导读:本文包含了神经组织细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干细胞,神经,组织,基质,细胞,骨髓,纺丝。
神经组织细胞论文文献综述
穆冬慧,王亚婷,崔景彬,鄢文海[1]（2019）在《骨髓基质干细胞移植对脑缺血大鼠神经组织及功能的影响》一文中研究指出目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对脑缺血大鼠神经组织及功能的影响。方法选用24只SD大鼠制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,随机分为移植组、注射组、对照组,每组8只。局部给予移植组动物BMSCs,由尾静脉给予注射组动物BMSCs,对照组动物尾静脉注射等量生理盐水。采用5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记新生细胞。MCAO术后第7、14天,每组各处死4只动物,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经功能(处死前),取脑组织进行双标免疫组织化学染色,观察神经元样细胞和胶质细胞的生成情况。结果 MCAO术后第7、14天,移植组和注射组动物BrdU+NES双标阳性细胞均多于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。移植组动物术后第7、14天及注射组动物术后第7天BrdU+GFAP双标阳性细胞均少于对照组(均P<0.05)。术后第14天,移植组和注射组大鼠mNSS评分均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论局部移植或静脉给予MCAO后大鼠BMSCs,可减少胶质瘢痕的形成,增加神经元样细胞的生成,改善神经功能。(本文来源于《河南医学研究》期刊2019年18期）
钱磊,杨廷桐[2]（2019）在《创伤时阻断JAK/Stat3通路对大脑海马区神经组织细胞的影响》一文中研究指出目的探讨JAK/STAT通路对于创伤性脑缺血性的保护作用,为临床可能的基因治疗提供科学依据。方法45只wistar大鼠随机分为正常组(15只),创伤组(15只双下肢造成骨折)、干预组(15只,)创伤组和干预组分别在6h,48h,72h处死动物。取大鼠大脑海马区,一部分做常规病理切片,另一部分做qRT-PCR检测stat3mRNA,miR-21的基因表达。结果病理常规诊断:正常组,未见病理变化。创伤组,海马区神经细胞变性,染色不均,细胞变大,间质水肿。干预组,病理形态学变化较创伤组更加严重。qRT-PCR检测stat3,miR-21的表达显示,正常组,二者表达较低;创伤组,二者表达升高,在48h达到高峰,随后在72h下降。干预组二者表达均降低,在48h达到低谷,随后在72h逐渐的升高。二者呈正相关性(P<0.01)。结论创伤致脑组织缺氧时,stat3,miR-21表达升高起到了保护海马区神经细胞的作用,这一作用被AG490所阻断。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2019年05期）
王静[3]（2018）在《功能化纳米纤维对神经细胞行为的影响及用于神经组织工程的应用研究》一文中研究指出神经系统是机体内起主导作用的功能调节系统,具有复杂的结构和广泛的分布。而外周神经的损伤是临床上常见的问题,可由外伤创伤、神经退变、缺血缺氧、脱髓鞘等引发。神经一旦受到损伤,受其支配的器官的正常功能也会随之受到影响。如何促进受损周围神经的再生、恢复神经功能一直是医学界关注的热点。目前修复神经断裂和缺损的手段主要有手术缝合、自体或异体的神经移植等,但这些方法都具有一定的局限性。组织工程的出现为神经损伤的修复与再生提供了新的思路。利用组织工程技术构建组织工程化神经导管,引导神经细胞轴突的定向生长,提高神经纤维对合的精确度,从而取代自体或异体神经移植,修复周围神经损伤,己成为组织工程领域的研究热点之一。周围神经组织工程的核心内容是模拟周围神经的天然结构,构建一个理想的组织工程化神经导管支架。支架材料需要尽可能的仿生天然细胞外基质的结构和生物性能,为细胞组织提供最合适的生存环境。静电纺丝制备的纳米纤维能够从结构上很好的仿生天然细胞外基质而被广泛应用于各种组织工程支架的制备,在神经组织工程中也得到了广泛的应用。如何进一步制备更适合应用于神经组织修复与再生的静电纺纳米纤维支架具有重要的意义。基于周围神经损伤后的再生机制及再生过程可知,理想的神经损伤修复应该最大限度的发挥神经趋化性、神经营养性和接触引导叁者的作用。因此,理想的神经组织工程导管支架首先应该模拟天然的神经结构,增强雪旺细胞的迁移和引导再生轴突生长;其次还要具备诱导活性,诱导种子细胞的神经分化及原位神经元的突触再生和延伸,例如在支架中负载神经生长因子;再次应该具有导电性,可以在神经再生过程中传导电信号,从而加速神经再生;除此还应该具有合适的降解性能、匹配的力学性能等等。影响纳米纤维支架作为导管支架材料应用于神经组织工程的因素主要是纤维的物理特性与化学特性。其中物理特性方面主要包括纤维的表面形态、直径、取向性以及导电活性等;化学特性主要包括纤维携带的药物及活性因子与相应的降解产物。因此,本课题旨在通过功能化来提高静电纺纳米纤维的物理、化学特性,希望能增强静电纺纳米纤维支架在神经组织工程中的应用。本课题从理想的神经导管支架的要求及周围神经再生微环境的仿生出发,制备功能化的纳米纤维用于周围神经组织的修复与再生。课题的主要研究内容有以下几部分:(1)为了提高纤维支架的生物活性,在支架中负载生物活性分子是有效的手段之一。而已有的研究表明枸杞多糖(LBP)对神经具有保护功能。首先,尝试研究了不同浓度的LBP对神经细胞增殖、分化行为的影响,结果发现LBP能有效的促进神经细胞的增殖及NGF诱导的PC12细胞的神经分化。同时确定出其最佳的作用浓度在50-100μg/mL。进一步通过同轴静电纺技术将LBP负载到纳米纤维中使支架具有LBP缓释性能,并表征了支架的形貌结构及性能、纤维支架对LBP的控释性能以及对神经细胞行为的影响,从而评估该活性支架用于周围神经组织工程的可行性。体外释放行为的研究结果表明LBP可以持续缓慢的释放超过2个月,表明纤维支架对LBP具有负载和控释的功能。而进一步的细胞实验证实该LBP缓释型的纤维支架对PC12细胞和雪旺细胞均表现出较好的生物相容性,尤其是PLGA-LBP30纤维支架,能明显促进PC12细胞和雪旺细胞的增殖。PC12在支架上的分化结果表明,支架中释放的LBP对NGF诱导的PC12细胞的神经分化具有明显的促进作用。而且对雪旺细胞的髓鞘化碱性蛋白(MBP)的表达以及大鼠背根神经节(DRG)神经元的突触延伸也表现出显着的增强。实验结果揭示了LBP在周围神经组织再生中的积极作用,而负载LBP的缓释型功能化纳米纤维支架在周围神经损伤的修复与再生中具有潜在的应用价值。(2)前面的研究发现LBP能促进NGF的诱导活性,而单独利用LBP无法达到很好的诱导效果,这也确定了NGF在神经分化及突触延伸中发挥着不可替代的重要作用。因此,在支架中引入NGF是进一步提高支架功能的有效方法。在制备LBP缓释纤维支架的基础上进一步引入NGF缓释微球,以增强支架的诱导活性。首先通过探究溶剂、聚合物溶液浓度及负载电压对电喷微球形貌及粒径的影响,确定制备NGF缓释微球的最佳条件。通过静电喷射和静电纺丝联合的方式制备了同时负载NGF和LBP的微球/纤维复合支架。体外释放行为表明,LBP和NGF均可从该复合支架中持续缓慢的释放40天以上,表明该复合支架作为药物缓释体系对LBP和NGF具有很好的负载和控释能力,且满足周围神经损伤修复周期的要求。通过细胞增殖实验发现,NGF缓释微球的负载对支架的生物相容性没有显着的影响。而PC12细胞在支架上的分化实验结果表明,从支架的微球中释放出的NGF保持了良好的生物活性,对PC12细胞的神经分化起了很好的诱导作用,并且比外源添加NGF具有更高的诱导效率。因此,该微球/纤维复合支架不仅可以作为神经组织工程支架支撑神经细胞的生长,还可以作为持续释放LBP和NGF的缓释体系,通过LBP和NGF的协同作用,为神经细胞的增殖与分化提供更好的微环境,具有在神经组织工程中应用的潜力。(3)为了进一步提高纤维支架的功能性,在纤维中引入了具有导电活性的多壁碳纳米管(MWCNTs)。首先研究了不同量MWCNTs的负载对纤维支架形貌及性能的影响。SEM的观察结果发现,当MWCNTs的负载量增加到12%时,就会在支架表面形成大量的团聚。因此,选择制备MWCNTs的负载量为2%、4%和8%的纤维作进一步的实验研究。通过力学性能测试,发现MWCNTs的引入使得纤维支架的力学性能包括断裂强度和断裂伸长有所降低,而这与支架制备过程中为了增加MWCNTs的分散性而加入Span 80有关,还与MWCNTs在支架中的分布有关。为了提高纤维支架的表面亲水性,对支架进行了空气等离子体处理,结果表明等离子处理后支架的表面形貌及力学性能均没有较大的改变,而亲水性却显着提高,细胞黏附实验进一步证实了支架亲水性和生物相容性的提高。进一步的细胞实验表明,在8%的MWCNTs负载量下,支架对PC12细胞和雪旺细胞并没有产生细胞毒性,而且MWCNTs的负载促进了两种细胞在支架上的增殖。通过SEM和免疫荧光染色观察发现,负载MWCNTs的纤维支架对PC12细胞的分化及突触生长、大鼠DRG神经元的轴突延伸以及雪旺细胞的生长均有显着的促进作用,尤其是MWCNTs的含量为8%时。这表明含MWCNTs的纳米纤维支架能为神经细胞的增殖、分化及突触延伸提供良好的微环境,可以作为有效的神经导管支架材料用于周围神经组织再生。(4)在前面的基础上为了提高支架对神经细胞生长的引导作用,利用高速旋转的滚轴作为接收装置,制备了具有高度取向排列拓扑结构的含MWCNTs的纳米纤维。进一步联合外源电刺激研究了神经细胞在该纳米纤维支架上的响应情况。支架表面吸附多聚L赖氨酸后,表面亲水性显着提高,并且细胞的黏附也得到了显着提高。进一步的细胞实验发现,PC12和雪旺细胞的增殖在取向的纤维支架均得到了增强,并且纤维的取向性对PC12细胞的分化和突触延伸以及雪旺细胞的迁移和生长具有显着的引导性。外加电刺激之后,发现纤维取向排列的拓扑结构和外源电信号的协同作用能够进一步引导PC12细胞的神经分化及大鼠DRG神经元的轴突延伸。此外,雪旺细胞的增殖、迁移、髓鞘化蛋白以及NGF的表达也同样受到纤维取向性和外源电刺激的联合诱导。因此,研究结果表明取向导电的纤维支架联合适当的电刺激具有促进损伤的周围神经修复与再生的巨大潜能。(5)尝试将NGF和LBP同时负载到PLGA/MWCNTs纳米纤维支架中,制备同时缓释LBP和NGF的取向导电纤维复合支架。从而赋予支架更多的活性和功能,得到将LBP和NGF的生物化学信号、纤维的取向拓扑结构、导电性等集于一体的复合支架,并探究该支架联合外加电信号对神经细胞分化及轴突延伸的协同作用。通过LBP和NGF的体外释放行为研究,发现LBP和NGF均可从支架持续缓慢的释放。PC12细胞和和雪旺细胞在支架上的增殖均得到了有效的增强,且PC12细胞的分化和雪旺细胞的生长迁移也得到了进一步的提高。此外,外加电刺激之后,LBP和NGF从支架中的释放显着提高。且附加外源电刺激后,PC12细胞的神经分化和初级神经元的突触延伸生长均得到进一步的增强。综合以上结果,提示该纤维支架一方面可以作为支架为细胞提供有效的支撑并接触诱导神经细胞的增殖、分化、迁移等,另一方面又可以作为药物缓释体系在损伤部位释放LBP和NGF进一步提高神经再生速率,在周围神经组织修复与再生中具有较好的应用潜能,联合外加电刺激能进一步发挥其潜能。(6)神经损伤之后经常会产生炎症反应,而且许多人工合成材料制备的支架植入之后往往也会引起炎症反应、引发氧化应激反应。具有抗氧化性能的神经支架可以有效的克服这一问题。利用无溶剂的开环聚合反应将PCL接枝到天然抗氧化剂木质素(Lignin)上,得到了两种具有抗氧化性的Lignin/PCL共聚物(LP2和LP4),进一步利用静电纺丝技术制备了含该共聚物的纳米纤维支架。通过抗氧化性能测试发现,与常用的抗氧化剂维生素E相比,Lignin/PCL共聚物以及含该共聚物的纳米纤维支架均表现出更优的抗氧化性能。细胞增殖实验进一步表明,该抗氧化性的纳米纤维支架具有良好的生物相容性,且对H_2O_2引起的雪旺细胞的氧化损伤表现出很好的保护作用。通过免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察发现含LP2和LP4的纤维支架能促进雪旺细胞髓鞘化碱性蛋白的表达以及原代大鼠DRG神经元的突触生长和延伸速率,且LP4比LP2的促进作用更加明显。上述结果均表明,该抗氧化性的纤维支架具有作为神经导管材料应用于周围神经组织工程的潜力。(本文来源于《东华大学》期刊2018-05-01）
周雪颖[4]（2018）在《骨髓间充质干细胞移植对HD中毒大鼠神经组织神经丝表达的影响》一文中研究指出目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对HD中毒大鼠神经组织神经丝表达的影响。方法:选用100只成年SPF级雄性SD大鼠,采用随机数字法进行分组,分别为正常对照组(Control)、干细胞对照组(BMSCs)、染毒组(HD)、自身修复组(HD-NS)、干细胞修复组(HD-BMSCs),每组20只。以无菌生理盐水稀释过的HD溶液对实验组大鼠进行染毒,染毒方式为腹腔注射,剂量为400 mg/kg,对照组以同等剂量的无菌生理盐水进行注射。每天染毒1次,持续时间为5周。染毒模型成功后,经尾静脉注射BMSCs建立干细胞修复组,另一组给予相同剂量的无菌生理盐水建立自身修复组,持续5周。全程对各组大鼠拍照记录一般情况,记录各组大鼠步态评分。干细胞修复模型建立成功后,各组分别取2只实验动物以4%多聚甲醛灌流处死,提取脊髓、坐骨神经组织备用;各组其余的动物断头处死,低温下快速提取脊髓、坐骨神经组织置于-80℃冰箱中保存。采用q RT-PCR检测神经丝各亚型(NF-L、NF-M、NF-H)基因表达的变化;应用Western Blot方法检测NF-L、NF-M、NF-H蛋白表达的变化。采用免疫荧光染色,观察NF-L、NF-M、NF-H的表达分布。选用SPSS17.0统计分析软件,对实验结果进行统计学分析。结果:1.一般情况及神经行为学Control组大鼠在整个实验过程中,行动敏捷,发育正常,无异常体征出现;其步态评分为1,随着时间的延长,步态评分保持不变。给予HD染毒5周后,大鼠精神状态差,皮毛粗糙灰暗,消瘦,无法站立,匍匐前行,双后肢后拖,足背着地,呈瘫痪状;步态评分高,属严重步态异常,且随着时间的延长,始终保持在高水平。给HD暴露大鼠移植BMSCs5周后,大鼠体重明显增加,行走时双后脚趾轻度外撇、脚尖着地,瘫痪状态明显得到改善;注射BMSCs后的第2周开始其步态评分显着降低,且随着时间的延长,步态评分降低更加明显。2.脊髓、坐骨神经组织中NF-L蛋白表达免疫荧光染色显示,HD组的NF-L免疫荧光强度低于Control组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组NF-L的免疫荧光强度高于HD组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05)。HD组的NF-L蛋白表达显着低于Control组(P<0.05);HD-BMSCs组NF-L蛋白表达显着高于HD组(P<0.05)。3.脊髓、坐骨神经组织中NF-L基因表达PCR结果显示,HD组NF-L的基因低于Control组,差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组的NF-L基因表达高于HD组和HD-NS组,差异有统计学意义(P<0.05)。基因表达与蛋白表达的变化相一致。4.脊髓、坐骨神经组织中NF-M蛋白表达免疫荧光染色显示,HD组的NF-M免疫荧光强度低于Control组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组NF-M的免疫荧光强度高于HD组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05)。HD组的NF-M蛋白表达显着低于Control组(P<0.05);HD-BMSCs组NF-M蛋白表达显着高于HD组(P<0.05)。5.脊髓、坐骨神经组织中NF-M基因表达PCR结果显示,HD组NF-M的基因低于Control组,差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组的NF-M基因表达高于HD组和HD-NS组,差异有统计学意义(P<0.05)。基因表达与蛋白表达的变化相一致。6.脊髓、坐骨神经组织中NF-H蛋白表达免疫荧光染色显示,HD组的NF-H免疫荧光强度低于Control组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组NF-H的免疫荧光强度高于HD组,荧光强度分析结果显示,其差异有统计学意义(P<0.05)。HD组的NF-H蛋白表达显着低于Control组(P<0.05);HD-BMSCs组NF-H蛋白表达显着高于HD组(P<0.05)。7.脊髓、坐骨神经组织中NF-H基因表达PCR结果显示,HD组NF-H的基因低于Control组,差异有统计学意义(P<0.05);HD-BMSCs组的NF-H基因表达高于HD组和HD-NS组,差异有统计学意义(P<0.05)。基因表达与蛋白表达的变化相一致。结论:1.BMSCs移植对HD中毒大鼠的神经损伤具有修复用。2.BMSCs移植上调HD中毒大鼠脊髓组织NF-L、NF-M、NF-H的表达。3.BMSCs移植上调HD中毒大鼠坐骨神经组织NF-L、NF-M、NF-H的表达。4.脊髓、坐骨神经组织中NF-L、NF-M、NF-H的上调可能参与了BMSCs移植对HD中毒大鼠神经损伤的修复作用。(本文来源于《大连医科大学》期刊2018-02-01）
[5]（2016）在《Nature:CD4细胞帮助病毒中和抗体进入神经组织》一文中研究指出血液中循环流动的抗体能够进入大部分组织对病原体进行清除。而"免疫豁免"的组织与器官,比如大脑与外周神经系统,则会通过血-脑屏障以及血-神经屏障阻止抗体的进入。然而,在某些情况下抗体能够通过某种方式进入这些组织器官内部发挥免疫效应。为了研究这一现象背后的机制,来自耶鲁大学医学院的Akiko Iwasaki课题组利用生殖期孢疹病毒(HSV)感染模型进行了试(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年22期）
曾凡[6]（2016）在《模拟微重力对哺乳动物不同脑区神经组织细胞的影响研究》一文中研究指出实验目的:宇宙环境对航天员的身体健康带来了一些不良影响。目前,关于空间环境,尤其是微重力对宇航员中枢神经系统影响的研究层出不穷。但是少有将不同脑区的微重力效应进行比较的研究进展。不同脑区在细胞组成、组织结构、功能作用等方面都存在差异,所以不同脑区对微重力的响应是否相同的问题也需要解决。研究地面模拟微重力效应对不同脑区组织形态学和凋亡的影响,是研究微重力效应的重要一环。我们希望通过本实验为宇航员中枢神经系统的保护提供一些数据。实验方法:取SD(Sprague Dawley)乳鼠海马、小脑、皮层脑区,进行组织块培养。培养7-10天后,随机分为模拟微重力组和地面对照组。模拟微重力效应由SM-31双轴驱动式回转器提供。两组组织块培养1天、7天、14天后,进行形态观察实验。利用倒置显微镜、相差显微镜、原位扫描电子显微镜观察组织块表面形貌和迁出细胞的变化;利用透射电子显微镜观察组织块内部细胞骨架的变化;利用HE染色(hematoxylin-eosin staining,苏木精-伊红染色)观察组织块内部细胞分布的情况。另取SD乳鼠海马、小脑、皮层脑区的原代细胞进行培养,同样回转1天、7天、14天以后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。另外,我们将鼠脑的实验结果在人脑胶质瘤细胞上进行验证。由宣武医院神经外科提供的胶质瘤组织经过无菌的组织块培养后,分别回转1天、7天、14天。随后利用流式细胞仪对其凋亡情况进行检测。实验结果:通过显微镜观察到,叁个脑区组织块皆出现生长晕面积增大,内部细胞大量迁出的现象;由于细胞骨架发生暂时性的变化,导致细胞形态发生变化,并且细胞聚集成片状生长。流式检测结果显示,1天、7天的回转没有对叁个脑区细胞凋亡率产生影响,14天的回转降低了叁个脑区的细胞凋亡率。病人胶质瘤细胞的凋亡率没有被不同时长的回转影响。结论:短期和中期的模拟微重力效应刺激即可引起组织块和细胞发生形态变化,但对细胞凋亡不会产生影响,随着回转时间的延长,细胞即可适应模拟微重力效应。海马、小脑、皮层在形态改变和凋亡两个方面上,对模拟微重力的响应是一致的,没有脑区之间的区别。(本文来源于《北京理工大学》期刊2016-01-01）
张莹莹,梁耕田,刘莉,卢岭,刘金炎[7]（2015）在《骨髓神经组织定向干细胞移植修复噪声性聋豚鼠耳蜗毛细胞的实验研究》一文中研究指出目的:观察骨髓神经组织定向干细胞(NTCSCs)移植对噪声性聋听神经损伤豚鼠耳蜗毛细胞的修复作用。方法:将50只豚鼠按随机数字表法分为对照组(10只)、噪声暴露组(10只)和移植组(30只)。移植组及噪声暴露组豚鼠均在白噪声下暴露1周,暴露结束后将转染绿色荧光蛋白(EGFP)基因的骨髓NTCSCs移植至豚鼠左耳耳蜗蜗轴处(右耳作为自身对照,注射相同体积的0.1%PBS溶液),分别测试噪声暴露前1d和暴露后1、2及4周后的ABR阈值,并通过扫描电镜观察噪声暴露后4周豚鼠耳蜗毛细胞的形态学变化情况。结果:成功分离培养出骨髓NTCSCs,随着移植时间的延长,转染EGFP的骨髓NTCSCs球团和细胞聚集现象,逐渐接近corti器和基膜;耳蜗切片中Nestin(+)细胞的数量明显增多(P<0.05),而MyosinⅦa(+)细胞的数量无明显变化。与噪声暴露前相比,移植组豚鼠ABR阈移小于噪声暴露组(均P<0.05)。扫描电镜显示,噪声暴露组豚鼠耳蜗内、外毛细胞均出现听毛紊乱、融合及缺失;而移植组耳蜗病变较轻,听毛仅有轻微倒伏、融合现象。结论:随着骨髓NTCSCs移植时间的延长,豚鼠ABR阈值得到明显改善。骨髓NTCSCs移植后可逐渐分化成耳蜗螺旋神经节神经元,进而起到改善噪声性聋豚鼠听力的作用。(本文来源于《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》期刊2015年17期）
缪喆,房兵[8]（2015）在《牙髓干细胞修复神经组织的实验研究进展》一文中研究指出牙髓干细胞属成体干细胞,应用牙髓干细胞修复神经组织的实验研究已有报道。我们以牙髓干细胞属性和神经细胞方向诱导分化,神经修复的支架材料研究,牙髓干细胞修复神经组织的实验应用,以及其相关生物机制等4个方面,对该方向的研究进展进行综述。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2015年03期）
温晓晓[9]（2015）在《复合细胞外基质源性材料仿生构建神经组织工程支架的研究》一文中研究指出应用组织工程方法来提高周围神经损伤的修复效果已成为当前神经修复领域的研究趋势。理想的组织工程人工神经是一种具有特定的叁维结构的神经导管,可接纳再生轴突长入,对轴突起引导作用,雪旺细胞在其中有序地分布,分泌神经营养因子等来发挥神经营养作用,并表达细胞粘附分子、分泌细胞外基质(extracellular matrix.ECM)支持并引导轴突再生。本文拟通过成分仿生和结构仿生两个角度来设计和构造神经组织工程支架,进而达到功能仿生的目的。成分仿生方面,本文以天然马尾神经组织细胞外基质(cauda equine-derived extracellullar matrix,cc-ECM)和脐带细胞外基质(Wharton's jelly ECM, wj-ECM)为基本原材料制备神经组织工程支架。其中马尾神经ECM保留了能促进神经修复的具有特异性的生物活性成分；而脐带ECM来源于胚胎组织,免疫原性低,能够延缓细胞衰老，使细胞保持活力持续增殖并分化。结构仿生万而,本文通过将马尾神经细胞外基质与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(1-lactide-coglycolide).PLGA)复合的方法,采用电纺丝技术制备取向纳米纤维支架,提高复合支架力学性能的同事保持ECM的生物活性。同时,将脐带细胞外基质与天然纳米细菌纤维素(bacterial ccllulose.BC)的改性衍生物复合,通过定向结晶冷冻干燥的方法制备了取向多孔支架,为组织修复提供了合适扎隙结构，这就从结构和成分仿生两个角度为细胞外基质在神经组织修复中的应用提供了可能。本文具体研究工作和结果如下：通过Triton X-100和脱氧胆酸钠化学萃取去细胞联合差速离心的方法,制备出天然马尾神经来源的ECM：对ECM中核物质残留情况进行染色观察和定量表征,表明ECM去细胞程度较好，不具备免疫原性;生化成分定量检测证明ECM中胶原和葡萄糖氨聚糖(sulphated glycosaminoglucans,sGAG)成分得到保留；组织染色和免疫荧光染色观察表明ECM中含有丰富Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白和纤维连接蛋白等多种天然神经细胞外基质成分,这就奠定了成分仿生的基础。将马尾ECM与合成共聚物PLGA复合,通过电纺丝力法制备取向周围神经组织工程支架：扫描电镜、红外光谱和双光子显微镜照片证实了纤维支架中ECM成分的存在以及取向结构；拔触角测试证明复合纤维支架具有良好的亲水性；雪旺细胞(Schwann cells、SCs)培养表明，取向结构对SCs的生长具有定向引导作用,且SCs在复合支架上的生长更接近正常细胞形态,证明了ECM成分对神经细胞具有更好的表型维持作用；背根神经节(dorsal root ganglions, DRGs)培养证明,取向支架对神经纤维的生长同样具有引导作用,证明了其良好的神经组织相容性。将脐带ECM分别与双醛基(dialdehyde BC, DBC)和羧甲基改性(carboxymethye BC. CMBC)的细菌纤维素复合,通过定向结晶冷冻干燥法制备取向多孔支架。微观形貌观察表明支架具有微米级的连通孔隙；免疫荧光染色表明两种复合支架中ECM分布均匀,且保留了胶原蛋白、层粘连蛋白等ECM中的生物活性成分；在多孔支架上培养骨髓干细胞(Bone marrow stem cells, BMSCs),各组支架上细胞增殖良好,表明支架具有良好的细胞相容性。通过电镜观察表明BMSCs长入支架材料的孔隙中,且分泌出颗粒状的细胞外基质类物质。结果表明支架具备负载种子细胞的能力,具有潜在的神经组织工程应用价值。上述研究表明,本文制备的ce-ECM/PLGA复合电纺取向纤维支架、wj-ECM/DBC多孔支架以及wj-ECM/CMBC取向多孔支架能够从成分仿生和结构仿生的角度模拟天然细胞外基质,为细胞外基质材料在神经组织工程领域的应用奠定了理论依据和实验基础。(本文来源于《北京科技大学》期刊2015-06-02）
陈雪[10]（2014）在《分区式组织工程脊髓修复大鼠脊髓损伤与抑制神经组织的细胞凋亡研究》一文中研究指出第一部分分区式组织工程脊髓修复大鼠T8脊髓缺损伤模型研究目的：探讨分区式导管（partition-type tube scaffold，PtTS）联合骨髓基质干细胞（bonemarrow stromal cells，BMSCs）组建分区式组织工程脊髓，在大鼠T8脊髓5mm全横断损伤模型中的修复效果。方法：Ⅰ、体外实验1.体外培养、传代大鼠来源的绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）标记的BMSCs。2.以壳聚糖和甲壳素为主要原料制备PtTS和单通道导管（hollow tubescaffold，HTS）。3.制备组织工程脊髓导管浸提液，用于BMSCs体外培养，CCK8法检测BMSCs与组织工程脊髓导管材料的生物相容性。4.光镜观察BMSCs在PtTS上的生长情况。Ⅱ、体内实验1.实验动物分组：SD大鼠随机分为6组，其中HTS组、PtTS组、HTS+BMSCs组和PtTS+BMSCs组，分别采用不同的方式来桥接修复大鼠T8脊髓节段5mm缺损；另设缺损组和假手术组作为对照组；分笼饲养12M后进行各项指标观察。2.行为学检测：各组大鼠分别于术前、术后1w、2w、4w、6w、8w、10w、12w、6M、9M、12M进行BBB行为学评分和CatWalk自动定量步态分析。3.运动诱发电位（motor evoked potentials，MEPs）检测：利用全功能肌电图诱发电位仪，将刺激电极分别置于大脑皮层或损伤下段（约T10节段）皮下，记录电极置于腓肠肌内，测定各组大鼠MEPs，对潜伏期和振幅进行统计学分析。4.红核脊髓束（rubrospinal tract，RST）顺行示踪：取材前2w利用脑立体定位仪将Fluoro ruby（FR）注射入红核中心部位，观察各组脊髓损伤区域RST生长情况。5.免疫荧光组织化学染色：取C4到L4节段脊髓组织进行5-HT1A和NF免疫荧光组织化学染色，观察神经纤维再生和BMSCs分化情况；计算各组距离损伤中心不同节段脊髓中的阳性神经纤维数目与假手术组的比例，进行统计学分析。6. Western blot检测：取各组脊髓损伤中心至头端和尾端均为3mm范围内的脊髓组织，提取蛋白检测5-HT1A和NF蛋白的表达情况。7.电镜观察：取各组脊髓损伤中心的再生组织进行电镜观察，计算有髓神经纤维的数目和髓鞘厚度并进行统计学分析。结果：Ⅰ、体外实验1. BMSCs的体外培养：对BMSCs进行体外培养，传代6次后，荧光显微镜下观察其GFP荧光标记率仍达90%左右。2.组织工程脊髓导管的制备：成功制备PtTS和HTS。3. BMSCs与组织工程脊髓导管的相容性检测：CCK8法检测细胞增殖曲线，结果显示随培养时间延长，BMSCs数量持续增多，第3d到达平台期；光镜观察，BMSCs在导管腔面黏附生长，状态良好。Ⅱ、体内实验1.术后动物一般情况观察：术后12M除假手术组外，其余各组大鼠后肢肌肉有不同程度的萎缩，脊柱有不同程度的弯曲，其中PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组大鼠相对其余各组较好。2.行为学检测：（1）BBB评分：术后各手术组大鼠评分均降至0分，然后逐步上升；从术后10w到12M，PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组明显高于HTS组、PtTS组和缺损组，差异有统计学意义；后3组间无显着性差异。（2）步态规律的规律指数：术后各手术组均明显下降，2w后开始缓慢上升；PtTS+BMSCs组在8w后明显高于其他4个手术组，差异有统计学意义；HTS+BMSCs组也明显高于缺损组，且除了第6M外，在其余时间点均高于HTS组和PtTS组； HTS组、PtTS组和缺损组之间无显着性差异。（3）支座距离：术后各手术组均增加至50mm以上，2w后开始缓慢下降；PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组明显小于HTS组、PtTS组和缺损组，差异有统计学意义。（4）后足压强：术后各手术组均明显下降；4w后PtTS+BMSCs组开始稳定上升，高于其余4个手术组，差异有统计学意义；12w后HTS+BMSCs组明显升高；HTS组、PtTS组和缺损组在整个测试期间维持较低水平。（5）摇摆时间：整个测试期间，各手术组均有明显波动，总体呈下降趋势，各组间无显着性差异。3. MEPs检测：除缺损组外其余各组大鼠在大脑皮层刺激和在损伤下段刺激时，均能在腓肠肌记录到MEPs波形。在大脑皮层刺激时，PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组的潜伏期与HTS组和PtTS组相比较短，且PtTS+BMSCs组的振幅大于HTS组、PtTS组和HTS+BMSCs组，差别有统计学意义；在损伤下段刺激时，各手术组的潜伏期无显着性差异，但PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组的振幅大于HTS组、PtTS组和缺损组，差别有统计学意义。4.脊髓大体观察：缺损组脊髓两残端明显萎缩，距离大于5mm；其余各手术组导管与脊髓两残端在解剖结构上出现了不同程度的连续性，导管部分降解；其中PtTS+BMSCs组和HTS+BMSCs组的导管和脊髓连接较好。5. RST顺行示踪：PtTS+BMSCs组损伤尾侧段可见FR阳性神经纤维，聚集成束，排列规则，大多集中分布在导管RST分区位置。6.5-HT1A+神经纤维再生情况：各组导管都有不同程度的降解；PtTS+BMSCs组和PtTS组的5-HT1A+神经纤维排列规则，前者再生区域内阳性神经纤维较多，部分BMSCs显示5-HT1A和GFP双标阳性；HTS+BMSCs组和HTS组中5-HT1A+神经纤维排列不规则。对5-HT1A+神经纤维进行统计学分析结果显示，从损伤中心分别往头端和尾端3mm的范围内，PtTS+BMSCs组的5-HT1A+神经纤维多于其余4个手术组；从损伤中心往头端2mm的区域、以及距离损伤中心3mm的尾端区域内，HTS+BMSCs组多于HTS组、PtTS组和缺损组；差别均有统计学意义。Westernblot结果显示各组5-HT1A蛋白表达水平与免疫荧光组织化学染色结果相一致。7. NF+神经纤维再生情况：PtTS+BMSCs组的导管大部分降解，在再生区域中可见NF+神经纤维排列整齐，跨越缺损处；较多的BMSCs显示GFP和NF双标阳性，散在分布于神经纤维之中。对NF+神经纤维进行统计学分析结果显示，从损伤中心分别往头端和尾端3mm的范围内，PtTS+BMSCs组的NF+神经纤维多于其余4个手术组，HTS+BMSCs组多于HTS组、PtTS组和缺损组，差别有统计学意义。Western blot结果显示各组NF蛋白表达水平与其免疫荧光组织化学染色结果相一致。8.电镜观察髓鞘形成情况：缺损组损伤中心仅有胶质疤痕组织，未见新生轴突；HTS组和PtTS组可见少量散在分布的轴突，部分裸露，髓鞘未形成完全；HTS+PtTS组和PtTS+BMSCs组可见较多的有髓神经纤维和毛细血管，后者轴突排列整齐，髓鞘板层结构清晰，并有突触可见。PtTS+BMSCs组的有髓神经纤维的数目多于HTS组、PtTS组和HTS+BMSCs组，HTS+BMSCs组多于PtTS组和HTS组，差别均有统计学意义；但HTS组和PtTS组之间无显着性差异。各手术组有髓神经纤维的髓鞘厚度未见显着性差异。结论：组织工程脊髓导管与BMSCs相容性良好；利用PtTS联合BMSCs对大鼠脊髓损伤进行修复，与HTS+BMSCs组、PtTS组和HTS组相比，大鼠运动功能恢复更好；各桥接组下行运动神经通路的电生理特性均得到部分恢复；PtTS与HTS相比，能更好的引导损伤区域内的再生神经纤维有序生长、规则排列；移植的BMSCs可以部分分化为神经元，促进轴突再生；PtTS联合BMSCs的治疗方案能更好的促进脊髓损伤后的有髓神经纤维再生，并引导其有序生长，与损伤尾侧端建立功能联系，为治疗脊髓损伤提供具有潜在意义的组合方案。第二部分分区式组织工程脊髓对大鼠脊髓损伤后神经组织的细胞凋亡的影响目的：了解分区式组织工程脊髓中BMSCs在SCI后神经组织的细胞凋亡发生中的影响，探讨其修复神经损伤、促进功能恢复的作用机制。方法：1.实验动物分组：SD大鼠随机分为4组，其中BMSCs组（PtTS+BMSCs），PBS组（PtTS+PBS），z-VAD-fmk组（PtTS+z-VAD-fmk），分别采用不同方式来桥接修复大鼠T8脊髓节段5mm缺损；另设假手术组作为对照组；分笼饲养3w后进行各项指标观察。2.行为学检测：各组大鼠分别于术前、术后3d、7d、14d、21d进行BBB行为学评分和CatWalk自动定量步态分析。3. TUNEL检测：术后1w、2w、3w分别取各组大鼠T7节段脊髓进行TUNEL染色，对阳性细胞数进行统计学分析，观察各组脊髓组织细胞凋亡情况。4.电镜观察：取各组大鼠T7节段脊髓进行电镜检测，观察各组神经组织细胞的超微结构。5.免疫荧光组织化学染色：取各组大鼠T7节段脊髓进行冰冻切片后行下述染色（1）完成TUNEL染色后进行NeuN免疫荧光组织化学染色，对脊髓灰质前角TUNEL+神经元进行统计学分析，观察神经元的凋亡情况。（2）完成TUNEL染色后分别进行CNPase和GFAP免疫荧光组织化学染色，对脊髓白质中TUNEL+的少突胶质细胞和星形胶质细胞分别进行统计学分析，观察神经胶质细胞的凋亡情况。（3）进行NeuN/caspase-3免疫荧光组织双标化学染色，观察并统计脊髓灰质前角神经元表达caspase-3的情况。（4）进行CNPase/caspase-3、GFAP/caspase-3免疫荧光组织双标化学染色，观察并统计脊髓少突胶质细胞和星形胶质细胞表达caspase-3的情况。6. Western blot检测：取各组大鼠损伤中心至头端和尾端均为3mm范围内的脊髓组织，提取蛋白检测caspase-3p17、PARP和cleave PARP蛋白的表达情况，观察各组脊髓caspase途径蛋白的表达变化。结果：1. TUENL染色：术后假手术组未见明显细胞凋亡，其余3组术后1w可见大量TUNEL+细胞，3组间未见显着性差异；术后2w开始，BMSCs组和z-VAD-fmk组的TUNEL+细胞少于PBS组，差异有统计学意义；对每组不同时间点的TUNEL+细胞进行比较，BMSCs组和z-VAD-fmk组在术后3w比术后1w明显减少，差异有统计学意义，而PBS组未见明显降低。2.电镜观察：BMSCs组中有较多有髓神经纤维，凋亡细胞较少；z-VAD-fmk组中有髓神经纤维数目减少，神经组织细胞或为形态正常或发生坏死；PBS组中神经纤维密度明显降低，可见较多凋亡细胞和坏死细胞，轴突发生脱髓鞘现象。3.神经元的凋亡情况：假手术组中NeuN+神经元未见TUNEL阳性反应，且神经元数目多于其余3组；BMSCs组和z-VAD-fmk组的NeuN+/TUNEL+双阳性细胞数少于PBS组；差异均有统计学意义。4.少突胶质细胞的凋亡情况：各组CNPase+少突胶质细胞数目无显着性差异；假手术组中CNPase+细胞未见TUNEL阳性反应；比较各组CNPase+/TUNEL+细胞数，z-VAD-fmk组少于PBS组，差异有统计学意义；BMSCs组和PBS组之间、以及BMSCs组与z-VAD-fmk组之间无显着性差异。5.星形胶质细胞的凋亡情况：各组GFAP+星形胶质细胞数目无明显差异。除假手术组中GFAP+细胞未见TUNEL阳性反应外，其余3组均可见GFAP+/TUNEL+细胞，但细胞数无显着性差异。6. caspase-3在神经元中的表达情况：BMSCs组中caspase-3+/NeuN+细胞数少于PBS组，差异有统计学意义；z-VAD-fmk组和假手术组中未见NeuN+神经元表达caspase-3。7. caspase-3在少突胶质细胞中的表达情况：BMSCs组中caspase-3+/CNPase+细胞数少于PBS组，差异有统计学意义；z-VAD-fmk组和假手术组中未见CNPase+少突胶质细胞表达caspase-3。8. caspase-3在星形胶质细胞中的表达情况： BMSCs组和PBS中caspase-3+/GFAP+细胞数无显着性差异；z-VAD-fmk组和假手术组中未见GFAP+星形胶质细胞表达caspase-3。9. caspase途径蛋白的表达情况：比较各组与caspase途径相关的caspase-3p17、PARP和cleave PARP蛋白的表达情况，BMSCs组的caspase-3p17和cleavePARP蛋白表达高于z-VAD-fmk组和假手术组，但低于PBS组，差别均有统计学意义。10.行为学检测：（1）BBB评分：术后除假手术组维持在21分外，其余各组大鼠评分均降至0分，然后逐步上升；术后14d开始，BMSCs组与z-VAD-fmk组评分高于PBS组，差异有统计学意义；PBS组评分进入平台期。（2）步态规律的规律指数：术后除假手术组维持在95%以上外，其余各组均下降至10%左右，然后缓慢上升，术后3w内各手术组间无显着性差异。（3）支座距离：术后除假手术组维持在30mm左右外，其余各组均增加至50mm以上；术后2w开始，BMSCs组和z-VAD-fmk组下降接近于假手术组，且明显低于PBS组，差异有统计学意义。（4）后足压强：术后除假手术组维持在100a.u以上外，其余各组均明显下降；术后2w开始，BMSCs组和z-VAD-fmk组高于PBS组，差异有统计学意义。（5）摇摆时间：术后除假手术组没有明显改变外，其余各组均有所增加；术后1w开始，BMSCs组和z-VAD-fmk组低于PBS组，差异有统计学意义；术后2w开始，BMSCs组和z-VAD-fmk组接近于假手术组，3组间无显着性差异。结论：分区式组织工程脊髓中的BMSCs能通过阻止caspase-3的表达，抑制caspase介导的细胞凋亡途径，减少脊髓损伤后神经元和少突胶质细胞的凋亡发生，更好的促进大鼠运动功能恢复；脊髓损伤后星形胶质细胞的凋亡与caspase途径无直接相关，可能主要通过其他途径导致凋亡发生。(本文来源于《苏州大学》期刊2014-09-01）
神经组织细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨JAK/STAT通路对于创伤性脑缺血性的保护作用,为临床可能的基因治疗提供科学依据。方法45只wistar大鼠随机分为正常组(15只),创伤组(15只双下肢造成骨折)、干预组(15只,)创伤组和干预组分别在6h,48h,72h处死动物。取大鼠大脑海马区,一部分做常规病理切片,另一部分做qRT-PCR检测stat3mRNA,miR-21的基因表达。结果病理常规诊断:正常组,未见病理变化。创伤组,海马区神经细胞变性,染色不均,细胞变大,间质水肿。干预组,病理形态学变化较创伤组更加严重。qRT-PCR检测stat3,miR-21的表达显示,正常组,二者表达较低;创伤组,二者表达升高,在48h达到高峰,随后在72h下降。干预组二者表达均降低,在48h达到低谷,随后在72h逐渐的升高。二者呈正相关性(P<0.01)。结论创伤致脑组织缺氧时,stat3,miR-21表达升高起到了保护海马区神经细胞的作用,这一作用被AG490所阻断。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
神经组织细胞论文参考文献
[1].穆冬慧,王亚婷,崔景彬,鄢文海.骨髓基质干细胞移植对脑缺血大鼠神经组织及功能的影响[J].河南医学研究.2019
[2].钱磊,杨廷桐.创伤时阻断JAK/Stat3通路对大脑海马区神经组织细胞的影响[J].中国实验诊断学.2019
[3].王静.功能化纳米纤维对神经细胞行为的影响及用于神经组织工程的应用研究[D].东华大学.2018
[4].周雪颖.骨髓间充质干细胞移植对HD中毒大鼠神经组织神经丝表达的影响[D].大连医科大学.2018
[5]..Nature:CD4细胞帮助病毒中和抗体进入神经组织[J].现代生物医学进展.2016
[6].曾凡.模拟微重力对哺乳动物不同脑区神经组织细胞的影响研究[D].北京理工大学.2016
[7].张莹莹,梁耕田,刘莉,卢岭,刘金炎.骨髓神经组织定向干细胞移植修复噪声性聋豚鼠耳蜗毛细胞的实验研究[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志.2015
[8].缪喆,房兵.牙髓干细胞修复神经组织的实验研究进展[J].组织工程与重建外科杂志.2015
[9].温晓晓.复合细胞外基质源性材料仿生构建神经组织工程支架的研究[D].北京科技大学.2015
[10].陈雪.分区式组织工程脊髓修复大鼠脊髓损伤与抑制神经组织的细胞凋亡研究[D].苏州大学.2014
论文知识图
