幽门螺旋杆菌lpp20-cagA融合基因在乳酸球菌中的表达及免疫原性研究

论文摘要

为研究载体疫苗对幽门螺旋杆菌（HP）感染的免疫保护作用,本实验应用无缝克隆技术将HP的两个候选抗原基因lpp20和cagA直接连接后克隆于表达载体pNZ8149中,构建重组表达质粒pNZ8149-lpp20-cagA。将重组质粒电转化乳酸球菌（L.lactis） NZ3900,构建了不含任何抗生素筛选标记的食品级原核表达系统pNZ8149-lpp20-cagA/NZ3900,经nisin诱导表达,得到的重组蛋白分子量约为50.3 ku。将以上得到的重组L.lactis灌胃免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法分别检测各组小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a及细胞因子IL-4、IFN-γ水平。结果显示,与对照组相比,实验组小鼠血清中IgG、IgG1、IL-4水平显著升高,表明重组蛋白Lpp20-CagA可以诱导良好的体液免疫应答;利用HP攻毒经重组菌灌胃免疫的小鼠,检测小鼠胃组织中HP的定植密度及脲酶活性,结果显示重组蛋白Lpp20-CagA在一定程度上可以减少HP在小鼠胃组织中的定植。本实验构建的载体疫苗在预防HP感染方面具有重要的应用价值。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•   1.2 重组表达载体的构建与鉴定
•   1.3 融合蛋白Lpp20-CagA的表达和反应原性研究
•   1.4 融合蛋白Lpp20-CagA的免疫原性研究
•   1.5 HP攻毒试验
•   1.6 数据分析
• 2 结果
•   2.1 p NZ8149-lpp20-cag A的构建与鉴定结果
•   2.2 融合蛋白Lpp20-CagA的反应原性鉴定
•   2.3 融合蛋白Lpp20-CagA的免疫原性鉴定
•   2.4 HP攻毒试验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵翠,赵文萱,赵福广

关键词: 幽门螺旋杆菌,乳酸球菌,融合蛋白,免疫原性

来源: 中国预防兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林农业大学生命科学学院

基金: 长春科技局重大科技攻关项目(14KG056)

分类号: S852.4

页码: 627-631

总页数: 5

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