导读:本文包含了结合盒转运蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,腺苷,多态性,关节炎,磷酸,受体,胰岛素。
结合盒转运蛋白论文文献综述
赵珂,许瑞青[1](2019)在《性激素结合蛋白、胰岛素受体底物、葡萄糖转运蛋白表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用分析》一文中研究指出目的探讨妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中性激素结合球蛋白(SHBG)、胰岛素受体底物(IRS)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)的表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用,为临床诊治提供参考依据。方法收集2017年1月-2018年6月在南开医院产科定期产检,择期行剖宫产手术的单胎足月孕妇,其中妊娠期糖尿病孕妇120例为妊娠期糖尿病组,糖代谢正常孕妇120例为正常对照组。应用实时PCR (qPCR)和Western blot技术检测两组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1、GLUT3、GLUT4 mRNA和蛋白的表达水平,并分析各指标间的相关性。结果妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-1、GLUT1 mRNA表达水平差异无统计学意义(均P>0. 05)。妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、GLUT3、GLUT4蛋白表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1蛋白表达水平差异无统计学意义(均P>0. 05)。Pearson分析显示,SHBG与IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-1与PI3K-p85β、GLUT3 mRNA表达呈负相关。SHBG与IRS-2、GLUT3、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-1与GLUT3蛋白表达呈负相关。结论妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中SHBG、IRS及GLUT表达异常; SHBG浓度降低可能通过影响胰岛素信号传导通路导致胎盘葡萄糖利用障碍,最终引发妊娠期糖尿病。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2019年12期)
徐牵[2](2019)在《肺炎链球菌ABC转运蛋白Spr1677-78和胆碱结合蛋白CbpJ的结构和功能初探》一文中研究指出(Ⅰ)肺炎链球菌ABC转运蛋白Spr1677-78的结构初探和底物筛选利用相容性溶质对渗透压进行调节以抵抗细胞水分流失在原核、真核细胞和古细菌中都非常保守。因此,相容性溶质的积累对于细胞抵御外界渗透压的骤变至关重要。Spr1677-78可能是肺炎链球菌中负责转运相容性溶质的ABC转运蛋白。其中,Spr1677是具有跨膜结构域和C端底物结合结构域的膜蛋白,Spr1678是位于胞内的ATP水解酶。在结构方面,我们筛选出最适合于Spr1677-78复合物的去垢剂DDM和LMNG,并利用冷冻电镜手段确定了Spr1677-78最合适的Nanodisc组装条件。同时,通过分析Spr1677柔性区域的长度和二级结构,我们构建了多个截短版本并筛选出了最优版本用于后续的结构研究。在功能方面,我们通过基因敲除结合表型微阵列实验筛选出了Spr1677-78可能的底物小分子。虽然进一步的生化实验并未检测出Spr1677-78的底物结合结构域与这些小分子的结合,但是它们很可能与Spr1677-78的生理转运底物具有相似的核心结构。此外,我们还克隆表达以及纯化了与Spr1677-78位于同一操纵子的另外一个未知功能蛋白Spr1679,并对它的结构进行了初步的研究。这个蛋白可能与转运蛋白Spr1677-78的功能密不可分。(Ⅱ)肺炎链球菌胆碱结合蛋白CbpJ的功能研究肺炎链球菌主要有叁类表面蛋白,即脂蛋白、携带LPXTG共有序列的蛋白和胆碱结合蛋白。胆碱结合蛋白一般至少由两种结构域组成:N端的功能结构域和C端的高度保守的胆碱结合结构域。其中,胆碱结合结构域可以通过非共价相互作用,将胆碱结合蛋白锚定在细胞壁的磷酸胆碱分子上。前人的研究表明CbpJ(SP_0378)可能是一种粘附蛋白。为了验证其功能,我们构建了肺炎链球菌TIGR4的cbpJ基因敲除菌株,发现cbpJ敲除菌株丧失了90%的粘附能力。我们进一步发现CbpJ的N-domain(潜在的功能结构域)缺失突变菌株仍然保留约70%的粘附活性,而C-domain(胆碱结合结构域)缺失突变菌株则丧失90%的粘附活性,这表明CbpJ的N末端虽然参与肺炎球菌对呼吸道上皮细胞的粘附,但并不是不可缺少的。我们的研究表明CbpJ蛋白的胆碱结合结构域对于肺炎链球菌的粘附是不可或缺的。这项工作加深了我们对肺炎链球菌表面蛋白的理解,为药物设计提供了潜在的新靶标。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2019-05-01)
文钟,青玉凤,周京国,谢文光,易婷[3](2019)在《原发性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2变化情况及其意义研究》一文中研究指出背景痛风不断攀升的高发病率已经成为重大的公共健康问题。叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)在尿酸代谢中的重要作用已经得到广泛关注,成为近年来研究的热点。因此,针对ABCG2的研究有利于发现痛风发病的分子生物学机制,为痛风的诊断、治疗提供新的思路。目的观察原发性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞(PBMCs) ABCG2表达水平的变化情况,探究ABCG2在原发性痛风性关节炎中可能的作用。方法选取2016年6月—2017年2月于川北医学院附属医院风湿免疫科门诊就诊及住院的男性原发性痛风性关节炎患者(GA组)82例,其中急性期痛风(AGA亚组)和间歇期痛风(IGA亚组)患者各41例。依据患者血尿酸水平进一步分为血尿酸<420μmol/L痛风亚组(NUA亚组)31例、血尿酸≥420μmol/L痛风亚组(HUA亚组)51例。另选取同期川北医学院附属医院体检中心的男性健康体检者(HC组)46例。检测患者血尿酸水平、肌酐水平、胱抑素C(Cys-C)水平、红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;采用RT-qPCR、Western blotting法分别检测受试者PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平。结果 GA组PBMCs ABCG2 mRNA表达水平高于HC组(P<0.05)。IGA亚组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平高于AGA亚组(P<0.05);HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平低于IGA亚组(P<0.05);AGA亚组与HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HUA亚组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平高于NUA亚组(P<0.05);HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平低于HUA亚组(P<0.05);NUA亚组与HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。男性原发性痛风性关节炎患者ABCG2 mRNA表达水平与血尿酸水平呈正相关(r=0.235,P=0.033),与肌酐水平、Cys-C水平呈负相关(r值分别为-0.227、-0.229,P值分别为0.044和0.043),与ESR、hs-CRP水平无直线相关关系(r值分别为-0.181、0.027,P值分别为0.112、0.824)。结论 ABCG2在原发性痛风性关节炎患者PBMCs中高表达,并参与尿酸的转运,但未发现其与原发性痛风性关节炎的炎症过程相关;且肾功能异常的原发性痛风性关节炎患者的PBMCs ABCG2表达下调。(本文来源于《中国全科医学》期刊2019年15期)
梁洁[4](2019)在《ATP结合盒转运蛋白在胶原诱导关节炎模型鼠的差异表达及其与血清炎性细胞因子的相关性研究》一文中研究指出目的:通过比较ATP结合盒转运蛋白家族耐药相关蛋白P-gp,BCRP,MRP1和炎性细胞因子IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-ɑ,IL-17在不同病变程度(collagen-induced arthritis,CIA)模型鼠的差异表达,探讨炎性细胞因子与ABC转运蛋白表达调控的相关性。方法:建立Ⅱ型胶原诱导的小鼠CIA模型,将造模成功的14只小鼠于初次免疫后7周处死取材。根据滑膜病理评分将CIA组分为轻度病变组、中重度病变组,选取4只健康小鼠作为正常对照组。采用反转录(RT)-PCR检测脾淋巴细胞中的P-gp,BCRP,MRP1的mRNA表达水平。通过CBA技术检测血清中IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-ɑ,IL-17的水平。进一步分析不同炎性细胞因子与耐药蛋白的相关性及其浓度依赖性,选出最具相关性的蛋白进行关节滑膜免疫组化定位分析。结果:1.叁组IL-6相比,中重度CIA组[45.03(38.87,64.02)]明显高于轻度CIA组[25.31(15.15,29.27)]、健康对照组[7.75(5.14,9.17)],(Z=14.383,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,有统计学差异(Z=-7,P<0.05);叁组TNF-α相比,相较于健康对照组[22.81(20.84,28.17)],轻度CIA组[45.00(32.76,58.51)]、中重度[45.00(39.78,58.95)]CIA组均升高(Z=8.375,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,无明显差异(Z=-0.381,P>0.05)。IL-1β,IL-2,IL-10,IL-17水平在叁组间均无明显差异。2.脾淋巴细胞叁种耐药蛋白的mRNA表达水平:叁组MRP1 mRNA比较,中重度CIA组[2.07(1.77,2.22)]明显高于轻度CIA组[1.32(1.08,1.49)]、健康对照组[1.08(0.65,1.30)],(Z=12.634,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,有统计学差异(Z=-2.582,P<0.05)。P-gp,BCRP的mRNA无统计学差异。MRP1与P-gp有相关性(r=0.635,P=0.015)。3.MRP1 mRNA的表达与IL-6有相关性,且呈正相关(r=0.711,P=0.004)。4.不同水平IL-6组MRP1 mRNA的表达:健康对照组、低水平IL-6组、高水平IL-6组的MRP1表达分别是:1.08(0.65,1.30),1.40(1.13,2.07),1.90(1.68,2.17),MRP1的表达与IL-6有一定浓度依赖性。5.与健康对照组相比,轻度CIA组踝关节滑膜组织细胞胞质/胞膜呈淡黄色,即弱阳性;中重度CIA组踝关节滑膜组织细胞胞质/胞膜呈棕黄色,即强阳性。结论:在CIA关节炎模型中,ABC转运蛋白家族中MRP1表达与滑膜病变严重程度相关,且其与血清中炎性因子IL-6水平高度相关。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-03-12)
倪英群,方朝晖[5](2018)在《基于气机理论研究针刺对糖尿病大鼠胰岛素受体结合率及葡萄糖转运蛋白4表达的影响》一文中研究指出目的:运用气机理论选穴,研究针刺对糖尿病大鼠胰岛素受体结合率及葡萄糖转运蛋白4(GULT4)表达的影响。方法:雄性清洁级SD大鼠70只,随机抽取20只为正常组,其余单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)复制糖尿病大鼠模型,造模成功共44只,随机分为两组:模型组与针刺组,各22只。针刺组针刺双侧天枢、双侧足叁里、百会、双侧涌泉,15min/次,1次/d,治疗6d休息1d,疗程6周。治疗6周后,ELISA法检测大鼠血清胰岛素;Kilp法制备肝脏及腓肠肌细胞膜,Nishimura方法测定胰岛素结合率;RT-PCR检测大鼠骨骼肌组织GULT4基因表达。结果:与正常组比较,模型组FPG、2h PG、FINS、IRI均升高,胰岛素结合率、腓肠肌GLUT4蛋白及GLUT4 mRNA的表达水平明显降低(P<0.05);治疗后,针刺组与模型组比较,FPG、2h PG、FINS、IRI均明显降低,胰岛素结合率、GLUT4蛋白及GLUT4 mRNA的表达水平显着升高(P<0.05)。结论:针刺天枢、足叁里、百会、涌泉,可以降低糖尿病大鼠的血糖及胰岛素水平,提高胰岛素受体结合率,在分子水平上影响GLUT4的表达。也为进一步研究"升阳(气)抑阳(热)"治法,为开拓气机理论在糖尿病的防治应用提供实验数据支持。(本文来源于《中华中医药杂志》期刊2018年07期)
蔡晖,王永强[6](2018)在《ATP结合盒转运蛋白A1多态性与汉族人群原发性开角型青光眼易感性的关联研究》一文中研究指出目的分析ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)基因多态性与原发性开角型青光眼(POAG)易感性的关系。方法选取本院100例POAG患者(实验组)与100例正常健康人(对照组),采集静脉血并提取血液DNA,使用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序检测ABCA1基因rs363717和rs914545位点多态性,并比较不同基因型与POAG患病风险的关系。结果两组中ABCA1基因在rs363717和rs914545位点的基因型分布符合哈迪-温伯格定律。rs363717位点中,两组的基因型频率分布无统计学差异(P>0.05),但等位基因频率分布具有统计学差异(P<0.05)。rs914545位点中,两组的基因型频率及等位基因频率分均有统计学差异(P<0.05)。两组中ABCA1基因多态性单倍型分析发现,CGT单倍型携带者患POAG的风险较大。结论 ABCA1基因多态性与POAG的患病风险存在一定的关联,CGT单倍型携带者患POAG的风险较大,其中rs914545位点基因平衡可能是患病风险增加的主要原因。(本文来源于《临床眼科杂志》期刊2018年03期)
王聪,刘守胜,廖宋龄,岳海燕,辛永宁[7](2018)在《青岛地区部分汉族人群叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的相关性》一文中研究指出目的探讨青岛地区部分汉族人群叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ATP binding cassette subfamily A member 1,ABCA1)基因多态性与非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的相关性。方法选取2015年11月至2017年8月于青岛市市立医院治疗的265例NAFLD患者为NAFLD组,126例健康者为对照组。采用常规方法检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transferase,γ-GGT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、血糖(glucose,Glu)、甘油叁酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)和高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)等指标,采用多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和飞行质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测ABCA1基因rs2515629和rs4149341位点的基因型,比较各组研究对象上述各指标的差异。结果 NAFLD组与对照组ABCA1 rs2515629位点和rs4149341位点等位基因频率及基因型频率分布差异均无统计学意义(P均>0.05)。经混杂因素校正后,Logisitic回归模型分析显示两位点突变等位基因未增加NAFLD的发生风险。对于rs4149341位点,在全部样本中,携带C等位基因者与携带T等位基因者相比,收缩压和舒张压差异有统计学意义(P<0.05),在健康对照组中,携带rs4149341 C等位基因者碱性磷酸酶水平更高(t=1.983,P=0.049)。结论青岛地区部分汉族人群ABCA1rs2515629和rs4149341的基因多态性未增加NAFLD的患病风险。(本文来源于《中国肝脏病杂志(电子版)》期刊2018年02期)
文钟[8](2018)在《叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2的基因多态性及表达研究》一文中研究指出第一部分叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2 rs2231142(C>A)多态性在川东北汉族痛风人群的研究目的:分析叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)基因rs2231142(C>A)多态性不同基因型及等位基因在川东北汉族人群的分布频率并比较差异,探讨该多态性与痛风发病的相关性。方法:(1)收集169例原发性痛风性关节炎患者及193例健康体检者的外周血及临床资料;(2)对痛风组中临床资料齐全的119例痛风患者按照有无痛风石分为:有痛风石痛风组14例与无痛风石痛风组105例;以40岁为界,按照痛风发病早晚,分为早发性痛风组(<40岁)52例和晚发性痛风组(≥40岁)67例;(3)采用TaqMan○R探针法实时荧光定量PCR检测受试者的基因型。(4)采用SPSS 22.0软件包进行统计分析。组间差异采用χ2检验,并计算相关优势比(odds ratio,OR)及95%置信区间(95%confidenve interval,95%CI);以P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)所有受试者分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。(2)AA基因型在痛风组分布频率显着高于对照组[36.1%,5.7%;P<0.01;OR=9.345,95%CI(4.712,18.534)],CA基因型在痛风组分布频率显着高于对照组[45.0%,32.6%;P<0.05;OR=1.686,95%CI(1.100,2.585)],CC基因型在痛风组分布频率显着低于对照组[18.9%,61.7%;P<0.01;OR=0.145,95%CI(0.090,0.235)]。A等位基因与C等位基因在痛风组与对照组比较,差异有统计学意义[58.6%,22.0%;41.4%,78.0%;P<0.001;OR=5.008,95%CI(3.623,6.923)]。(3)AA基因型在有痛风石痛风组分布频率显着高于无痛风石痛风组[71.4%,33.3%;P<0.01;OR=5.000,95%CI(1.464,17.080)],CA基因型及CC基因型在有痛风石痛风组与无痛风石痛风组分布频率无统计学差异(P均>0.05)。A等位基因与C等位基因在有痛风石痛风组与无痛风石痛风组分布频率比较,差异有统计学意义[85.7%,57.1%;14.3%,42.9%;P=0.004;OR=4.500,95%CI(1.508,13.427)]。(4)AA基因型在早发性痛风组分布频率显着高于晚发性痛风组[51.9%,26.9%;P<0.01;OR=20.622,95%CI(9.728,43.716)]。CA基因型在早发性痛风组分布频率显着低于晚发性痛风组[32.7%,53.7%;P<0.05;OR=0.418,95%CI(0.197,0.888)]。CC基因型在早发性痛风组与晚发性痛风组分布频率无统计学差异(P>0.05)。A等位基因与C等位基因在有早发性痛风组与晚发性痛风组分布频率比较,差异有统计学意义[66.4%,53.7%;33.6%,46.3%;P=0.047;OR=1.698,95%CI(1.004,2.872)]。结论:ABCG2 rs2231142(C>A)的多态性可能与我国川东北地区汉族人群原发性痛风的发病相关。携带A等位基因的AA基因型、CA基因型个体更易诱发痛风,而CC基因型、C等位基因则可能对痛风的发病具有保护作用。亚组分析提示AA基因型的个体更易发生痛风石并增加早发性痛风的发病风险,C等位基因则可能对痛风石的形成具有保护作用,CA基因型、C等位基因则降低了早发性痛风发病风险。第二部分叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2在原发性痛风患者外周血单个核细胞的表达变化及其意义研究目的:检测原发性痛风性关节炎(Gouty arthritis,GA)患者和健康体检者(healthy control,HC)外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)的转录水平及蛋白水平并比较差异,探讨ABCG2在GA发病中可能的作用。方法:(1)收集82例GA及46例HC外周血、临床及实验室资料;(2)根据痛风患者临床症状分为急性痛风性关节炎41例(AGA组)、间歇期痛风性关节炎41例(IGA组);根据血尿酸(s UA)将以上痛风患者分为UA<420μmol/L痛风组(NUA组)31例、UA>420μmol/L痛风组(HUA组)51例;(3)采用RT-q PCR和Western blot技术分别检测PBMCs中ABCG2 m RNA及蛋白表达水平;(4)采用SPSS 22.0软件包进行统计分析。检测组间差异采用独立样本T检验、单方差分析或秩和检验,采用Spearman进行相关分析;以P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)ABCG2在PBMCs的m RNA、蛋白水平在IGA组均显着高于AGA组(P<0.05,P<0.01)与HC组(P<0.01,P<0.05),AGA组与HC组差异无统计学意义(P均>0.05)。(2)PBMCs ABCG2 m RNA表达水平与蛋白水平在HUA组均显着高于NUA组(P均<0.01)与HC组(P<0.01,P<0.05),而在NUA与HC组间差异无统计学意义(P均>0.05);(3)PBMCs的ABCG2 m RNA水平与s UA呈正相关(r=0.235,P<0.05),与肌酐(r=-0.227,P<0.05)呈负相关,与血沉(r=-0.181,P>0.05)、超敏C反应蛋白(r=0.027,P>0.05)无相关性。(4)GA组和HC组在年龄构成比上差异无统计学意义(P>0.05),GA组WBC、中性粒细胞(GR)、单核细胞(Mo)、TG、TC、LDL、s UA、GLU、肌酐及hs CRP均显着高于HC组(P均<0.05),而HDL则显着低于HC组(P<0.01)。结论:(1)ABCG2在PBMCs中表达并参与尿酸的转运,未发现与痛风的炎症相关;(2)ABCG2与肌酐呈负相关,提示存在肾功能异常痛风患者,可能会下调ABCG2在PBMCs的表达,这可能有利于肾脏的保护,其具体机制还需进一步研究。(3)痛风患者比正常人群更易发生血脂、血糖及肾功能异常。痛风患者血脂改变与动脉粥样硬化患者血脂改变相似,可能会加速动脉粥样硬化及心、脑血管疾病的发生。(本文来源于《川北医学院》期刊2018-05-01)
罗永莉[9](2018)在《犬弓首蛔虫腺苷叁磷酸结合盒G5转运蛋白的原核表达、分布及功能研究》一文中研究指出弓首蛔虫病(Toxocariasis)主要是由犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)寄生于犬的小肠而引起的一种人兽共患寄生虫病。人和多种动物可通过摄入犬弓首蛔虫的感染性虫卵或者感染性幼虫而感染。T.canis的感染性幼虫在终末宿主的小肠内发育为成虫,在非特异性宿主体内不能发育为成虫,而是穿过肠壁并迁移到各种组织中,造成弓首蛔虫病。人感染后,幼虫移行到身体的各个器官和组织中,引起内脏幼虫移行症(visceral larva migrans,VLM)、眼睛幼虫移行症(ocular larve migrans,OLM)、神经弓首蛔虫病(neurological toxocariasis,NT)和隐性弓首蛔虫病(covert toxocariasis,CT),造成各组织和器官的损害,严重影响人类的健康。腺苷叁磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporters,ABC转运蛋白)是一类以ATP为驱动能的跨膜糖蛋白,负责转运内源性和异源性的生物大分子及小分子化合物包括糖、氨基酸、多肽、细胞代谢产物、金属离子、和药物等。ABC转运蛋白在维持机体渗透压稳定、营养吸收、多药耐药、抗原加工、细胞分裂、孢子形成、繁殖等多种生物学过程中发挥重要作用。该蛋白已在恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、日本血吸虫(Schistosoma japonicum)和秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)等多种原虫和蠕虫中进行了广泛的研究,但是对犬弓首蛔虫ABC转运蛋白的研究还未见报道。本研究克隆了犬弓首蛔虫腺苷叁磷酸结合盒G5基因(Tc-abcg-5基因),对犬弓首蛔虫腺苷叁磷酸结合盒G5蛋白(TcABCG5)的组织分布情况进行了研究,并利用RNA干扰技术对Tc-abcg-5的功能进行了探讨,试验结果总结如下:1.Tc-abcg-5基因的克隆及序列分析本研究以T.canis总RNA为模板,克隆了Tc-abcg-5基因的完整编码区(coding sequence,CDS)序列并进行序列分析。结果显示Tc-abcg-5基因的序列长度为1902bp,预测编码633个氨基酸,编码蛋白质为TcABCG5,理论分子量为71.42 kDa,等电点为8.07。功能结构域分析显示,TcABCG5蛋白包含1个ABC转运蛋白结构域(第43-188位)和6个跨膜区(分别位于第350-372位,第387-409位,第422-453位,第468-490位,第497-514位,第600-622位)。亲疏水性分析表明,TcABCG5蛋白为疏水性蛋白。信号肽预测TcABCG5为非分泌型蛋白。多重序列分析表明TcABCG5的氨基酸序列与秀丽隐杆线虫(C.elegans)、猪蛔虫(Ascaris suum)、捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)、魏氏棘唇线虫(Acanthocheilonema viteae)和单一异尖线虫(Anisakis simplex)的ABCG5氨基酸序列在Walker A和Walker B模体处高度保守。系统发育分析表明Tc-abcg-5编码的氨基酸序列与猪蛔虫(A.suum)的ABCG5位于同一分支,其进化关系较近,与人(Homo sapiens)、牛(Bos taurus)、绵羊(Ovis aries)、白眉猴(Cercocebus atys)、褐家鼠(Rattus norvegicus)、布氏鼠耳蝠(Myotis brandtii)等哺乳动物的进化关系较远。生物学功能预测显示,TcABCG5具有广泛的底物结合功能,参与内源性和异源性的生物大分子及小分子化合物的转运。2.TcABCG5的原核表达及多克隆抗体的制备本研究克隆了Tc-abcg-5基因的ABC转运蛋白结构域,构建了Tc-abcg-5/pET28a(+)原核表达载体,测序结果显示插入pET28a(+)载体中的序列长度为794 bp。重组质粒转化Transetta(DE3)大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞后,含有Tc-abcg-5/pET28a重组质粒的阳性菌在IPTG诱导下以包涵体形式表达TcABCG5重组蛋白,蛋白大小约为30 kDa。对诱导表达条件进行优化,最优的表达条件为0.8 mM的IPTG诱导,30℃培养12 h。通过镍离子亲和层析介质(Ni-NTA)对目的蛋白进行纯化,并用此蛋白制备了兔抗TcABCG5多克隆抗体。经检测,制备的多克隆抗体的浓度为0.86 mg/mL,抗体效价为1:512000左右,纯度在90%以上。蛋白质印记(Western Blot)显示制备的TcABCG5多克隆抗体与TcABCG5蛋白特异性结合,表明制备的兔抗TcABCG5多克隆抗体的特异性较好。3.Tc-abcg-5的差异表达及TcABCG5的组织定位研究采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术对Tc-abcg-5在T.canis雌、雄虫以及雌虫各组织中的转录情况进行了分析。结果表明Tc-abcg-5基因在雌虫中的转录水平较高,特别是雌虫的生殖道中高量表达,而在肠道和体壁中的转录水平较低。采用间接荧光免疫组织化学技术(indirect fluorescence immunohistochemical analysis)对TcABCG5在雌、雄虫各组织中的分布情况进行了研究,结果显示TcABCG5主要分布在T.canis的生殖组织和肠道中,特别是在雌虫的卵巢、子宫和雄虫的储精囊中高表达,表明TcABCG5蛋白可能参与T.canis的生长、发育或繁殖等相关过程。4.Tc-abcg-5基因的RNA干扰研究采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术干扰T.canis成虫Tc-abcg-5基因的转录,利用qRT-PCR技术对Tc-abcg-5基因进行干扰后的分析。结果显示,干扰24 h、48 h后siRNA-744组Tc-abcg-5的相对表达量比siRNA-1024组和siRNA-466组显着性降低,表明siRNA-744有较高的沉默效率。随后采用电穿孔法和浸泡法对siRNA-744的递送效率进行比较,结果显示浸泡法更有利于将siRNA-744导入到T.canis虫卵内。用siRNA-744经浸泡法干扰T.canis感染性虫卵,经口灌服小鼠,感染后第七天对小鼠的肝脏、脑和肺脏组织进行病理学研究,结果显示RNA干扰使T.canis感染性虫卵的感染力下降,从而降低了肺脏、肝脏的病变程度,表明TcABCG5蛋白可能通过影响虫卵的发育从而参与T.canis的生长、发育过程。(本文来源于《西南大学》期刊2018-04-20)
郑秀妍,曾妍,沈西华,江滕,张丽平[10](2018)在《ATP结合盒转运蛋白A1、载脂蛋白AI和B类1型清道夫受体在口腔癌中的表达及意义》一文中研究指出目的 :越来越多的文献显示脂质代谢参与肿瘤的发生发展,但在口腔鳞癌的关系中尚未见报道,故本文拟通过检测脂质代谢转运相关蛋白ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)和载脂蛋白A(apolipoprotein A-I,Apo A I)及脂质代谢吸收蛋白B类1型清道夫受体(Scavenger receptor class B type I,SR-B1)在口腔鳞癌组织中的差异性表达,探讨脂质转运蛋白和吸收蛋白是否在口腔鳞癌中存在失衡表达,及其与临床病理参数之间的关系及意义。方法:收集石河子大学医学院第一附属医院2004-2016年有完整临床病理资料的口腔鳞癌患者24例及正常口腔黏膜患者35例,制备组织芯片2张,应用免疫组织化学检测ABCA1,Apo A I和SR-B1的表达水平,并结合患者临床病理特征进行分析。结果:(1)ABCA1蛋白在口腔鳞癌(37.50%,9/24)中较正常鳞状上皮(0%,0/25)高表达,差异具有统计学意义(χ2=11.484,P=0.001);Apo A I蛋白在两者之间均高表达(100%,24/24),SR-B1蛋白在两者中均不表达或低表达(0%,0/18),差异均无统计学意义;(2)在口腔鳞癌中ABCA1和SR-B1存在负相关(r=-0.452,P=0.003),Apo A I和SR-B1存在负相关(r=-1.000,P<0.01),ABCA1和Apo A I存在正相关(r=0.674,P<0.01);(3)ABCA1蛋白的表达与口腔鳞癌患者年龄相关,差异有统计学意义。结论:ABCA1蛋白的高表达可能参与了口腔鳞癌脂质代谢的失衡。(本文来源于《农垦医学》期刊2018年02期)
结合盒转运蛋白论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
(Ⅰ)肺炎链球菌ABC转运蛋白Spr1677-78的结构初探和底物筛选利用相容性溶质对渗透压进行调节以抵抗细胞水分流失在原核、真核细胞和古细菌中都非常保守。因此,相容性溶质的积累对于细胞抵御外界渗透压的骤变至关重要。Spr1677-78可能是肺炎链球菌中负责转运相容性溶质的ABC转运蛋白。其中,Spr1677是具有跨膜结构域和C端底物结合结构域的膜蛋白,Spr1678是位于胞内的ATP水解酶。在结构方面,我们筛选出最适合于Spr1677-78复合物的去垢剂DDM和LMNG,并利用冷冻电镜手段确定了Spr1677-78最合适的Nanodisc组装条件。同时,通过分析Spr1677柔性区域的长度和二级结构,我们构建了多个截短版本并筛选出了最优版本用于后续的结构研究。在功能方面,我们通过基因敲除结合表型微阵列实验筛选出了Spr1677-78可能的底物小分子。虽然进一步的生化实验并未检测出Spr1677-78的底物结合结构域与这些小分子的结合,但是它们很可能与Spr1677-78的生理转运底物具有相似的核心结构。此外,我们还克隆表达以及纯化了与Spr1677-78位于同一操纵子的另外一个未知功能蛋白Spr1679,并对它的结构进行了初步的研究。这个蛋白可能与转运蛋白Spr1677-78的功能密不可分。(Ⅱ)肺炎链球菌胆碱结合蛋白CbpJ的功能研究肺炎链球菌主要有叁类表面蛋白,即脂蛋白、携带LPXTG共有序列的蛋白和胆碱结合蛋白。胆碱结合蛋白一般至少由两种结构域组成:N端的功能结构域和C端的高度保守的胆碱结合结构域。其中,胆碱结合结构域可以通过非共价相互作用,将胆碱结合蛋白锚定在细胞壁的磷酸胆碱分子上。前人的研究表明CbpJ(SP_0378)可能是一种粘附蛋白。为了验证其功能,我们构建了肺炎链球菌TIGR4的cbpJ基因敲除菌株,发现cbpJ敲除菌株丧失了90%的粘附能力。我们进一步发现CbpJ的N-domain(潜在的功能结构域)缺失突变菌株仍然保留约70%的粘附活性,而C-domain(胆碱结合结构域)缺失突变菌株则丧失90%的粘附活性,这表明CbpJ的N末端虽然参与肺炎球菌对呼吸道上皮细胞的粘附,但并不是不可缺少的。我们的研究表明CbpJ蛋白的胆碱结合结构域对于肺炎链球菌的粘附是不可或缺的。这项工作加深了我们对肺炎链球菌表面蛋白的理解,为药物设计提供了潜在的新靶标。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
结合盒转运蛋白论文参考文献
[1].赵珂,许瑞青.性激素结合蛋白、胰岛素受体底物、葡萄糖转运蛋白表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用分析[J].中国妇幼保健.2019
[2].徐牵.肺炎链球菌ABC转运蛋白Spr1677-78和胆碱结合蛋白CbpJ的结构和功能初探[D].中国科学技术大学.2019
[3].文钟,青玉凤,周京国,谢文光,易婷.原发性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2变化情况及其意义研究[J].中国全科医学.2019
[4].梁洁.ATP结合盒转运蛋白在胶原诱导关节炎模型鼠的差异表达及其与血清炎性细胞因子的相关性研究[D].山西医科大学.2019
[5].倪英群,方朝晖.基于气机理论研究针刺对糖尿病大鼠胰岛素受体结合率及葡萄糖转运蛋白4表达的影响[J].中华中医药杂志.2018
[6].蔡晖,王永强.ATP结合盒转运蛋白A1多态性与汉族人群原发性开角型青光眼易感性的关联研究[J].临床眼科杂志.2018
[7].王聪,刘守胜,廖宋龄,岳海燕,辛永宁.青岛地区部分汉族人群叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的相关性[J].中国肝脏病杂志(电子版).2018
[8].文钟.叁磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2的基因多态性及表达研究[D].川北医学院.2018
[9].罗永莉.犬弓首蛔虫腺苷叁磷酸结合盒G5转运蛋白的原核表达、分布及功能研究[D].西南大学.2018
[10].郑秀妍,曾妍,沈西华,江滕,张丽平.ATP结合盒转运蛋白A1、载脂蛋白AI和B类1型清道夫受体在口腔癌中的表达及意义[J].农垦医学.2018