导读:本文包含了蚀斑克隆论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:鸡传染性法氏囊病毒,蚀斑,纯化,生物学特性
蚀斑克隆论文文献综述
揭鸿英,朱亚露,毕志香,赵阳,何家惠[1]（2018）在《鸡传染性法氏囊病毒蚀斑克隆纯化CV01株生物学特性研究》一文中研究指出通过蚀斑克隆技术,对野外分离的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)进行纯化后,筛选到1株病毒含量高、传代稳定的蚀斑纯化毒CV01株。生物学特性分析发现,IBDV能在鸡胚成纤维细胞(DF-1)上形成大小不同的蚀斑,且蚀斑大小与病毒的毒力有一定的相关性,大蚀斑的病毒含量高(108.0TCID50/m L以上),小蚀斑的病毒含量低(107.0l~108.0TCID50/m L)。蚀斑克隆VP2基因序列分析显示大蚀斑克隆毒具有IBDV超强毒株的特性。选病毒含量高(108.5TCID50/m L)的大蚀斑CV01进行进一步试验,结果发现CV01对10日龄SPF鸡胚的毒力达到106.7/0.2 m L以上,能致40%的30日龄SPF鸡感染。蚀斑克隆毒的免疫原性好,血清中和抗体水平高达15.6 log2,能100%抵抗超强毒株的攻击,表明该纯化株适合用于疫苗生产。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2018年02期）
徐静,姜艳平,唐丽杰,乔薪瑗,崔文[2]（2015）在《蚀斑克隆技术纯化猪传染性胃肠炎病毒分离株》一文中研究指出为了研究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)体外分离纯化方法,试验采用蚀斑技术对TGEV进行克隆纯化,建立了TGEV蚀斑形成方法,并利用该方法对含有TGEV的混合感染病毒进行3次克隆筛选,并对纯化后的病毒进行了一系列检测试验。结果表明:纯化后的病毒产生的蚀斑大小一致且RT-PCR检测TGEV阳性率为100%;对不同代次细胞毒进行RT-PCR检测结果均为阳性;间接免疫荧光试验中,病毒组有特异性荧光产生;直接负染法可看到典型的病毒结构,证明该克隆毒株在ST细胞上能够稳定增殖;纯化后的病毒效价有所提高。说明试验初步建立的TGEV蚀斑形成方法可用于分离毒基础生物学特性及病毒相关应用研究。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2015年23期）
肖长赏,凌红丽,朱绍辉,马凤燕,王雷[3]（2012）在《新城疫弱毒耐热B株蚀斑克隆纯化与免疫原性研究》一文中研究指出通过鸡胚终点稀释法与细胞蚀斑法纯化获得新城疫病毒克隆株(NDVB-Clone4株),结果显示,NDVB-Clone4株的免疫原性最好。原毒和鸡胚终点稀释法纯化毒滴鼻/点眼免疫1000EID50剂量组鸡10/10攻毒保护,而蚀斑纯化毒滴鼻/点眼免疫300EID50剂量组鸡10/10攻毒保护。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2012年02期）
王友令,杨金兴,袁小远,徐怀英,秦卓明[4]（2009）在《新城疫GM2分离株蚀斑克隆纯化及毒力测定》一文中研究指出新城疫(newcastle disease,ND)是世界公认的最重要的家禽疫病之一,伴随着NDV活疫苗的广泛使用,野外分离的新城疫病毒往往由多种强弱病毒混合而成。为了避免不同分离株干扰,必须通过蚀斑纯化将混杂在一起的不同NDV毒株区分开来。文章采用蚀斑纯化技术对野外分离毒新城疫GM2进行蚀斑纯化,并对蚀斑纯化前后病毒的生物学特性进行测定,结果显示,该分离毒蚀斑纯化前MDT,ICPI,IVPI分别为50.5,1.78,2.41,蚀斑纯化后MDT,ICPI,IVPI分别为47.5,1.89,2.65。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2009年06期）
温贵兰,龚新勇,瞿继红,李永明,周碧君[5]（2009）在《新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定》一文中研究指出2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株。利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株。其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、红色蚀斑。经RT-PCR检测,11株克隆毒株中6株为弱毒,形成蚀斑的大小在0.4～0.8mm之间;5株为强毒,形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm之间。结果表明:所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有一定的相关性。(本文来源于《中国家禽》期刊2009年01期）
杨素,黄青云,瘳明,任涛,沙才华[6]（2007）在《H5N1亚型禽流感病毒鸡胚分离株蚀斑克隆及生物学特性比较》一文中研究指出建立了H5N1亚型禽流感病毒(AIV)蚀斑克隆方法,用不加中性红的营养琼脂为覆盖层,在倒置显微镜下挑斑,对3株H5N1亚型AIV鸡胚分离毒株进行了蚀斑克隆纯化,从同一鸡胚分离毒株中纯化得到了蚀斑大小和形态均存在显着差异的毒株,共获得13株蚀斑克隆纯化株。研究结果表明,当小牛血清浓度为2%时,加入终浓度50μg/ml的胰酶可明显促进和刺激蚀斑的形成,蚀斑的直径和PFU/ml均有显着的增加。通过TCID50、EID50和LD50测定发现,来自同一鸡胚分离株的不同蚀斑克隆纯化株中,蚀斑大、毒力强的克隆毒株占优势,而且蚀斑较大的,其毒力也较强。对得到的13株蚀斑克隆毒株的全基因组各片段序列分析表明,蚀斑克隆纯化株在HA蛋白裂解位点附近的氨基酸序列均符合高致病性通报性禽流感病毒的分子特征。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2007年11期）
瞿继红[7]（2007）在《新城疫贵州不同分离株的蚀斑克隆与毒力鉴定》一文中研究指出新城疫(Newcastle Disease，ND)是由新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性禽类传染病，被世界动物卫生组织(OIE)定为A类传染病。目前国内对于新城疫的诊断，主要是采用传统的病原分离鉴定及血凝抑制(HI)等血清学试验，虽为大家所公认，但这些方法费时、费力。本文主要开展了RT-PCR技术检测新城疫病毒和鉴别新城疫强弱毒株的研究及蚀斑克隆技术纯化NDV，为我省对新城疫的快速准确诊断奠定了技术基础。1．应用RT-PCR试验，鉴定NDV及其强弱毒株采用有关文献设计合成的针对NDV F蛋白的3对引物，对15株NDV进行RT-PCR试验，鉴定NDV及其强弱毒株。叁对引物分别对15株NDV分离株进行鉴定，其结果与传统毒力测定结果一致，该方法可以用于ND的诊断和NDV强弱毒株的鉴定。为了将RT-PCR及上述引物应用于新城疫的临床诊断并推广，使之具有更广泛的应用价值，我们采用该方法对贵州的13例禽类送检病例进行鉴定。结果表明：RT-PCR可直接对病料进行检测，能在6h内确诊并区分NDV强弱毒株，其病毒检出率为15.38％(2／13)，与病毒分离率15.38％(2／13)完全相符。RT-PCR应用于临床诊断具有准确、快速的特点，克服了传统方法的不足。2．利用蚀斑克隆技术对ND毒株进行纯化对2株NDV贵州分离株(GN、ND_(99))及2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)进行挑斑纯化，结果得到12株克隆毒。经RT-PCR技术检测，7株为弱毒，形成蚀斑的大小在0.3～1.0mm；5株为强毒，其中4株形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm，1株为形成蚀斑的直径为0.4mm的红色蚀斑；在胰酶存在的情况下，低毒力和中等毒力的NDV在鸡胚成纤维细胞上都能形成蚀斑，所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有相关性。3．新城疫毒株毒力谱的构建通过传统毒力指数测定结果和针对HN蛋白单克隆抗体的分群研究，结合RT-PCR对NDV贵州分离株的鉴定，综合评价不同现场流行毒株的毒力，构建新城疫病毒分离物的毒力谱如下：F_(48)E_8＞FW＞BY＞H_2＞ND_(98)＞P_2＞P_1＞P_3＞L_2＞Ⅰ系＞GN＞Ⅱ系＞Ⅳ系＞ND_(99)＞ND_(89)(本文来源于《贵州大学》期刊2007-06-01）
何洪彬,夏咸柱,黄耕,范泉水,邱薇[8]（2000）在《犬瘟热病毒的蚀斑克隆试验》一文中研究指出对血清、胰酶以及染色时间等可能影响犬瘟热病毒蚀斑形成的条件进行了摸索。结果发现 ,对必须同步接毒的CDV小熊猫 (LP)株来讲 ,其形成蚀斑的最佳条件是 :同步接毒 10h后 ,加入血清含量为 2 %的无酚红的DMEM营养琼脂 ,第 5d时 ,加入 1/ 5体积的胰酶含量为 1/ 80 0 0的含中性红的DMEM营养琼脂染色 ,于第 6d时 ,便可形成蚀斑。挑选不同大小的蚀斑 ,克隆 3次后 ,获得了蚀斑直径为 0 .4～ 0 .6 ,0 .6～ 0 .8及 0 .7～ 0 .9mm的克隆株各一个(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2000年09期）
崔玉东[9]（1993）在《新城疫蚀斑克隆毒间抗原关系的研究》一文中研究指出用蚀斑克隆化技术对分离自黑龙江省不同地区免疫鸡群的新城疫病毒HN_7和HN_2株进行蚀斑纯化,获得了各自性状较为一致的叁种蚀斑克隆毒。对La Sota疫苗毒采用促蚀斑形成方法获得了性状稳定、一致的混浊小蚀斑。对叁种克隆毒之间以及和La Sota疫苗毒间做交叉蚀斑减数中和试验,探讨各病毒之间的抗原关系.结果表明.不同毒株的蚀斑类型及比例不同;来源于不同毒株的各蚀斑克隆毒间存在着抗原差异,来源于同一毒株的不同蚀斑克隆毒之间无明显抗原差异:叁种克隆毒和La Sota疫苗毒之间存在着程度不同的抗原差异。(本文来源于《中国畜禽传染病》期刊1993年01期）
蚀斑克隆论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)体外分离纯化方法,试验采用蚀斑技术对TGEV进行克隆纯化,建立了TGEV蚀斑形成方法,并利用该方法对含有TGEV的混合感染病毒进行3次克隆筛选,并对纯化后的病毒进行了一系列检测试验。结果表明:纯化后的病毒产生的蚀斑大小一致且RT-PCR检测TGEV阳性率为100%;对不同代次细胞毒进行RT-PCR检测结果均为阳性;间接免疫荧光试验中,病毒组有特异性荧光产生;直接负染法可看到典型的病毒结构,证明该克隆毒株在ST细胞上能够稳定增殖;纯化后的病毒效价有所提高。说明试验初步建立的TGEV蚀斑形成方法可用于分离毒基础生物学特性及病毒相关应用研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蚀斑克隆论文参考文献
[1].揭鸿英,朱亚露,毕志香,赵阳,何家惠.鸡传染性法氏囊病毒蚀斑克隆纯化CV01株生物学特性研究[J].畜牧与兽医.2018
[2].徐静,姜艳平,唐丽杰,乔薪瑗,崔文.蚀斑克隆技术纯化猪传染性胃肠炎病毒分离株[J].黑龙江畜牧兽医.2015
[3].肖长赏,凌红丽,朱绍辉,马凤燕,王雷.新城疫弱毒耐热B株蚀斑克隆纯化与免疫原性研究[J].中国动物检疫.2012
[4].王友令,杨金兴,袁小远,徐怀英,秦卓明.新城疫GM2分离株蚀斑克隆纯化及毒力测定[J].浙江农业学报.2009
[5].温贵兰,龚新勇,瞿继红,李永明,周碧君.新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定[J].中国家禽.2009
[6].杨素,黄青云,瘳明,任涛,沙才华.H5N1亚型禽流感病毒鸡胚分离株蚀斑克隆及生物学特性比较[J].中国畜牧兽医.2007
[7].瞿继红.新城疫贵州不同分离株的蚀斑克隆与毒力鉴定[D].贵州大学.2007
[8].何洪彬,夏咸柱,黄耕,范泉水,邱薇.犬瘟热病毒的蚀斑克隆试验[J].黑龙江畜牧兽医.2000
[9].崔玉东.新城疫蚀斑克隆毒间抗原关系的研究[J].中国畜禽传染病.1993