导读:本文包含了硝酸还原酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:硝酸,基因,酵母,丁酸,硝酸盐,桑树,甘蓝。
硝酸还原酶基因论文文献综述
兰天茹[1]（2019）在《基于关联分析挖掘玉米硝酸还原酶基因ZmNR2功能位点》一文中研究指出氮代谢是高等植物生长发育的基本物质代谢之一,硝酸还原酶(Nitrate reductase,NR)是氮代谢的关键酶,负责氮循环的初始还原步骤。硝酸还原酶活性(Nitrate reductase activity,NRA)与硝酸盐积累量关系密切,直接影响到植物的氮效率。因此,从分子水平分析玉米核心自交系硝酸还原酶基因的遗传规律将有利于加快育种进程、提高育种效率。本研究以实验室构建的126个玉米核心自交系组成的关联作图群体为试验材料,鉴定并评估了玉米苗期硝酸还原酶活性等8个氮效率相关表型性状,结合126份自交系的群体结构和硝酸还原酶基因ZmNR2的序列多态性开展候选基因关联分析,旨在发掘与氮高效性状相关的优异等位变异及氮高效单倍型。主要的研究结果如下:1、本研究鉴定了关联群体的硝酸还原酶活性、根干重、茎干重、总干重、全株长、主根长、叶绿素SPAD值和根冠比8个氮效率相关性状。发现该群体各性状均呈连续正态分布,表现出不同程度的变异,遗传力在60.03%-82.21%之间。其中硝酸还原酶活性的变异幅度较大,遗传力较低,受环境影响较大。相关性分析结果表明在E1和E2环境下NRA和主根长、根干重以及总干重之间均呈显着正相关关系。2、通过ZmNR2基因的序列多态性分析,发现在113份玉米自交系中共检测到58个多态性位点,其中包括50个SNPs变异(平均每62 bp一个)和8个Indels变异(平均每389 bp一个)。该基因SNPs位点主要分布在外显子区域,Indels位点主要分布在内含子区域。连锁不平衡分析显示,在ZmNR2基因的序列上分布着一些明显的LD结构。该基因的连锁不平衡随距离的增加而在250bp左右开始快速衰退,并在1000 bp左右衰减至0.1水平以下。3、使用TASSEL软件中的3种统计模型对所有性状和多态性位点进行关联分析,分别包括一般线性模型(GLM)、考虑群体结构Q矩阵的一般线性模型(GLM+Q)和混合线性模型(MLM(Q+K))。ZmNR2基因在3种模型中共检测到38个关联显着的多态性位点,包括30个SNPs和8个Indels。其中共有8个多态性位点在TASSEL的叁种统计模型下都与对应性状显着关联;共有6个多态性位点在P≤0.01下与对应性状显着关联。4、基于已获得的6个显着关联SNPs/Indels位点共划分出4种单倍型(MAF≥0.05)。分析结果表明,单倍型Hap1、Hap2、Hap3、Hap4分别具有3、3、1和1个优异等位变异。各单倍型硝酸还原酶活性T检验结果表明,Hap1和Hap4平均值差异显着(P<0.05)。由此,本研究推断Hap1为氮高效单倍型,Hap4为氮低效单倍型。5、利用田间产量表型鉴定试验和ZmNR2基因表达量分析进一步验证氮高效单倍型Hap1和氮低效单倍型Hap4。结果表明,氮高效单倍型Hap1的产量表现显着高于氮低效型单倍型Hap4;Hap1的基因表达量显着高于Hap4。进一步证实Hap1的自交系中蕴含丰富的增效等位基因变异,S633-T和S1337-1可能是重要的优异等位基因组合。这些变异对氮素营养利用的多条调控途径有共同响应,可应用于分子标记辅助选择改良玉米的氮高效利用效率。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
周炎,杨惠娟,史宏志,王景,张玉宁[2]（2019）在《烟草硝酸还原酶基因NIA1启动子互作蛋白的筛选》一文中研究指出硝酸还原酶是植物氮同化过程中的关键酶和限速酶。为更好地调控硝酸还原酶基因的表达,本实验克隆了烟草硝酸还原酶基因NIA1上游938bp的启动子区域,构建了烟草cDNA基因表达文库,应用酵母单杂交技术筛选NIA1启动子序列互作蛋白。通过序列测定和生物信息学分析,共筛选出9个互作蛋白cDNA。其中,功能不明确的预测蛋白7个,具有明确功能信息的蛋白2个,分别为含有CRM结构域的CFM3蛋白(No. 71),和烟草亚硫酸盐氧化酶类似蛋白Sul?te oxidase-like蛋白(No. 126)。这些蛋白均为NIA1启动子序列互作蛋白,可能作为转录因子参与NIA1基因的转录调控过程。(本文来源于《中国烟草学报》期刊2019年01期）
潘玲玲,王秀峰,李强,杨凤娟,魏珉[3]（2017）在《黄瓜硝酸还原酶基因(CsNR)序列分析及正反义表达载体的构建》一文中研究指出为进一步研究CsNR的作用机制,从黄瓜幼叶中克隆获得硝酸还原酶基因编码区序列(CDS)全长和片段(CsNR;EC1.6.6.1),并运用生物学软件对该基因进行序列分析。其中CDS全长2 748 bp,编码915个氨基酸;CDS片段360 bp。CDS全长和p ROKⅡ经Kpn I单酶切和连接,构建了CsNR正义表达载体;CDS片段和p ROKⅡ经Kpn I和Sac I双酶切,构建了CsNR反义表达载体。通过与其他高等植物NR蛋白进行同源性比对分析,结果发现,CsNR基因的氨基酸序列与甜瓜、烟草、拟南芥、油菜NR基因编码的氨基酸序列高度同源,其中与甜瓜NR蛋白之间同源性最高,为98.25%。(本文来源于《天津农业科学》期刊2017年07期）
孙敏红,卢晓鹏,曹雄军,李静,熊江[4]（2017）在《不同氮素形态培养对枳橙幼苗硝酸还原酶活性及相关基因表达的影响》一文中研究指出【目的】进一步探讨枳橙对氮素吸收利用机制,为柑橘生产上提高氮素利用效率和科学施肥提供科学依据。【方法】以枳橙为材料,采用水培方法,在Hoagland配方的基础上进行调节,研究了不同形态氮素配比对枳橙幼苗硝酸还原酶(NR)活性变化及相关基因表达量的影响。【结果】幼苗叶片及根系NR活性均随着培养时间的延长而增加,且叶片NR活性高于根系。其中2号(NO_3~-∶NH_4~+=7∶3)和3号(NO_3~-∶NH_4~+=5∶5)处理的叶片酶活最高;1号(NO_3~-∶NH_4~+=10∶0)和2号(NO_3~-∶NH_4~+=7∶3)处理根系的NR活性显着高于其他处理;进一步研究NR相关基因表达情况表明:3个基因(CitNia1、CitNia2、CitNia OA)在不同处理的枳橙幼苗体内均有表达,其中CitNia1和CitNia2分别是根系和叶片NR相关主效基因,2者均受到NO_3~-、NH_4~+配比诱导,且3号处理(NO_3~-∶NH_4~+=5∶5)下表达量最高。【结论】枳橙幼苗硝态氮代谢的主要部位为叶片,且CitNia2是主效基因,通过调节铵硝比例可以促进其表达。(本文来源于《果树学报》期刊2017年04期）
王茜龄,余亚圣,杨艳,李军,刘长英[5]（2016）在《桑树硝酸还原酶基因MaNR的克隆及其表达分析》一文中研究指出【目的】以桑树栽培品种桂优62号为材料,克隆桑树硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)基因全长c DNA和DNA序列并分析其序列特征,在此基础上研究桑树硝酸还原酶基因在桑树细胞脱分化和分化过程中的表达特征以及影响因素,为进一步阐述硝酸还原酶在桑树生长发育中的作用机制奠定基础。【方法】基于单倍体川桑(Morus notabilis Schneid)基因组数据(http://morus.swu.edu.cn/morusdb)注释的scaffold570序列设计特异引物,硝酸钾处理桑树叶片48 h后使用RNAiso Plus(TaKaRa)和改良CTAB法提取总RNA及基因组DNA,分别以cDNA和DNA为模板,用RT-PCR法克隆获得桑树NR全长cDNA和DNA序列,运用生物信息学手段对推定的氨基酸序列进行分析。以桑胚轴为外植体,在无菌条件下,接种在不同氮源、生长调节物质的培养基中,通过桑树胚轴离体再生过程和real-time PCR方法研究硝酸还原酶基因在离体再生过程中的表达差异以及不同氮源、生长调节物质对NR表达的影响。【结果】克隆获得的桑树NR全长CDS序列,长2 730 bp,编码909个氨基酸,推导的蛋白质分子量为102.84 kD,等电点为6.76。基因组序列长5 142 bp,包含5个外显子和4个内含子,具有完整的5个结构域。通过氨基酸序列比对发现,其序列高度保守,与川桑NR序列同源性达95%,与蔷薇科果树NR序列同源性达78%。聚类分析表明,单子叶植物聚为一组,桑树与蔷薇科果树聚为一组。Gen Bank登录号分别为KF992020.1和KF992021.1。NR在桑根中表达量最高,叶中表达次之,茎中表达最少;谷氨酸显着提高NR在桑叶中的表达量,GA3显着提高NR在桑茎中的表达量。桑胚轴在单一的NH4+-N培养基中,不能被诱导出愈伤组织及丛生芽,在单一的NO3--N培养基中可以诱导出愈伤组织和丛生芽;但丛生芽继代培养在单一NH4+-N的培养基中和单一的NO3--N培养基中都可以生长。real-time PCR结果显示,NR在子叶和胚轴中的表达量高于胚根。桑胚轴在离体诱导愈伤组织和丛生芽分化过程中,NR的表达量逐渐增加,丛生芽形成后NR的表达量降低并趋于稳定。NH4+-N和NO3-N对NR在继代丛生芽中没有显着影响,谷氨酸对NR在继代丛生芽中有抑制作用。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
王茜龄,余亚圣,杨艳,李军,刘长英[6]（2016）在《桑树硝酸还原酶基因MaNR的克隆及其表达分析》一文中研究指出【目的】以桑树栽培品种桂优62号为材料,克隆桑树硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)基因全长cDNA和DNA序列并分析其序列特征,在此基础上研究桑树硝酸还原酶基因在桑树细胞脱分化和分化过程中的表达特征以及影响因素,为进一步阐述硝酸还原酶在桑树生长发育中的作用机制奠定基础。【方法】基于单倍体川桑(Morus notabilis Schneid)基因组数据(http://morus.swu.edu.cn/morusdb)注释的scaffold570序列设计特异引物,硝酸钾处理桑树叶片48 h后使用RNAiso Plus(TaKaRa)和改良CTAB法提取总RNA及基因组DNA,分别以cDNA和DNA为模板,用RT-PCR法克隆获得桑树NR全长cDNA和DNA序列,运用生物信息学手段对推定的氨基酸序列进行分析。以桑胚轴为外植体,在无菌条件下,接种在不同氮源、生长调节物质的培养基中,通过桑树胚轴离体再生过程和real-time PCR方法研究硝酸还原酶基因在离体再生过程中的表达差异以及不同氮源、生长调节物质对NR表达的影响。【结果】克隆获得的桑树NR全长CDS序列,长2730 bp,编码909个氨基酸,推导的蛋白质分子量为102.84 kD,等电点为6.76。基因组序列长5 142 bp,包含5个外显子和4个内含子,具有完整的5个结构域。通过氨基酸序列比对发现,其序列高度保守,与川桑NR序列同源性达95%,与蔷薇科果树NR序列同源性达78%。聚类分析表明,单子叶植物聚为一组,桑树与蔷薇科果树聚为一组。Gen Bank登录号分别为KF992020.1和KF992021.1。NR在桑根中表达量最高,叶中表达次之,茎中表达最少;谷氨酸显着提高NR在桑叶中的表达量,GA3显着提高NR在桑茎中的表达量。桑胚轴在单一的NH_4~+-N培养基中,不能被诱导出愈伤组织及丛生芽,在单一的NO3--N培养基中可以诱导出愈伤组织和丛生芽;但丛生芽继代培养在单一NH_4~+-N的培养基中和单一的NO_(3-)-N培养基中都可以生长。real-time PCR结果显示,NR在子叶和胚轴中的表达量高于胚根。桑胚轴在离体诱导愈伤组织和丛生芽分化过程中,NR的表达量逐渐增加,丛生芽形成后NR的表达量降低并趋于稳定。NH_4~+-N和NO_3-N对NR在继代丛生芽中没有显着影响,谷氨酸对NR在继代丛生芽中有抑制作用,随着培养时间延长,丛生芽的NR相对表达量都降低。【结论】获得了桑树NR全长cDNA序列。硝态氮是桑胚轴诱导的必需营养因子,NR的表达受到桑树细胞脱分化和分化影响。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
张正英,陈玉梁[7]（2016）在《甘蓝过量表达硝酸还原酶基因对硝酸盐积累的影响》一文中研究指出为探索过量表达硝酸还原酶基因对甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)硝酸盐积累的影响,以‘中甘11号’下胚轴为外植体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将烟草硝酸还原酶基因(NR)导入甘蓝,获得13株卡那霉素抗性植株。PCR和Southern blot检测证实,NR基因已经成功导入并整合到甘蓝的基因组。4个转基因株系硝酸盐质量分数明显低于非转基因供体株系,降幅为13.9%~23.0%。说明:将重组硝酸还原酶基因导入甘蓝且得到超量表达,创制低硝酸盐育种材料的方法可行。(本文来源于《西北农业学报》期刊2016年07期）
单宝来[8]（2016）在《葡萄硝酸还原酶基因在毕赤酵母中的表达及测定条件的优化》一文中研究指出硝酸还原酶(Nitrate reductase,NR)可以把硝酸盐通过氧化还原的作用还原成没有毒害作用的N02-。提高果蔬里硝酸还原酶的活性,可以使果蔬内硝酸盐含量下降,还可以提高氮肥利用率,提高其产量。另外,还有报道称,硝酸还原酶和籽粒的产量以及蛋白质的含量是呈正相关的,硝酸还原酶可以为育种中籽粒产量和蛋白含量筛选的生化指标。还有报道称NR和NO与植物抗逆性有关。了解植物硝酸还原酶催化亚硝酸盐还原成一氧化氮以及一氧化氮在植物逆境中的作用,可以为缓解胁迫条件下活性氧对植物体的伤害提供思路。本研究对来自于葡萄的硝酸还原酶VVNR1(GenbankNP_001268049.1)的氨基酸序列进行优化遗传密码子和核苷酸结构,然后利用PTDS法合成葡萄硝酸还原酶基因并重新命名为VVNR1I。然后,将PTDS法合成的VvNR1I基因转入毕赤酵母,并使其在毕赤酵母表达系统里分泌表达。试验设计将VvNR1I基因连接到克隆载体pPIC9K上,构建重组质粒命名为pYN7239。将重组质粒电击转化到毕赤酵母GS115中,甲醇诱导重组硝酸还原酶高效表达。最后,我们从培养基中添加KN03的浓度、培养时间、pH、金属离子等四方面,对葡萄硝酸还原酶测定条件进行优化。研究结果表明,葡萄硝酸还原酶VvNR1I的最佳培养时间为48 h。在48 h之前,随着培养时间增长,葡萄硝酸还原酶活性不断增强,48h达到最高峰,随后葡萄硝酸还原酶活性逐渐减弱。当pH值为6左右时,葡萄硝酸还原酶表现出最大活性。pH过高或过低时,对葡萄硝酸还原酶活性均有抑制作用。培养基中一定的硝酸钾浓度范围里,VvNR1I的活性会随着KN03浓度的增加而增强;当培养基中KN03浓度大于1%时,浓度在继续增加对葡萄硝酸还原酶活性影响不大。Mo6+对葡萄硝酸还原酶VvNR1I的活性促进作用比较明显,这可能与钼是硝酸还原酶活性和固氮酶等含钼酶类的重要组成成分有关。本研究构建了葡萄硝酸还原酶表达质粒,在毕赤酵母中进行异源表达,进而研究葡萄硝酸还原酶的最佳测定条件,为深入探究葡萄硝酸还原酶在葡萄的生长发育中氮素代谢、育种中籽粒产量和蛋白含量筛选、降低果实硝酸盐含量、植株抗逆性等功能提供研究基础。(本文来源于《南京农业大学》期刊2016-04-01）
田真,李敬蕊,王祥,吴晓蕾,宫彬彬[9]（2015）在《生菜硝酸还原酶基因的克隆及高氮水平下外源γ-氨基丁酸对其表达和叶片硝酸盐含量的影响》一文中研究指出硝酸还原酶(NR)是硝酸盐代谢的关键酶。该研究在成功克隆生菜NR基因的同时,进行了高氮水平下外源γ-氨基丁酸(GABA)对生菜叶片NR基因表达和NO3--N含量的研究。结果表明:(1)生菜NR基因(GenBank登录号为KP122207)序列长1 791bp,编码585个氨基酸残基,蛋白保守结构域含钼辅蛋白超家族、细胞色素b5超家族和FNR超家族;生菜NR基因与菊苣NR基因亲缘关系最近,序列一致性为93%,与烟草、甜菜、黄瓜、大豆等NR序列的一致性均在80%以上。(2)高氮水平下外源2.5mmol/L GABA处理生菜可诱导NR基因上调表达,并显着提高了生菜叶片NR、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸脱羧酶(GAD)活性和NH4+-N含量,降低了NO3--N、NO2--N含量;虽然NO3--N含量与NR、GAD、NiR活性、NO2--N、NH4+-N含量均呈显着相关关系,但与NR活性的相关系数最高且达极显着水平。研究认为,高氮水平下外源GABA可通过诱导NR基因上调表达、增强相关酶活性来影响无机氮代谢,从而降低了生菜叶片硝酸盐含量,其中NR在该过程中发挥着至关重要的作用,为生产中GABA的施用及降低叶菜类蔬菜硝酸盐含量提供了理论依据。(本文来源于《西北植物学报》期刊2015年06期）
武悦,徐良,王娟娟,龚义勤,谢洋[10]（2015）在《萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出[目的]为揭示萝卜(Raphanus sativus L.)硝酸还原酶基因(RsNR)的分子特征,降低硝酸盐含量,对萝卜RsNR基因进行分离与表达特性研究。[方法]基于本实验室转录组测序所得unigene序列分离RsNR基因cDNA,利用生物信息学方法进行序列分析,采用RT-qPCR方法对不同浓度KNO3(0、5、20、30和50mmol·L-1)和不同时间(0、4、8、12和24h)处理的萝卜中RsNR基因表达进行检测,并测定硝酸盐含量和硝酸还原酶活性(NRA)。[结果]获得萝卜RsNR基因cDNA序列(GenBank登录号:KM272859),开放阅读框为2742bp,编码913个氨基酸,RsNR与油菜NR基因(D38219)氨基酸序列相似性为95%。在30mmol·L-1NO-3-N诱导下,萝卜叶片和根中RsNR基因表达量最高。在30mmol·L-1NO-3-N诱导初期,叶片和根中RsNR表达量4h达到最大值,随后呈下降趋势;随着硝酸盐处理浓度升高,NRA、硝酸盐含量和RsNR基因表达量均呈先升后降趋势,0~4h内叶片和根中叁者均上升,4~24h内NRA和RsNR基因表达下降,而硝酸盐含量呈上升趋势。[结论]NO-3-N可能在转录水平上调控萝卜RsNR基因表达,进而影响其硝酸盐含量和NRA。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2015年02期）
硝酸还原酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
硝酸还原酶是植物氮同化过程中的关键酶和限速酶。为更好地调控硝酸还原酶基因的表达,本实验克隆了烟草硝酸还原酶基因NIA1上游938bp的启动子区域,构建了烟草cDNA基因表达文库,应用酵母单杂交技术筛选NIA1启动子序列互作蛋白。通过序列测定和生物信息学分析,共筛选出9个互作蛋白cDNA。其中,功能不明确的预测蛋白7个,具有明确功能信息的蛋白2个,分别为含有CRM结构域的CFM3蛋白(No. 71),和烟草亚硫酸盐氧化酶类似蛋白Sul?te oxidase-like蛋白(No. 126)。这些蛋白均为NIA1启动子序列互作蛋白,可能作为转录因子参与NIA1基因的转录调控过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
硝酸还原酶基因论文参考文献
[1].兰天茹.基于关联分析挖掘玉米硝酸还原酶基因ZmNR2功能位点[D].西北农林科技大学.2019
[2].周炎,杨惠娟,史宏志,王景,张玉宁.烟草硝酸还原酶基因NIA1启动子互作蛋白的筛选[J].中国烟草学报.2019
[3].潘玲玲,王秀峰,李强,杨凤娟,魏珉.黄瓜硝酸还原酶基因(CsNR)序列分析及正反义表达载体的构建[J].天津农业科学.2017
[4].孙敏红,卢晓鹏,曹雄军,李静,熊江.不同氮素形态培养对枳橙幼苗硝酸还原酶活性及相关基因表达的影响[J].果树学报.2017
[5].王茜龄,余亚圣,杨艳,李军,刘长英.桑树硝酸还原酶基因MaNR的克隆及其表达分析[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[6].王茜龄,余亚圣,杨艳,李军,刘长英.桑树硝酸还原酶基因MaNR的克隆及其表达分析[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[7].张正英,陈玉梁.甘蓝过量表达硝酸还原酶基因对硝酸盐积累的影响[J].西北农业学报.2016
[8].单宝来.葡萄硝酸还原酶基因在毕赤酵母中的表达及测定条件的优化[D].南京农业大学.2016
[9].田真,李敬蕊,王祥,吴晓蕾,宫彬彬.生菜硝酸还原酶基因的克隆及高氮水平下外源γ-氨基丁酸对其表达和叶片硝酸盐含量的影响[J].西北植物学报.2015
[10].武悦,徐良,王娟娟,龚义勤,谢洋.萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析[J].南京农业大学学报.2015
论文知识图
