地衣芽孢杆菌中木糖操纵子受葡萄糖胁迫的转录调控特性

论文摘要

木糖操纵子是芽孢杆菌中常用的表达元件,但目前对其认识只停留在静态机理层面,关于其在发酵过程中转录调控特性的研究还鲜见报道.利用qPCR技术探究在葡萄糖胁迫下地衣芽孢杆菌木糖诱导的木糖异构酶基因在发酵过程中的转录水平,考察菌体的生长状态,并通过二硝基水杨酸（DNS）法及高效液相色谱（High performance liquid chromatography,HPLC）法测定发酵过程中糖浓度变化.结果显示:在实验所设置的地衣芽孢杆菌代谢相对稳定的条件下,地衣芽孢杆菌木糖启动子转录强度在稳定期以前均呈增加的趋势,在对数生长末期或稳定前期转录强度最高,约是7 h时的14倍,随后呈下降趋势;进一步研究发现20-180 g/L葡萄糖浓度均对其表现为抑制,且抑制程度一致,当葡萄糖含量极少或者没有而木糖存在的情况下,启动子转录强度极高.本研究表明以地衣芽孢杆菌为宿主的木糖诱导系统在菌体对数生长末期诱导效果最佳;当环境中葡萄糖含量极少或者没有而木糖存在的情况下,更有利于启动子表达;结果对利用木糖诱导型重组地衣芽孢杆菌诱导发酵有一定的启示与指导意义.（图5表2参24）

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株和培养基
•   1.2 主要试剂和仪器
•   1.3 发酵过程糖浓度检测方法
•   1.4 地衣芽孢杆菌生长过程中葡萄糖含量的控制方法
•   1.5 不同生长阶段木糖操纵子转录强度的考察
•   1.6 葡萄糖胁迫下木糖操纵子转录强度的考察
•   1.7 qPCR检测木糖操纵子转录强度的方法
•   1.8 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 地衣芽孢杆菌基础培养条件的建立
•   2.2 木糖操纵子转录强度检测方法的建立
•   2.3 不同生长阶段木糖操纵子的转录强度
•   2.4 不同葡萄糖浓度胁迫条件下木糖操纵子的转录强度
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘翔,李由然,张梁,丁重阳,徐沙,顾正华,石贵阳

关键词: 地衣芽孢杆菌,木糖操纵子,实时荧光定量,葡萄糖胁迫,发酵过程,转录调控

来源: 应用与环境生物学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学

单位: 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学生物工程学院

基金: 国家“十三五”重点研发计划项目(2016YFD0401400),国家自然科学基金青年基金项目(31401674),江苏省科技项目(BE2016628)资助~~

分类号: Q933

DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.07042

页码: 695-701

总页数: 7

文件大小: 1200K

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