导读:本文包含了原果胶酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:果胶,酵母,曲霉,枯草杆菌,醛酸,芽孢,菌株。
原果胶酶论文文献综述
赵志强,刘战民,姚立峰[1]（2015）在《产原果胶酶菌株X4的鉴定及其培养基的优化》一文中研究指出采用分子生物学的方法对前期实验中获得的一株产原果胶酶菌株X4进行了鉴定.为了提高菌株X4所产的原果胶酶量,采用响应面法优化了菌株X4的培养基组分.结果显示,菌株X4为Bacillus polyfermenticus,其主要生长影响因子为淀粉、酵母提取物、胰蛋白胨.在本实验条件下获得的最优培养基配方为淀粉3.45 g/L,酵母提取物3.29 g/L,胰蛋白胨5.68 g/L,所产原果胶酶的酶活最高为51.35 U/m L,是优化前的2.74倍.(本文来源于《上海大学学报(自然科学版)》期刊2015年02期）
杨汝剑[2]（2014）在《产原果胶酶青霉菌Y702的发酵优化与内切聚阿拉伯糖酶的克隆表达》一文中研究指出原果胶酶是一类能够将原果胶聚合物进行有限水解产生可溶性果胶的酶类。本研究中,从果园土壤中筛选得到一株产原果胶酶的青霉菌Penicillium sp. Y702,通过单因素实验、Plackett-Burman实验筛选以及Box-Behnken Design响应面实验设计的方法对Penicillium sp. Y702产原果胶酶进行了发酵优化,得出最佳的发酵培养基：NaNO32g/1, MgSO4·7H2O0.3g/l, K2HPO4·3H2O0.15g/l, KCl0.5g/l, MgSO4·7H2O0.5g/l, FeSO4·7H2O0.01g/l, CaCl20.01g/1和MnCl2·4H2O0.01g/1,在最佳条件下发酵培养基中PPase酶活达到205U/ml,与预测值较接近,比优化前提高了近两倍。内切聚阿拉伯糖酶属于B型原果胶酶,能作用于原果胶分子毛发区的阿拉伯聚糖,通过重迭PCR的方法从菌株Penicillium sp. Y702基因组中克隆出内切聚阿拉伯糖酶AbnC基因,并将其转化入毕赤酵母GS115中进行诱导表达。AbnC基因由963个核苷酸组成,可编码320个氨基酸,其中前21个氨基酸为AbnC酶的信号肽。AbnC酶属于糖苷水解酶43家族,其中Asp34、Asp148和Glu199高度保守,为AbnC酶的活性位点。通过阴离子交换色谱对重组表达的AbnC酶进行分离纯化得到单一的纯酶,纯化倍数提高了7.94倍,SDS-PAGE电泳验证蛋白分子量大小约为35kDa。对该酶的酶学性质进行研究发现,其最适反应pH和最适温度分别为5.0和50℃,pH稳定性和温度稳定性范围分别为pH5.0-7.0和45℃以下,这与报道的在大肠杆菌表达的AbnC酶的特性不同。对线性阿拉伯聚糖的Km和Vmax分别为24.8mg/ml和88.5U/mg,比酶活为20U/mg。此外,通过TLC和HPLC对AbnC的水解方式进行分析,证实了AbnC酶是一种内切型阿拉伯聚糖酶,且主要的水解产物为阿拉伯二糖和阿拉伯叁糖。通过51发酵罐进行补料分批发酵,AbnC酶活提高到1.03U/ml,比摇瓶水平提高了3倍。利用AbnC酶和ABFs酶协同作用水解苹果皮原果胶,每100mg原果胶可产生果胶量达1.9mg,表明酶的复配使用能够更好地发挥它们的酶解作用,这对天然植物多糖开发利用具有一定的指导意义。(本文来源于《华东理工大学》期刊2014-04-08）
陈佳[3]（2012）在《产原果胶酶菌株的筛选、发酵条件优化及基因的克隆和表达》一文中研究指出原果胶酶能够催化水不溶性的原果胶,并释放水溶性果胶；在工业上,原果胶酶可以用于果胶的提取。本研究主要从以下叁个方面开展：1、高产原果胶酶菌株的筛选。从果园土壤和腐烂的水果中筛选得到7株高产原果胶酶的菌株,取酶活最高(113.3U/ml)的一株进行接下来的研究。通过ITS5.8S rDNA对该菌株进行鉴定,该菌株和Aspergillus oryzae IC-A3的相似性为100%,将其命名为Aspergillus oryzae PO。2、对该菌株进行发酵条件的优化,首先通过单因素优化选择对产酶影响较显着的叁个因素(温度、NaNO3和苹果渣),之后用响应面的方法对该叁因素进一步优化,经优化后酶活最高达270.0U/ml,比优化前提高2.38倍。3、经测定,该原果胶酶含有聚半乳糖醛酸酶和聚阿拉伯糖苷酶活性。将聚半乳糖醛酸酶的基因克隆,并在Pichia pastoris GS115中进行表达,表达后酶活高达1674U/ml,比野生菌高558倍；表达量为0.418mg/ml;用阴离子交换柱进行一步纯化,收率和纯化倍数分别为87.14%和1.31倍,酶的比活为7519.54U/mg；对该酶的酶学性质进行研究,最适pH和温度分别为5.0和45℃,Mg2+能够促进酶活,Ca2+, Ni2+, Mn2+、Cu2+和十二烷基硫酸钠能够强烈的抑制酶的活性,吐温20、60和80对酶活基本没有影响；对聚半乳糖醛酸的Km和Vmax值分别为5.59mg/ml和1.01μmol·(min-ml)-1。(本文来源于《华东理工大学》期刊2012-12-17）
田亚红[4]（2012）在《产原果胶酶菌株的筛选及其产酶条件优化》一文中研究指出从土壤中筛选得到1株高产原果胶酶的菌株WJ-2,经初步鉴定为曲霉属(Aspergillus sp)。研究了菌种在不同初始pH值、温度、培养时间、接种量下的产酶情况并进行了产酶条件优化。通过单因素实验和正交实验确定了该菌株液体产酶的最佳条件:初始pH5.0、温度35℃、培养时间48h、接种量为10%,优化条件下的原果胶酶活力可达4545.235U/mL。(本文来源于《食品科技》期刊2012年06期）
孟浩[5]（2008）在《高产原果胶酶菌株的筛选鉴定及在桔皮果胶提取中的应用》一文中研究指出桔皮-桔子深加工等的副产物,是工业生产果胶的主要原料之一,其中含有约30%(与桔皮干重之比)左右的果胶。湖南作为全国柑桔主产省之一,全省柑桔年产量在150万吨左右,20%左右深加工成桔子罐头等产品,其余作为鲜果出售,大部分的桔皮没有很好的利用甚至没有得到利用,如果加以利用,变废为宝,将是一项很有意义的工作。本论文研究主要分为叁部分:1)发酵菌株的筛选与鉴定;2)微生物发酵法生产果胶发酵条件的优化;3)果胶的提取与精制;首先,从湖南常德市一倾倒腐烂柑桔的土坑中,取表层10cm以下土壤,筛选得到一株原果胶酶高产菌株并命名其为CD-01,其发酵产果胶的产率最高。其表型特征和黑曲霉相同,并且26S rRNA基因序列(554FR47D015)和黑曲霉(ATCC 64028)的相应片段序列相似度为100%,因此鉴定其为Aspergillus niger。其次,通过比较果胶酶活和原果胶酶酶活的大小,采用L_9(3~4)正交实验设计和方差分析对发酵生产果胶实验条件进行了优化,确定最佳发酵条件为:t=36h,T=35℃,pH=5,氮源为尿素。在以上条件下进行进一步的料液比进行优化,得到最佳料液比为1:15,果胶产率达到24.5%。最后,以果胶的产率为指标,对果胶的提取过程中乙醇的浓度进行了优化,得到最佳的乙醇浓度为70%。在此基础上,对发酵液中的果胶进行了提取和精制。精制的果胶符合果胶标准QB 2484—2000。另外,通过其红外光谱和标准果胶红外光谱的比较,确定该产品的主要成分为果胶。(本文来源于《中南大学》期刊2008-05-01）
刘战民,陆兆新,吕凤霞,别小妹,赵海珍[6]（2006）在《毕赤酵母工程菌原果胶酶的分离纯化》一文中研究指出采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法,对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化,测定了其分子质量,并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明,硫酸铵的饱和度为70%时,可以使原果胶酶的回收率达到71.9%,比活力为1 096.35 U/m g;经Sephadex G 75凝胶过滤,原果胶酶回收率达到57.6%,酶的比活力提高到3 762.40 U/m g;最佳离子交换条件为:0~0.5 m o l/L N aC l(缓冲体系为N oA c-HA c,pH 5.8)溶液线性洗脱、Sepharose F ast F low离子交换层析分离,在该条件下酶的比活力提高到9 743.20 U/m g,纯度为粗酶液的18.91倍,达到了电泳级;SDS-PAGE电泳结果表明,其分子质量为43.17 ku。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2006年01期）
刘战民,陆兆新,吕凤霞,别小妹,赵海珍[7]（2005）在《枯草芽孢杆菌产原果胶酶发酵条件研究》一文中研究指出原果胶酶(Protopectinase)是可以催化原果胶水解的酶类,广泛用于果胶生产、单细胞食品制备和棉织品的生化精炼之中。实验对影响枯草芽孢杆菌XZ2(BacillussubtilisXZ2)摇瓶发酵生产原果胶酶的相关因子:豆粕粉的水提时间、水提液浓度、磷酸盐浓度、金属离子、发酵培养基初始pH值、接种量和接种龄等采用单因素试验进行了研究,在单因素试验基础之上,选取pH、接种量、Mg2+、磷酸盐和转速等因素进行正交试验,结果表明发酵培养基初始pH和磷酸盐缓冲液浓度对产酶影响显着。当发酵初始pH7.5,接种量10%,MgSO4·7H2O0.04%,磷酸盐缓冲液浓度为0.20mol/L,摇床转速为120r/min的摇瓶发酵条件下,产酶酶活最高为16.71U/ml。(本文来源于《食品科学》期刊2005年10期）
张一青,陆兆新,邹晓葵[8]（2005）在《N~+离子注入对Aspergillus sp.产原果胶酶的诱变效应》一文中研究指出原果胶酶是一种具有广泛应用前景的工业酶类,为获得高活性原果胶酶的菌株,用能量为15keV、注量为20×2.6×1013—180×2.6×1013cm-2的N+注入原果胶酶产生菌黑曲霉Aspergillussp.XZ-131的成熟孢子,其存活率曲线为典型的“马鞍型”剂量-效应曲线。经筛选确定高产诱变菌株Z-25,经传代培养,高产性状稳定遗传。发酵过程中比原始菌株提前24h进入生长旺盛期,随后在稳定期期间大量产酶,发酵至72h时酶活性达到最高,比原始菌株提高了179%,每克干细胞性比原始菌株提高了84%。(本文来源于《辐射研究与辐射工艺学报》期刊2005年03期）
刘战民[9]（2005）在《原果胶酶在毕赤酵母中的表达、发酵优化及酶学性质研究》一文中研究指出原果胶酶是能水解不溶性果胶物质为可溶性果胶物质的一类酶。1978年Sakai等首次报道了酵母生产的原果胶酶，之后相继报道了细菌、酵母和霉菌中的原果胶酶的酶学性质及原果胶酶的应用。在中国，有关微生物原果胶酶的研究和应用技术还未见报道，原果胶酶基因在Pichia pastoris中表达的研究在国内外未见报道。本论文主要报道了产原果胶酶B.subtilis XZ2的筛选、原果胶酶基因在Pichia pastoris中克隆表达、重组原果胶酶的纯化和酶学性质等研究内容，研究的主要结果如下：1．通过对本研究室保藏的菌种进行筛选，获得了一株产原果胶酶的B.subtilis XZ2。以B.subtilis XZ2的基因组DNA为模板，PCR扩增得到原果胶酶基因。测序结果表明：B.subtilis原果胶酶基因全长1200bp，编码399个氨基酸，与GenBank中收录的B.subtilis的原果胶酶基因(GenBank Accession：X74880)相比较，有4个碱基发生了替换，其同源性为99.6％，编码的氨基酸序列同源性为99.5％，二者原果胶酶蛋白基因相应的氨基酸序列、氨基酸残基个数、位置几乎完全相同，仅有2个氨基酸不同。同时，替换的氨基酸不位于原果胶酶的两个保守区域。2．扩增的原果胶酶基因与毕赤酵母载体pPICZαA经限制性内切酶XhoⅠ和XbαⅠ双酶切，回收片段经T4 DNA ligase、16℃过夜连接，连接产物经CaCl_2转化E.coli DH5α，获得重组酵母表达载体pPICZαA-PPase。经限制性内切酶BstⅪ线性化的pPICZαA-PPase载体与酵母感受态细胞X-33在1500V，25μF，200Ω条件下电转化，经过100、200、400、800μg和1000μg/ml zeocin筛选和酵母基因组PCR鉴定，最终获得重组表达菌株X-33/pPICZαA-PPase。3．对影响X-33/pPICZαA-PPase表达原果胶酶的培养基、诱导时间、甲醇浓度、诱导前菌体生长量、诱导培养基pH以及PTM1添加量等因素进行了研究，结果显示在使用BMGY/mBMMY培养基、诱导环境pH6.0、0.006％PTM1、诱导前最佳菌体0D600为6-8、1％甲醇诱导、转速240r/min，30℃诱导培养96h，可以获得较好的表达水平；高密度发酵阶段，控制溶氧20％，氨水流加控制培养基pH 6.0，经过210h发酵培养菌体光密度超过了250，湿菌体达到了192g/L，蛋白含量为3.21g/L，原果胶酶活性达到最高240.2 U/ml。5．摇瓶发酵获得的原果胶酶粗酶液经过硫酸铵沉淀、Sephadex G75凝胶过滤和Sepharose Fast Flow离子交换层析分离，比活力分别提高为219.27 U/mg、752.48 U/mg、1948.64 U／mg，纯化倍数分别为2.13、7.31和18.91，最终获得的原果胶酶经SDS-PAGE电泳测定分子量为43.17 kDa。6．原果胶酶最适作用温度和pH分别50℃和7.0。在pH 3-10范围内，原果胶酶活性很稳定，热稳定性为50℃以下。金属离子对于原果胶酶活性抑制强弱顺序为Hg~(2+)＞Cu~(2+)＞Ba~(2+)＞Mn~(2+)，而Fe~(2+)和Mg~(2+)对该酶没有抑制作用。Ca~(2+)能够提高原果胶酶活性，当浓度为0.20 mM时，原果胶酶活性提高到原来的2.5倍左右，EDTA完全抑制原果胶酶活性。原果胶酶的Km为0.851 mg／ml，Vmax为0.445μmol／min。(本文来源于《南京农业大学》期刊2005-06-01）
张一青,陆兆新,尤华[10]（2005）在《原果胶酶提取桔柚皮中果胶的研究》一文中研究指出利用微生物原果胶酶酶法提取果胶,可克服工业酸法生产的诸多不足并得到质量稳定的果胶产品。将AspergillusspXZ-131菌株振荡培养3d,过滤得到原果胶酶粗酶液。将其处理桔柚皮,研究不同反应时间、温度、pH值、料液比对原果胶酶作用原果胶,释放果胶的影响。研究结果表明:最佳条件是25℃、pH3.0、料液比1:2和反应5h。在此反应条件下果胶产率达35.7%。(本文来源于《食品科学》期刊2005年01期）
原果胶酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
原果胶酶是一类能够将原果胶聚合物进行有限水解产生可溶性果胶的酶类。本研究中,从果园土壤中筛选得到一株产原果胶酶的青霉菌Penicillium sp. Y702,通过单因素实验、Plackett-Burman实验筛选以及Box-Behnken Design响应面实验设计的方法对Penicillium sp. Y702产原果胶酶进行了发酵优化,得出最佳的发酵培养基：NaNO32g/1, MgSO4·7H2O0.3g/l, K2HPO4·3H2O0.15g/l, KCl0.5g/l, MgSO4·7H2O0.5g/l, FeSO4·7H2O0.01g/l, CaCl20.01g/1和MnCl2·4H2O0.01g/1,在最佳条件下发酵培养基中PPase酶活达到205U/ml,与预测值较接近,比优化前提高了近两倍。内切聚阿拉伯糖酶属于B型原果胶酶,能作用于原果胶分子毛发区的阿拉伯聚糖,通过重迭PCR的方法从菌株Penicillium sp. Y702基因组中克隆出内切聚阿拉伯糖酶AbnC基因,并将其转化入毕赤酵母GS115中进行诱导表达。AbnC基因由963个核苷酸组成,可编码320个氨基酸,其中前21个氨基酸为AbnC酶的信号肽。AbnC酶属于糖苷水解酶43家族,其中Asp34、Asp148和Glu199高度保守,为AbnC酶的活性位点。通过阴离子交换色谱对重组表达的AbnC酶进行分离纯化得到单一的纯酶,纯化倍数提高了7.94倍,SDS-PAGE电泳验证蛋白分子量大小约为35kDa。对该酶的酶学性质进行研究发现,其最适反应pH和最适温度分别为5.0和50℃,pH稳定性和温度稳定性范围分别为pH5.0-7.0和45℃以下,这与报道的在大肠杆菌表达的AbnC酶的特性不同。对线性阿拉伯聚糖的Km和Vmax分别为24.8mg/ml和88.5U/mg,比酶活为20U/mg。此外,通过TLC和HPLC对AbnC的水解方式进行分析,证实了AbnC酶是一种内切型阿拉伯聚糖酶,且主要的水解产物为阿拉伯二糖和阿拉伯叁糖。通过51发酵罐进行补料分批发酵,AbnC酶活提高到1.03U/ml,比摇瓶水平提高了3倍。利用AbnC酶和ABFs酶协同作用水解苹果皮原果胶,每100mg原果胶可产生果胶量达1.9mg,表明酶的复配使用能够更好地发挥它们的酶解作用,这对天然植物多糖开发利用具有一定的指导意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原果胶酶论文参考文献
[1].赵志强,刘战民,姚立峰.产原果胶酶菌株X4的鉴定及其培养基的优化[J].上海大学学报(自然科学版).2015
[2].杨汝剑.产原果胶酶青霉菌Y702的发酵优化与内切聚阿拉伯糖酶的克隆表达[D].华东理工大学.2014
[3].陈佳.产原果胶酶菌株的筛选、发酵条件优化及基因的克隆和表达[D].华东理工大学.2012
[4].田亚红.产原果胶酶菌株的筛选及其产酶条件优化[J].食品科技.2012
[5].孟浩.高产原果胶酶菌株的筛选鉴定及在桔皮果胶提取中的应用[D].中南大学.2008
[6].刘战民,陆兆新,吕凤霞,别小妹,赵海珍.毕赤酵母工程菌原果胶酶的分离纯化[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2006
[7].刘战民,陆兆新,吕凤霞,别小妹,赵海珍.枯草芽孢杆菌产原果胶酶发酵条件研究[J].食品科学.2005
[8].张一青,陆兆新,邹晓葵.N~+离子注入对Aspergillussp.产原果胶酶的诱变效应[J].辐射研究与辐射工艺学报.2005
[9].刘战民.原果胶酶在毕赤酵母中的表达、发酵优化及酶学性质研究[D].南京农业大学.2005
[10].张一青,陆兆新,尤华.原果胶酶提取桔柚皮中果胶的研究[J].食品科学.2005
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