导读:本文包含了聚酰胺胺型树枝状聚合物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:聚酰胺-胺型树枝状大分子,透明质酸,细胞毒性,肿瘤细胞
聚酰胺胺型树枝状聚合物论文文献综述
胡海梅,李晓琳,梁双红[1]（2016）在《非病毒基因载体聚酰胺-胺型树枝状大分子-透明质酸聚合物体外细胞毒性》一文中研究指出目的研究非病毒基因载体聚酰胺-胺型树枝状大分子(PAMAM)-透明质酸(HA)聚合物的体外细胞毒性。方法采用MTT法和流式细胞术,分别检测合成的多种PAMAM-HA聚合物对He La细胞、Bel-7402细胞和Hep G2细胞的细胞毒性及其诱导细胞凋亡的能力。结果 PAMAM-HA聚合物的细胞毒性随浓度(50~800 mg·L-1)增加、作用时间(24~72 h)延长、PAMAM的代数(G4,G5)增加及HA的相对分子质量(3850和17 200)和接枝密度(5%~25%)降低而增加。与聚合物PAMAM G4-HA3850-5%和PAMAM G5-HA3850-5%孵育24 h,肝癌细胞Bel-7402细胞凋亡率分别为4.5%和9.9%。聚合物与DNA形成的复合物PAMAM G4-HA3850-5%/DNA和PAMAM G5-HA3850-5%/DNA与细胞共孵育24 h后,细胞存活率均在80%以上,较PAMAM G4/DNA和PAMAM G5/DNA毒性降低(P<0.05)。结论经不同接枝量和接枝密度HA修饰的PAMAM细胞毒性降低,是一种较有前途的非病毒基因载体。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2016年03期）
邓珊珊,曹琦琛,马成,白海红,任晓君[2]（2014）在《一种基于聚酰胺-胺型树枝状聚合物富集糖肽的新策略》一文中研究指出目的:提出了一种新型的糖肽富集试剂,将不同代数的含高密度N端的聚酰胺-胺(PAMAM)型树枝状聚合物固定到溴化氰活化的琼脂糖凝胶上用于糖肽的高效分离。方法:先用标准糖蛋白对试剂的富集条件进行优化,包括是否使用还原剂、不同酸度的结合溶液、不同洗脱液、不同试剂比例,将优化后的方法用于鼠脑裂解液糖肽的富集。结果与结论:将优化的方法用于鼠脑糖肽的富集,用第6代PAMAM鉴定到的糖肽数目是采用商业化酰肼材料的3倍,该试剂对糖肽富集的高选择性和高重现性为糖蛋白组学研究提供了新的工具。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年02期）
吴斌,戴建军,张廷宇,张树山,吴彩凤[3]（2013）在《纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响》一文中研究指出为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达。结果显示,0.5μg线状质粒DNA中加入PAMAM-D(质量比20∶1)阳性率最高(P<0.05);孵育时间为90、120min时,阳性率显着高于30、60min组(19.94%、18.57%与8.50%、13.87%;P<0.05);以此条件处理精子,阳性率显着高于无载体和脂质体处理组(23.93%与7.25%、13.25%;P<0.05)。各处理精子经IVF后,PAMAM-D组EGFP表达率显着高于其他2组(9.19%与4.81%、3.43%;P<0.05),各组绿色荧光胚胎经基因组PCR分析均能检测到EGFP基因。结果表明,PAMAM-D可有效介导猪精子转染外源DNA,并通过体外受精将外源基因导入胚胎中。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2013年03期）
厉周,方素珍,韩帅,崔大祥,蔡寨[4]（2012）在《聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长的作用》一文中研究指出背景:采用反义寡核苷酸等治疗方法可以抑制凋亡抑制因子Survivin的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。目前使用Survivin治疗恶性肿瘤仍存在基因载体转染效率低下、不能长期稳定表达、易被酶降解等难题。目的:观察聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)脂质体介导Survivin-反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM脂质体和PAMAM分别与Survivin-反义寡核苷酸混合得到载反义基因转染复合物。测定复合物的zeta电位及包封率。将两种载基因复合物注射道裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小,检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果与结论:PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物的zeta电位高于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物(P<0.05),基因包封率两组比较差异无显着性意义(P>0.05)。PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物治疗组裸鼠移植瘤质量及survivin蛋白表达低于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物组(P<0.05)。提示PAMAM脂质体能将Survivin-反义寡核苷酸高效递送到人肝癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,诱导移植瘤细胞凋亡。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年12期）
厉周[5]（2009）在《聚酰胺—胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸治疗结直肠癌的实验研究》一文中研究指出研究背景结直肠癌是威胁人类健康的主要疾病之一,我国结直肠癌的发病率有不断上升的趋势。传统的治疗方法有其自身的局限性,因此寻找新的疗法迫在眉睫。随着人们对大肠癌认识的加深及医学分子生物学研究的发展,肿瘤的基因治疗成为一种新的治疗模式。越来越多的资料显示与细胞恶性增殖和分化受阻一样,细胞凋亡异常在大多数恶性肿瘤的发病学上亦占有重要地位。凋亡在正常情况下可以消灭DNA受损或细胞循环周期失调的细胞。肿瘤细胞的增殖率并不总是高于相应的正常细胞,这表明肿瘤细胞的积累是细胞逃过“凋亡排除”作用的结果。凋亡调控失调可以异常地延长细胞的生存时间,促进有转化作用的基因突变的积累,从而参与肿瘤的发生。所以肿瘤不仅是细胞增殖分化异常疾病,也是凋亡异常疾病。诱导凋亡是一种新的肿瘤治疗方法,在肿瘤细胞内导入凋亡活化基因或灭活凋亡抑制基因是肿瘤基因治疗中最诱人的策略之一。Survivin是迄今发现的最强的凋亡抑制因子,survivin在癌组织中的表达与恶性肿瘤的侵袭性、预后均有一定关系。作为一个新的凋亡抑制蛋白,survivin在凋亡调节中起着重要作用。与其它的IAP家族成员不同,survivin在人胚胎组织中高度表达并参与胚胎发育过程中的组织分化和器官形成,在终末分化的成人组织中未有检出,但广泛表达于多种肿瘤组织。体内外研究表明,在许多恶性实体瘤如肺癌、结直肠癌、胰腺癌、前列腺癌和胃肠癌以及一些造血系统恶性肿瘤如非何杰金淋巴瘤中均有很强的表达。相反,在肿瘤周围的正常组织中未见表达。因此,survivin可作为一个肿瘤细胞治疗的理想靶点。反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)通过序列特异性地与靶mRNA结合而阻断mRNA翻译,调节由基因到蛋白质的信息传递,抑制蛋白质的表达。ASODN是根据中心法则从DNA水平入手,作用于遗传信息的上游,所需剂量较小,因此其药效高。由于ASODN'能特异性地阻断细胞内单一基因的表达,而不影响其他基因的正常功能,所以特异性强,副作用小。由于survivin只在胚胎和恶性肿瘤组织中表达,反义survivin基因治疗具有良好的靶向性、特异性及安全性。基因治疗的重要目标是获得遗传物质在转导细胞中的持久整合及稳定表达,由于ASODN是亲水性的多聚阴离子聚合物,对生物膜的通透性差,具有不易透过细胞膜、细胞难于吸收、胞内积累少以及易受血浆和细胞内的核酸酶降解的特点,限制了它的广泛应用。为了增加细胞对ASODN的摄入率和稳定性,而不降低转移性,需要使用高效载体传递ASODN。传统的病毒和非病毒载体在转染效率和安全性方面都存在各种不足,自纳米技术产生以后,用纳米颗粒作为基因转移载体,已引起医学界广泛重视。纳米微粒是一类由天然或合成的高分子物质组成的超微固态胶状粒子,粒径多在10-100nm范围内,大小与病毒相仿,比一般细胞小,可将DNA、RNA、寡核苷酸等生物活性分子包裹在其中或由静电相互吸引或吸附在其表面形成复合物,细胞摄取纳米微粒后,通过一系列复杂的过程释放出这些活性分子,从而发挥基因的治疗作用。聚酰胺-胺型树状大分子(polyamidoamine,PAMAM)是近年来国外开发的一类新型功能高分子,其分子在结构上具有高度的几何对称性、精确的分子结构、大量的官能团、分子内存在空腔及分子链增长具有可控性。多种细胞系中研究显示,以PAMAM为载体均较其它阳离子载体(如多聚赖氨酸、聚氮丙啶、脂质体)介导的基因转移率显着提高。寡核苷酸/PAMAM复合物不仅促进细胞对DNA的摄取,同时还可延长DNA在细胞内的存留时间。PAMAM具有保护DNA不被血清或组织中各种补体及酶所降解的作用,当DNA与PAMAM结合后,可抵御酶的降解。基于上述研究,为提高survivin反义寡核苷酸的转染效率,增强基因治疗的效果,本课题拟应用PAMAM作为survivin-asODN的载体,配制成纳米转染复合物,检测其表征、基因载药率和体外DNA释放特征。并观察survivin-asODN对结直肠癌SW620细胞的体外杀伤作用及其体内抑瘤效应,为进一步开展结直肠癌的基因治疗研究提供实验依据。目的研究PAMAM作为survivin-asODN转染载体的可行性。观察survivin反义寡核苷酸对SW620细胞中survivin基因表达的封闭作用和细胞生长的抑制作用。最后,以SW620细胞株建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察经PAMAM转导的survivin-asODN在裸鼠体内的抗肿瘤作用。方法一、PAMAM-survivin-asODN转染复合物的合成、形态观察、粒径与zeta电位测定、核酸载药率与包封率测定、体外基因释放测定以及琼脂糖凝胶电泳阻滞分析和抗核酸酶试验。针对survivin mRNA翻译起始位点设计并合成反义寡核苷酸,与PAMAM按一定比例混合成PAMAM-survivin-asODN转染复合物,透射电子显微镜下观察粒子的形态,激光散射粒径仪测定转染复合物的粒径,zeta电位分析仪测定转染复合物的zeta电位,紫外分光光度计测定核酸载药率与包封率以及体外基因释放,PAMAM-survivin-asODN转染复合物电泳阻滞分析,加入核酸酶后电泳阻滞分析。二、PAMAM介导survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)转染SW620细胞以及诱导细胞凋亡。Survivin反义寡核苷酸通过PAMAM介导转染SW620细胞,采用westemblot、RT-PCR方法检测survivin反义寡核苷酸对SW620细胞survivin蛋白及mRNA表达的作用。测定转染前后细胞增殖活性变化,流式细胞仪检测细胞基因转染效率和凋亡率的变化。叁、PAMAM介导的survivin反义寡核苷酸对结直肠癌SW620细胞裸鼠模型的体内抑瘤效应。采用BALB/C雌性裸鼠,4～6周龄,对数生长期的SW620细胞接种于裸鼠腹部皮下,建立结直肠癌动物模型,当肿瘤达0.5cm直径时,将荷瘤裸鼠随机分为3组,A组:阴性对照组(瘤体及瘤周注射Lipolifectmain~(TM2000)与PAMAM);B组:脂质体-survivin-asODN治疗组(瘤体及瘤周注射脂质体-survivin-asODN转染复合物);C组:PAMAM-survivin-asODN治疗组(瘤体及瘤周注射PAMAM-survivin-asODN转染复合物)。治疗前后测量肿瘤体积,治疗结束后测肿瘤重量,计算肿瘤抑瘤率,观察该治疗体系的体内抑瘤效应。治疗结束后行组织内survivin基因表达的检测、肿瘤组织透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构变化及心、肝、脾、肺、肾组织病理检查。结果一、转染复合物的形态观察、粒径与zeta电位测定透射电镜下观察脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN复合物呈圆形或类圆形颗粒,脂质体-survivin-asODN复合物的粒径大于PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径,差异有统计学意义(t=7.874,P=0.000,P＜0.001),而其zeta电位低于PAMAM-survivin-asODN复合物,差异有统计学意义(t=4.158,P=0.002,P＜0.01)。二、转染复合物的核酸载药率,包封率及体外基因释放测定脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN复合物之间包封率差异无统计学意义(t=0.178,P=0.863,P＞0.05),载药率差异无统计学意义(t=0.582,P=0.573,P＞0.05)。脂质体-survivin-asODN复合物24～48 h内有爆破释放,然后迅速下降,6 d时已检测不到DNA释放;PAMAM-survivin-asODN复合物24～48h内有爆破释放,然后缓慢下降,平稳持续14 d以上,表明PAMAM对DNA具有缓释现象。叁、细胞转染及其转染效率转染24 h后,荧光显微镜下观察两组细胞内均可见绿色荧光。48 h可获得最高转染效率,脂质体组细胞内的荧光强度(46.46±9.84)低于PAMAM组细胞(63.90±10.29),两者之间差异有统计学意义(t=2.739,P=0.025,P＜0.05)。四、survivin反义寡核苷酸对SW620细胞的生长抑制效应MTT法检测各组细胞生长抑制率:survivin-asODN作用的两组与空白对照组相比,细胞生长抑制率差异有统计学意义,经survivin-asODN作用后的细胞生长受到抑制(P＜0.001)。经PAMAM-survivin-asODN复合物和脂质体-survivin-asODN复合物处理的细胞均受到抑制,PAMAM-survivin-asODN复合物的作用更强,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05)。五、SW620细胞survivinmRNA的表达对照组和survivin-asODN处理组均在191bp处出现特异性的survivin条带。空白对照组的SW620细胞survivin mRNA为(0.85±0.06),脂质体-survivin-asODN组和PAMAM-survivin-asODN组分别为(0.56±0.10)和(0.36±0.10),两者均显着低于空白对照组(P＜0.001)。PAMAM-survivin-asODN组survivinmRNA显着低于脂质体-survivin-asOD组,差异有统计学意义(P＜0.01)。六、SW620细胞survivin蛋白的表达Survivin蛋白在SW620细胞中有高度表达。空白对照组的SW620细胞survivin蛋白表达为(72.78±6.79),脂质体-survivin-asODN组和PAMAM-survivin-asODN组分别为(35.02±6.28)和(25.36±7.15),两者均显着低于空白对照组(P＜0.001)。PAMAM-survivin-asODN组survivin蛋白显着低于脂质体-survivin-asODN组(P＜0.05)。差异有统计学意义(P＜0.05)。七、Survivin-asOON对SW620细胞凋亡率的影响流式细胞仪检测各组SW620细胞凋亡率:经脂质体-survivin-asODN转染复合物和PAMAM-survivin-asODN转染复合物处理SW620细胞48h后,与空白对照组相比,survivinASODN组在Gl期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。PAMAM-survivin-asODN复合物的作用更强,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05)。八、结直肠癌SW620细胞裸鼠模型建立全部裸鼠于腹部皮下接种人结直肠癌细胞系SW620单细胞悬液后均存活并有肿瘤形成,接种点无红肿、破溃,成瘤时间为(15.7±1.14)d。九、Survivin-asODN对结直肠癌SW620细胞裸鼠模型的体内抑瘤效应治疗开始前,阴性对照组、脂质体-survivin-asODN组和PAMAM-survivin-asODN组之间肿瘤体积比较,差异无统计学意义(F=0.229,P=0.798,P＞0.05)。治疗结束时,脂质体-survivin-asODN组肿瘤体积低于治疗前(t=7.918,P=0.000,P＜0.001),PAMAM-survivin-asODN组肿瘤体积低于治疗前(t=11.854,P=0.000,P＜0.001),差异显着。两治疗组与阴性对照组叁组间肿瘤体积比较,差异有显着性(F=69.674,P=0.000,P＜0.001)。组间两两比较PAMAM组与脂质体组相比存在显着性差异(P＜0.005),证实PAMAM有更好的抑瘤效果。治疗结束后处死裸鼠,剥离肿瘤测重量,脂质体-survivin-asODN组和PAMAM-survivin-asODN组肿瘤重量较阴性对照组有不同程度的降低,差异具有统计学意义(P＜0.001)。PAMAM-survivin-asODN治疗组肿瘤重量与脂质体-survivin-asODN治疗组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05)。抑瘤率测定可见PAMAM-survivin-asODN治疗组抑瘤率明显高于脂质体-survivin-asODN治疗组,差异在统计学上均有显着性意义(t=48.550,P=0.000,P＜0.01)。十、裸鼠移植瘤细胞survivin蛋白表达Survivin蛋白在裸鼠移植瘤细胞中有高度表达。阴性对照组与脂质体-survivin-asODN复合物组、PAMAM-survivinaSODN复合物组比较差异有统计学意义(P＜0.05);PAMAM组survivin蛋白低于脂质体组,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05)。十一、裸鼠移植瘤细胞survivin mRNA表达通过RT-PCR检测裸鼠移植瘤细胞对照组和survivin-asODN处理组均在191bp处出现特异性的survivin条带。空白对照组细胞的survivin mRNA为(0.85±0.06),脂质体-survivin-asODN组和PAMAM-survivin-asODN组分别为(0.56±0.10)和(0.36±0.10),两者均显着低于空白对照组(P＜0.001)。PAMAM-survivin-asODN组survivin mRNA显着低于脂质体-survivin-asOD组,差异有统计学意义(P＜0.01)。十二、裸鼠移植瘤细胞的电镜观察透射电镜下见基因治疗组细胞体皱缩,细胞膜微绒毛消失。细胞核膜发生皱缩或消失,有的胞核核发生碎裂,染色质浓缩、边聚,沿核膜下排列成不同形状和大小的块状,或发生断裂,胞浆内可见多个电子密度增强的核碎片,致密的凋亡小体亦较多见,部分细胞出现细胞器溶解等坏死征象。十叁、survivin-asODN转染复合物治疗后裸鼠重要脏器的组织学观察为了解PAMAM-survivin-asODN和脂质体-survivin-asODN转染复合物对裸鼠有无毒副作用,取治疗组小裸鼠心、肝、脾、肾、肺等重要脏器行常规病理检查未见明显异常。结论1.本实验合成了PAMAM-survivin-asODN转染复合物,呈圆形或类圆形纳米颗粒,具有粒径小,zeta电位高的特点;2.PAMAM-survivin-asODN转染复合物与脂质体-survivin-asODN的基因包封率、载药率无差异,但对所载基因有缓慢释放作用;3.PAMAM-survivin-asODN转染复合物中DNA电荷被完全中和,与PAMAM形成稳定复合物。PAMAM对survivin-asODN具有保护作用,可抵御核酸酶的降解作用;4.PAMAM可将survivin-asODN高效转染入SW620细胞内,其转染效率高于脂质体;5.Survivin在SW620细胞中有高度表达,PAMAM介导转染针对survivin mRNA的反义寡核苷酸可在mRNA及蛋白两个水平上有效地降低SW620细胞内survivin的表达;6.经PAMAM-survivin-asODN与脂质体-survivin-asODN转染复合物处理的SW620细胞的增殖均受到抑制,survivin-asODN的作用机制为诱导靶细胞的凋亡:7.Survivin-asODN对结直肠癌裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用,PAMAM-survivin-asODN转染复合物较脂质体-survivin-asODN转染复合物具有更强的抗肿瘤作用;8.Survivin在裸鼠移植瘤细胞中有高度表达,PAMAM介导转染针对survivinmRNA的反义寡核苷酸可在mRNA及蛋白两个水平上有效地降低裸鼠移植瘤细胞内survivin的表达;9.survivin-asODN对裸鼠移植瘤细胞的作用机制为诱导靶细胞的凋亡;10.PAMAM介导survivin-asODN治疗后,荷瘤裸鼠心、肺、肝、肾、小肠等器官无明显组织学变化,提示该系统对荷瘤裸鼠无系统毒副作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2009-04-15）
厉周,黄宗海,崔大祥,姚航,俞金龙[6]（2008）在《聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用》一文中研究指出目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-ASODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果PAMAM-survivin-ASODN复合物的粒径小于脂质体-survivinASODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-ASODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组无显着差异。PAMAM对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。结论PAMAM能将survivin-ASODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2008年11期）
孔淑仪[7]（2008）在《甲氨蝶呤聚酰胺—胺树枝状聚合物纳米给药系统的肿瘤靶向研究》一文中研究指出聚酰胺-胺树枝状聚合物(Polyamidoamine dendrimer,PAMAM)是一类应用广泛的纳米级树枝状大分子材料。它具有确切的组成与叁维结构,分子量单一,无免疫原性,在使用剂量范围内无毒性.这些特点,使PAMAM在药物传释系统研究中,具有独特的研究价值。利用PAMAM内部空腔结构,可以包埋生物活性分子;通过化学反应则能够使生物活性分子或靶向基团与PAMAM表面高密度的官能团相连接,构筑一种纳米级的给药系统。MTX是干扰核酸合成的抗代谢药物,在恶性肿瘤的化疗过程中被广泛运用。但由于MTX临床上应用时间较长,不少癌细胞对它已产生耐药性,而且不良反应较多,因此其临床应用受到越来越多的限制。本研究采用第四代(G4)和第五代(G5)PAMAM树枝状聚合物作为抗肿瘤药物纳米载体,以甲氨蝶呤为模型药物,一方面通过静电作用最大限度地将甲氨蝶呤复合于PAMAM表面,制备载体/药物复合物;另一方面通过化学反应将甲氨蝶呤共价连接于PAMAM表面,构建载体-药物偶联物,并利用PEG(5000Da)对偶联物进行结构修饰。从而延长甲氨蝶呤的生物半衰期并通过EPR效应增加药物在肿瘤组织的富集。为树枝状聚合物应用于药物传释系统提供理论和实验基础。本文制备了PAMAM/MTX复合物,考察搅拌时间及制备介质pH对MTX复合量的影响,确定搅拌时间为2h,制备介质为去离子水。每分子的PAMAM_(G4)和PAMAM_(G5)分别最多能复合22、41个MTX分子。复合物的体外释药研究显示其在10mM Tris-HCl(pH 7.4)缓冲液中,120h累积释放百分率不超过65%:但释放介质的离子强度影响复合物中药物的体外释放,在含有0.15M NaCl的Tris-HCl(pH 7.4)缓冲液中,6h的累积释放百分率超过90%。采用不同投料比合成PAMAM-PEG,其中PAMAM_(G4)-PEG连接的PEG分子数分别为11、21、29,PAMAM_(G5)-PEG连接的PEG分子数分别为16、30、37。经过PEG修饰的PAMAM对红细胞的溶血作用和KB细胞的细胞毒性均有所降低。在制备PAMAM/MTX复合物的基础上,同法制备PAMAM-PEG/MTX复合物,每分子PAMAM_(G4)-PEG_(11)、PAMAM_(G4)-PEG_(21)、PAMAM_(G4)-PEG_(29)分别最多能复合34、45和77个MTX分子,每分子PAMAM_(G5)-PEG_16)、PAMAM_(G5)-PEG_(30)、PAMAM_(G5)-PEG_(37)分别最多能复合53、122和140个MTX分子。PAMAM-PEG/MTX复合物在低离子强度的介质中具有一定的缓释作用,但随着释放介质离子强度的增大,缓释作用减弱甚至消失。稳定性实验表明,PAMAM/MTX及PAMAM-PEG/MTX复合物在冰箱(3-5℃)及室温(20-25℃)条件下储存3个月,外观基本保持不变,MTX含量略有下降,释放行为与放置前基本一致。建立了反相高效液相色谱法测定血浆中甲氨蝶呤的含量,高氯酸直接沉淀法处理血浆样品,回收率和精密度均符合要求。PAMAM/MTX和PAMAM-PEG/MTX复合物经大鼠单剂量尾静脉注射给药后,t_(1/2)和AUC较注射剂组显着延长(p＜0.01),其中PAMAM_(G4)/MTX、PAMAM_(G5)/MTX复合物的t_(1/2)分别为原药组的1.86、1.94倍,AUC为原药组的1.31、1.72倍;PAMAMG4-PEG_(11)/MTX、PAMAM_(G4)-PEG_(21)/MTX、PAMAM_(G4)-PEG_(29)/MTX复合物的t_(1/2)分别为原药组的2.00、2.07、2.06倍,AUC为原药组的2.03、2.29、2.43倍;PAMAM_(G5)-PEG_(16)/MTX、PAMAM_(G5)-PEG_(30)/MTX、PAMAM_(G5)-PEG_(37)/MTX复合物的t_(1/2)分别为原药组的2.07、2.20、2.52倍,AUC为原药组的2.81、4.19、4.99倍。合成了PAMAM-MTX及PEG-PAMAM-MTX偶联物,采用核磁共振及红外光谱等手段进行了结构表征,~1H-NMR分析显示平均每分子PAMAM连接36分子MTX和8分子PEG。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),考察了两种偶联物对KB细胞的细胞毒性,与原药相比,偶联物对KB细胞的杀伤作用显着降低。其中,PAMAM_(G4)-MTX、PEG-PAMAM_(G4)-MTX偶联物及MTX的IC_(50)值分别为24.8、29.9、5.3μM。大鼠单剂量尾静脉注射~(125)I标记的两种偶联物,发现其具有明显的长循环作用。其中,在PAMAM-MTX及PEG-PAMAM-MTX大鼠体内生物半衰期分别为20.58、24.93h,较原蓟(1.12h)显着延长(p＜0.01),AUC分别为70.16、135.80μg-h/mL,较原药(7.20μg-h/mL)显着增大(p＜0.01)。S-180荷瘤小鼠的体内抑瘤实验显示,相同剂量给药后PEG-PAMAM_(G4)-MTX、PAMAM_(G4)-MTX偶联物和PAMAM_(G4)/MTX、PAMAM_(G4)-PEG_(29)/MTX复合物的抑瘤率分别为69.74%、46.41%和44.33%、52.63%,表明PEG修饰的PAMAM_(G4)-MTX偶联物具有最强抗S-180实体瘤活性。(本文来源于《复旦大学》期刊2008-05-01）
赵维明,修有成,徐勇,王燕铭,程兆康[8]（2007）在《阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导STAT3-shRNA对前列腺癌生长的抑制作用》一文中研究指出目的探讨第5代阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D)作为小发卡RNA (shRNA)真核表达质粒的载体,进行前列腺癌RNA干扰基因治疗的可行性。方法根据增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)cDNA序列结构,分别设计构建表达EGFP mRNA、STAT3 mRNA的特异shRNA真核表达质粒pSilencing 4.1-EGFP-shRNA和pSilencing 4.1- STAT3-shRNA。在体外以G5-PAMAM-D为载体,将质粒pEGFP-C1和pSilencing 4.1-EGFP-shRNA共转染前列腺癌细胞PC-3、22Rvl,通过观察EGFP表达检测干扰效果以及转染效率;然后,以同样的方式将pSilencing 4.1-STAT3-shRNA转入前列腺癌细胞系,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞生长的抑制作用,丫啶橙染色观察细胞凋亡。制作前列腺癌小鼠模型,将G5-PAMAM-D与质粒pSilencing 4.1-STAT3-shRNA的混合物注射人荷瘤鼠肿瘤内,观察对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验表明,G5-PAMAM-D可将pSilencing 4.1.EGFP-shRNA转入前列腺癌细胞,明显沉默EGFP的表达,并且G5-PAMAM-D可将pSilencing 4.1-STAT3-shRNA有效转入前列腺癌细胞中,明显抑制肿瘤细胞的生长,增加细胞的凋亡。体内实验证明,G5-PAMAM-D/pSilencing 4.1-STAT3-shRNA可抑制荷瘤鼠前列腺癌的生长,而各对照组肿瘤生长无明显抑制。结论G5-PAMAM-D作为基因载体,可将shRNA的真核表达质粒在体内外转入前列腺癌组织细胞,并有效表达shRNA;G5-PAMAM-D可能成为应用前景广阔的小干扰RNA(siRNA)的载体。(本文来源于《中华肿瘤杂志》期刊2007年08期）
章昌华,胡剑青,涂伟萍[9]（2006）在《树枝状聚酰胺胺与线形聚合物共混的研究》一文中研究指出介绍了聚酰胺胺(PAMAM)树状分子的独特结构和性能,综述了国内外有关聚酰胺胺树状分子与线形聚合物共混的研究进展。参考文献24篇,包括树枝状聚酰胺胺的分子结构,它的性能及其同PHE-MA、PVC、PVC和PVAC,尼龙6、聚马来酸酐、聚甲基乙烯基醚、环氧树脂等共混物。(本文来源于《热固性树脂》期刊2006年06期）
康文英,王鸿利,王学锋,王红,王从珠[10]（2003）在《聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导人凝血因子Ⅷ的体外高效稳定表达》一文中研究指出目的 应用纳米材料聚酰胺 胺型 (PAMAM)树枝状聚合物 逆病毒基础的质粒载体复合体 ,在表达水平、持续时间和细胞毒性叁方面进行血友病A基因治疗的体外研究。方法 PAMAM树枝状聚合物与含B区缺失 (76 0aa～ 16 39aa)人FⅧcDNA(FⅧBDcDNA)的以逆病毒为框架的重组表达质粒载体pLNC FⅧBD形成复合体后 ,转染NIH3T3细胞系 ,于转染后第 2 ,5 ,10 ,15 ,30d留取细胞培养上清 ,分别采用一期法和ELISA法检测其中人FⅧ的凝血活性 (FⅧ∶C)和抗原含量 (FⅧ∶Ag) ,并应用RT PCR方法检测细胞中FⅧBDcDNA的转录 ,以细胞生长抑制率来表示PAMAM的细胞毒性。结果 PAMAM载体介导的人FⅧ的体外表达可持续 30d ,2 4h内每ml细胞上清中 10 6 细胞表达FⅧ∶C平均为 0 .92 9U ,FⅧ∶Ag平均为 0 .188μg ,期间FⅧ表达未见降低 ;PAMAM的细胞生长抑制率为 5 .32 %。 结论 PAMAM能够有效介导逆病毒基础的质粒载体pLNC FⅧBD转染靶细胞 ,并维持高效稳定表达 ,且PAMAM的细胞毒性较低。(本文来源于《中华血液学杂志》期刊2003年09期）
聚酰胺胺型树枝状聚合物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:提出了一种新型的糖肽富集试剂,将不同代数的含高密度N端的聚酰胺-胺(PAMAM)型树枝状聚合物固定到溴化氰活化的琼脂糖凝胶上用于糖肽的高效分离。方法:先用标准糖蛋白对试剂的富集条件进行优化,包括是否使用还原剂、不同酸度的结合溶液、不同洗脱液、不同试剂比例,将优化后的方法用于鼠脑裂解液糖肽的富集。结果与结论:将优化的方法用于鼠脑糖肽的富集,用第6代PAMAM鉴定到的糖肽数目是采用商业化酰肼材料的3倍,该试剂对糖肽富集的高选择性和高重现性为糖蛋白组学研究提供了新的工具。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
聚酰胺胺型树枝状聚合物论文参考文献
[1].胡海梅,李晓琳,梁双红.非病毒基因载体聚酰胺-胺型树枝状大分子-透明质酸聚合物体外细胞毒性[J].中国药理学与毒理学杂志.2016
[2].邓珊珊,曹琦琛,马成,白海红,任晓君.一种基于聚酰胺-胺型树枝状聚合物富集糖肽的新策略[J].生物技术通讯.2014
[3].吴斌,戴建军,张廷宇,张树山,吴彩凤.纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响[J].中国兽医学报.2013
[4].厉周,方素珍,韩帅,崔大祥,蔡寨.聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长的作用[J].中国组织工程研究.2012
[5].厉周.聚酰胺—胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸治疗结直肠癌的实验研究[D].南方医科大学.2009
[6].厉周,黄宗海,崔大祥,姚航,俞金龙.聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用[J].南方医科大学学报.2008
[7].孔淑仪.甲氨蝶呤聚酰胺—胺树枝状聚合物纳米给药系统的肿瘤靶向研究[D].复旦大学.2008
[8].赵维明,修有成,徐勇,王燕铭,程兆康.阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导STAT3-shRNA对前列腺癌生长的抑制作用[J].中华肿瘤杂志.2007
[9].章昌华,胡剑青,涂伟萍.树枝状聚酰胺胺与线形聚合物共混的研究[J].热固性树脂.2006
[10].康文英,王鸿利,王学锋,王红,王从珠.聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导人凝血因子Ⅷ的体外高效稳定表达[J].中华血液学杂志.2003
标签：聚酰胺-胺型树枝状大分子; 透明质酸; 细胞毒性; 肿瘤细胞;