内江市猪源大肠埃希菌抗菌药与消毒剂交叉耐药性研究

论文摘要

为了解内江市猪源大肠埃希菌对抗菌药与消毒剂的交叉耐药情况及交叉耐药机制。本试验以大肠埃希菌标准菌株（ATCC 25922）为质控菌,检测从内江市分离的66株猪源大肠埃希菌的耐药性,采用微量肉汤稀释法测定常用抗菌药恩诺沙星、土霉素和消毒剂苯扎溴铵、戊二醛对受试菌株的最小抑菌浓度（MIC）,进行耐药性检测,并筛选出对抗菌药和消毒剂均耐药的交叉耐药菌;PCR扩增标准菌株和交叉耐药菌的qacE△1、acrA、acrB和tolC基因,采用琼脂糖凝胶电泳检测基因携带和扩增情况,并对acrA、acrB和tolC基因进行测序,以标准菌株的acrA、acrB和tolC基因为参照,比对交叉耐药菌相应基因突变情况。结果显示,从内江市分离的66株猪源大肠埃希菌对恩诺沙星和土霉素完全耐药,对苯扎溴铵耐药的有3株,而所有菌株均对戊二醛敏感,即对抗菌药和消毒剂均耐药的交叉耐药菌有3株,编号分别为5、6、7号。在检测的3株交叉耐药菌中,仅6号菌检出qacE△1基因;基因序列比对结果显示,与标准菌株相比,交叉耐药菌的acrA、acrB和tolC基因碱基和氨基酸均有突变发生,碱基突变率最高的是7号菌的tolC基因（2.10%）,突变率最低的是7号菌的acrA基因（0.97%）;氨基酸突变率最高的为7号菌的acrB基因（2.39%）,突变率最低的是tolC基因,且3株菌突变率相同（均为0.22%）;3个基因有部分碱基或氨基酸有一致突变。所检测的内江市猪源大肠埃希菌对常用抗菌药恩诺沙星和土霉素耐药性严重,已有对抗菌药和消毒剂交叉耐药的菌株,且其交叉耐药的机制与外排泵AcrAB-TolC有相关性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株
•     1.1.2 主要试剂及仪器
•     1.1.3 药品配制
•   1.2 方法
•     1.2.1 多重耐药大肠埃希菌筛选
•       1.2.1.1 菌种复苏
•       1.2.1.2 微量肉汤稀释法测定MIC
•     1.2.2 耐药基因检测
•       1.2.2.1 引物设计与合成
•       1.2.2.2 耐药基因扩增及序列分析
• 2 结 果
•   2.1 MIC测定结果
•   2.2 PCR扩增结果
•   2.3 基因序列及相应氨基酸序列比对结果
•     2.3.1 碱基比对结果
•     2.3.2 氨基酸比对结果
• 3 讨 论
•   3.1 大肠埃希菌对抗菌药和消毒剂交叉耐药
•   3.2 大肠埃希菌交叉耐药与qacE△1基因的相关性
•   3.3 大肠埃希菌交叉耐药与AcrAB-TolC外排泵的相关性
• 4 结 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨文,陈红伟,曾杨梅,吴俊伟

关键词: 大肠埃希菌,消毒剂,抗菌药,交叉耐药性

来源: 中国畜牧兽医 2019年05期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 内江职业技术学院,西南大学动物科学学院,重庆布尔动物药业有限公司

基金: 国家自然科学基金“acrAB-tolC基因在大肠埃希菌对消毒剂苯扎溴铵和四环素类抗菌药物交叉耐药机制中的作用研究”(31372483),重庆市基础科学与前沿技术研究项目“粉防己甲素逆转细菌外排泵AcrAB-TolC外排耐药的分子机制初步研究”(cstc2017jcyjA0416)

分类号: S852.61

DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.05.029

页码: 1499-1507

总页数: 9

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