骨髓间充质干细胞通过其分泌的外泌体促进髓核细胞增殖的实验研究

骨髓间充质干细胞通过其分泌的外泌体促进髓核细胞增殖的实验研究

论文摘要

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)旁分泌外泌体(exosomes)对髓核细胞的影响。方法:提取并培养骨髓间充质干细胞,通过Exo Quick提取细胞培养液中exosomes,用电镜、nanosight、免疫印迹(western blot)进行鉴定。采用细胞增殖计数(CCK-8)检测髓核细胞的增殖。通过RT-PCR法检测髓核细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及抑制物蛋白(TIMP-1)的mRNA水平。结果:成功提取大小在200nm以下BMSCs分泌的exosomes颗粒,其表达CD63及TSG101蛋白。BMSCs分泌的exosomes能够明显促髓核细胞的增殖,且受刺激后髓核细胞内MMP-1、MMP-3表达水平下降,而TIMP-1表达水平升高。结论:骨髓间充质干细胞来源exosomes能够促进髓核细胞增殖,降低髓核细胞的老化,缓解椎间盘组织的退化。

论文目录

  • 1 实验材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 骨髓间充质干细胞的提取及培养
  •   1.3 exosomes的提取
  •   1.4 外泌体的电镜检测
  •   1.6 qRT-PCR对基因的检测
  •   1.7 髓核细胞的增殖
  •   1.8 western blotting实验
  •   1.9 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 提取的BMSCs及其分泌exosomes的形态学观察
  •   2.2 exosomes的特征鉴定
  •   2.3 BMSCs-EXO促进髓核细胞的增殖且改变退变基因表达的情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘国科,林远方,郑晓斌,佘瑞涛,谭楚山,林惠卿

    关键词: 骨髓间充质干细胞,外泌体,髓核细胞,实验研究

    来源: 湖南中医杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 广东省深圳市中医院

    基金: 广东省深圳市医疗卫生三名工程“北京光明骨伤医院韦以宗教授中医整脊团队”资助项目(编号:SZSM201612059)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.16808/j.cnki.issn1003-7705.2019.04.064

    页码: 146-148

    总页数: 3

    文件大小: 2933K

    下载量: 218

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