纳豆芽孢杆菌产纳豆激酶发酵工艺控制及纤溶酶分析

论文摘要

基于摇瓶发酵优化结果,在10 L发酵罐中研究了纳豆芽孢杆菌TN-02产纳豆激酶的发酵控制工艺,分析了发酵产物中纤溶酶的组分纯度。在放大发酵过程中,考察了培养温度和主要碳、氮源的流加补充对产酶的影响,并利用卡那霉素抗性基因kan对纳豆芽孢杆菌TN-02中的纳豆激酶基因aprN进行了部分替换和插入失活,获得了aprN突变的重组菌TN-021。结果表明,通过温度的阶段性控制和甘油、胰蛋白胨补料发酵,获得纳豆激酶的最高表达量为13 978.3 U/mL,是摇瓶发酵最高表达量的1.8倍;在菌株TN-021的摇瓶发酵产物中未检测到纤溶酶活力,证明了纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌TN-02发酵产物中唯一纤溶酶。研究结果为纳豆激酶高水平发酵放大工艺控制奠定了基础,同时为纳豆激酶的品质分析方法提供参考。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验菌种
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 培养基
•     1.1.4 仪器与设备
•   1.2 方法
•     1.2.1 种子液的制备
•     1.2.2 10 L发酵罐放大发酵控制
•     1.2.3 纳豆激酶活力测定的方法
•     1.2.4 甘油的测定方法
•     1.2.5 引物设计
•     1.2.6 纳豆激酶基因缺失重组菌的构建
•     1.2.7 重组菌的生长及纤溶酶活性的测定
• 2 结果与分析
•   2.1 温度对纳豆激酶发酵活力的影响
•   2.2 甘油补料发酵
•   2.3 胰蛋白胨补料发酵
•   2.4 纳豆激酶基因缺失重组菌的构建
•   2.5 纳豆激酶基因缺失对重组菌生长的影响
•   2.6 重组菌纤溶酶活的测定
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 葛芸,汤斌,李松

关键词: 纳豆芽孢杆菌,纳豆激酶,补料分批发酵,纤溶酶,基因失活

来源: 食品与发酵工业 2019年16期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 安徽工程大学生物与化学工程学院

分类号: TQ925

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.020703

页码: 176-180+186

总页数: 6

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