华根霉脂肪酶有机相酯合成活性的重塑

华根霉脂肪酶有机相酯合成活性的重塑

论文摘要

研究了具有较高酯合成活性的华根霉膜相关脂肪酶及其沉淀酶蛋白的重折叠处理过程,发现膜成分及表面活性剂可能是影响其活性的关键因素.进一步考察了影响异源表达的可溶性华根霉脂肪酶r27RCL酯合成活性重塑的关键因子及作用阶段.研究结果表明,表面活性剂对脂肪酶的酯合成活性具有关键影响,直接添加表面活性剂可使酯合成活性显著提高.在7种不同表面活性剂中,两性离子表面活性剂LPC14将r27RCL的酯合成活性提高了5. 75倍.分子动力学模拟结果表明,在有机相反应中,表面活性剂的添加使脂肪酶催化三联体之间的氢键作用力得到加强,从而提高了脂肪酶的有机相酯合成能力.

论文目录

  • 1实验部分
  •   1.1试剂与仪器
  •   1.2实验过程
  •     1.2.1培养基与培养条件
  •     1.2.2华根霉脂肪酶的提取
  •     1.2.3华根霉脂肪酶溶液各组分的分离
  •     1.2.4华根霉脂肪酶重折叠处理
  •     1.2.5脂肪酶样品的冻干处理
  •     1.2.6脂肪酶活性测定
  •     1.2.7远紫外圆二色光谱 (Far-UV CD) 分析及分子动力学模拟
  • 2结果与讨论
  •   2.1华根霉脂肪酶的提取、分离及活性测定
  •   2.2模拟膜环境对异源表达华根霉脂肪酶r27RCL活性的影响
  •   2.3不同表面活性剂对脂肪酶催化活性的影响
  •   2.4表面活性剂促进脂肪酶酯合成活性机制的探索
  •     2.4.1远紫外圆二色光谱分析
  •     2.4.2脂肪酶r27RCL的分子动力学模拟分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张璋,王栋,王晓雷,徐岩

    关键词: 表面活性剂,脂肪酶,非水相催化,酯合成活性重塑,分子动力学模拟

    来源: 高等学校化学学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工

    单位: 工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院酿酒科学与酶技术中心生物工程学院,江南大学产业技术研究院,微生物代谢国家重点实验室代谢与发育科学国际合作联合实验室上海交通大学生命科学技术学院

    基金: 国家自然科学基金(批准号:31271920),国家重点研究发展计划项目(批准号:2016YFD0400503),江苏高校品牌专业建设工程资助项目(TAPP),江苏省高校品牌特色专业建设工程(批准号:PPZY2015A056)资助~~

    分类号: TQ225.24

    页码: 747-754

    总页数: 8

    文件大小: 595K

    下载量: 127

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