检测到带毒啤酒花叶片和花瓣中的啤酒花潜隐病毒RNA。(本文来源于《石河子大学学报(自然科学版)》期刊2006年04期)

高风英,叶星,白俊杰,吴锐全,劳海华[9](2005)在《罗氏沼虾18SrRNA基因生物素标记探针的制备及应用》一文中研究指出Probes are essential for study of gene expression and regulation. In this study, a method was established to prepare the biotin-labeled probe for 18S rRNA gene of freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii. And the labeled method was used to produce a lysozyme gene probe, then applied in analysis of lysozyme gene expression. Primers were designed according to the nucleotide sequences of 18S rRNA of Decapoda in order to isolate the 18S rRNA gene sequences of M. rosenbergii. Total genomic DNA was isolated from hepatopancreas of the freshwater prawn. A specific DNA fragment with desired size was amplified by PCR using the total DNA as templates. The DNA fragment was inserted into pGEM-T Easy vector and sequenced. The result of BLAST and alignment analysis confirmed that the DNA fragment isolated was the 18S rRNA gene of M. rosenbergii, which was 418 nt in length. Biotin-labeled probe of the 18S rRNA was then produced by PCR using the recombinant plasmid as templates. The biotin-21-dTTP and the non-labeled dNTP were added to the PCR reaction system. Ratio of the biotin-21-dTTP and the non-labeled dTTP was 3 to 1. The yield of the labeled probe is 300 ng·μL~(-1). The detection limit of the probe is 60 pg. A biotin-labeled probe of lysozyme gene was prepared by the same label method, and the yield of the lysozyme gene probe is 500 ng·μL~(-1). These biotin-labeled probes were applied in Northern dot blotting analysis of tissue distribution of lysoyzme mRNA of M. rosenbergii. Signals were scanned and quantified by Analysis System of Biology Image. The signal intensity ratio of the lysozyme to 18S rRNA represents the relative expression level of lysozyme mRNA. The results showed that the lysozyme mRNA existed in all the tissues checked, including eye, muscle, gill, hepatopancreas, haemocytes and intestine. But lysoyzme mRNA levels varied among different tissues. The highest level was found in the intestine, and the second was in the hepatopancreas and the lowest was in the muscle. The signal intensities of 18S rRNA among tissues were consistent, which showed that the 18S rRNA gene expressed stably in different tissues and could be used as an internal standard for researches of specific gene expression in prawns.(本文来源于《水产学报》期刊2005年01期)

杨建法,潘登,王松山,李文淑,周光德[10](2004)在《多个生物素标记的SARS冠状病毒cDNA探针在原位杂交中的应用》一文中研究指出严重急性呼吸综合征 (severeacuterespiratorysyndrome,SARS)是一种由新型 (种 )冠状病毒引起的传染性疾病 ,利用核酸原位杂交技术方法研究组织内SARS冠状病毒感染的细胞种类、分布及病毒载量是SARS病理学和在体病原学研(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2004年04期)

生物素标记探针论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以苦杏仁苷结构中的糖羟基作为反应位点进行生物素化修饰,经酯化、缩醛化、Sonogashira偶联等反应合成了一个新型的生物素标记的苦杏仁苷活性探针,其结构经1H NMR,13C NMR,IR和HR-ESI-MS表征。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

生物素标记探针论文参考文献

[1].尤玲,刘晓艳,黄文斐,王敏,苏航.灯盏乙素生物素标记探针的合成及其抗肿瘤活性研究[J].中国新药杂志.2015

[2].陈瑜,胡爱国.新型生物素标记的苦杏仁苷活性探针的合成[J].合成化学.2015

[3].郭跃辉,刘立宾,徐芒华,郭竹英,姜斌.生物素标记探针-液相杂交-非变性PAGE检测非编码小RNA方法的建立和优化[J].国际检验医学杂志.2012

[4].程安春,廖永洪,汪铭书,袁桂萍,徐超.生物素标记寡核苷酸探针原位检测石蜡切片鸭瘟病毒核酸[J].中国兽医学报.2009

[5].聂胜洁,赵继智,易晓佳,景强,吴静.生物素标记探针检测外周血白细胞端粒长度的应用研究[J].昆明医学院学报.2009

[6].赵英,牛建新.生物素标记cDNA探针检测苹果锈果类病毒[J].西北农业学报.2008

[7].王利平,王国平,谭荣荣,洪霓.生物素标记cDNA探针杂交检测梨树上3种潜隐病毒研究[J].植物病理学报.2006

[8].韩盛,刘升学,向本春,曹连莆.叁种PCR引物法制备生物素标记的HpLV衣壳蛋白基因cDNA探针检测效果的比较[J].石河子大学学报(自然科学版).2006

[9].高风英,叶星,白俊杰,吴锐全,劳海华.罗氏沼虾18SrRNA基因生物素标记探针的制备及应用[J].水产学报.2005

[10].杨建法,潘登,王松山,李文淑,周光德.多个生物素标记的SARS冠状病毒cDNA探针在原位杂交中的应用[J].解放军医学杂志.2004

论文知识图

一2.目的DNA的序列原理图超迁移实验1.生物素标记探针;2...和HVC的生物素标记探针sout...生物素标记探针活性检测结果生物素标记探针的效率检测

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

生物素标记探针论文_尤玲,刘晓艳,黄文斐,王敏,苏航
下载Doc文档

猜你喜欢