猪流行性腹泻病毒JS2017株的分离鉴定及S基因序列分析

论文摘要

为了解江苏省某规模化猪场猪流行性腹泻病毒（PEDV）遗传变异情况,本试验采集腹泻仔猪小肠组织及肠道内容物,通过RT-PCR进行PEDV鉴定。将检测为阳性的病料组织经20μg/mL胰酶处理后,接种到Vero细胞中进行培养,将细胞培养物进行反复冻融后,收获病毒液,进行RT-PCR鉴定。采用分段重叠策略对其S基因进行全基因序列扩增,并在此基础上分析该毒株S基因的核苷酸同源性及遗传进化关系。结果显示,经RT-PCR鉴定,病料组织呈PEDV阳性,阳性病料接种Vero细胞盲传4代后,出现明显的细胞病变,表现为细胞合胞体病变,空泡化,最终裂解脱落。收获的病毒液经RT-PCR鉴定后,确认分离到1株PEDV,命名为JS2017株。核苷酸序列分析表明,JS2017株S基因序列与美国变异株OH1414、加拿大变异株ON-007、中国变异株PEDV-LYG和CH/PDS/2015位于同一进化分支,其核苷酸同源性高达99.0%以上;其中与中国变异株YC2014亲缘关系最近,核苷酸同源性为100.0%;与经典株CV777、DR13株同源性较低,亲缘关系较远。结果表明,本研究分离获得的JS2017毒株是一株PEDV地方流行变异毒株,与2014年中国江苏分离株（YC2014株）亲缘关系最密切,与当前猪流行性腹泻疫苗株亲缘关系较远。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 病料及细胞
•   1.2 方法
•     1.2.1 病料处理及阳性样品的确定
•     1.2.2 病毒分离培养与鉴定
•     1.2.3 引物设计与合成
•     1.2.4 PEDV S全基因的RT-PCR扩增与克隆
•     1.2.5 PEDV分离株S基因序列分析
• 2 结果
•   2.1 送检样品PEDV鉴定和S基因RT-PCR扩增结果
•   2.2 病毒分离培养与鉴定
•   2.3 JS2017株S基因全基因序列遗传进化分析
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 朱海侠

关键词: 猪流行性腹泻病毒,基因,变异毒株

来源: 中国畜牧兽医 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 福州大北农生物技术有限公司

基金: 2017年度福州市晋安区科技计划项目,福州大北农生物技术有限公司畜禽常见病免疫防控技术研究专项基金

分类号: S852.651

DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.02.030

页码: 582-589

总页数: 8

文件大小: 3150K

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