论文摘要
【背景】重组酿酒酵母可用于生产多种药用蛋白和工业酶等外源蛋白,但蛋白分泌水平低是限制其异源蛋白高效生产的重要因素。异源蛋白表达和分泌过程可能会对宿主细胞产生多种胁迫,因此,研究胁迫响应相关基因对重组酵母异源蛋白生产的影响具有重要意义。Mhf1p是MHF组蛋白折叠复合体的组分之一,与DNA损伤修复及维持基因组稳定性有关,但其对异源蛋白生产的作用尚不清楚。【目的】研究MHF1过表达对重组酿酒酵母蛋白生产的影响。【方法】在分泌表达纤维素酶的重组酿酒酵母菌株中利用基于CRISPR-Cas9的基因组编辑技术整合过表达MHF1,分析其对产酶的影响,并探讨影响产酶的分子机理。【结果】与出发菌株相比,过表达MHF1菌株的外切纤维素酶CBH酶活性提高了38%。对过表达MHF1的CBH生产菌株中蛋白合成和分泌途径相关基因转录水平进行检测,发现与对照菌株相比,CBH1基因和与分泌相关的SEC22、ERV29等基因在不同时间点呈现不同程度显著上调。【结论】MHF1过表达可促进酿酒酵母异源外切纤维素酶的生产,并影响外源酶基因和分泌途径基因的表达,可能通过对多基因的协同表达影响促进产酶。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 于欣水,曾钰,李洁,张明明,白凤武,赵心清
关键词: 酿酒酵母,异源蛋白生产,纤维素酶,全局代谢调控
来源: 微生物学通报 2019年01期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 大连理工大学生命科学与技术学院,上海交通大学生命科学技术学院
基金: 国家自然科学基金(31461143029,51561145014)~~
分类号: Q78;Q936
DOI: 10.13344/j.microbiol.china.180204
页码: 75-83
总页数: 9
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