miR-129-5p通过调控PTPRZ1对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

论文摘要

目的探讨miR-129-5p在乳腺癌细胞中的表达及对细胞增殖和侵袭的影响及可能作用机制。方法通过双荧光素酶报告基因验证miR-129-5p与PTPRZ1的靶向关系。采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测miR-129-5p在乳腺癌细胞中的表达。QPCR和Western blotting检测miR-129-5p对PTPRZ1 mRNA和蛋白水平的影响。CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭。结果 miR-129-5p可抑制野生型PTPRZ1 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PTPRZ1 3’UTR的荧光素酶活性无影响。miR-129-5p在MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT549细胞中表达水平分别为0.38±0.10、0.70±0.14、0.49±0.10、0.78±0.12,明显低于在正常乳腺上皮细胞MCF-10A的1.0±0.10,差异有统计学意义（P<0. 05）。miR-129-5p mimics组miR-129-5p的表达水平升高,而PTPRZ1 mRNA和蛋白的表达明显下降。miR-129-5p mimics组24、48、72、96 h细胞增殖能力低于NC组;miR-129-5p mimics+PTPRZ1组24、48、72、96 h细胞增殖能力高于miR-129-5p mimics组。NC组、miR-129-5p mimics组、miR-129-5p mimics+PTPRZ1组细胞形成的集落数分别为286±47、118±32、307±58,差异有统计学意义（P<0.05）。NC组、miR-129-5p mimics组、miR-129-5p mimics+PTPRZ1组侵袭细胞数分别为132±65、51±17、142±78,差异有统计学意义（P<0.05）。结论致癌基因PTPRZ1是miR-129-5p的新靶点,靶向miR-129-5p的PTPRZ1可能是乳腺癌的潜在治疗靶点。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要试剂与仪器
•   1.2 细胞培养
•   1.3 实时荧光定量PCR（QPCR）
•   1.4 细胞转染
•   1.5 双荧光素酶报告实验
•   1.6 CCK-8实验
•   1.7 克隆形成实验
•   1.8 Transwell实验
•   1.9 Western blotting检测
•   1.10 统计学分析
• 2 结 果
•   2.1 PTPRZ1是miR-129-5p的靶基因
•   2.2 miR-129-5p和PTPRZ1表达
•   2.3 miR-129-5p靶向PTPRZ1抑制乳腺癌细胞增殖
•   2.4 miR-129-5p靶向PTPRZ1抑制乳腺癌细胞侵袭
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 雷海鸣,李剑,王立胜

关键词: 乳腺癌,增殖,侵袭

来源: 临床肿瘤学杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 江苏医药职业学院临床医学院,盐城市第三人民医院(东南大学医学院附属盐城医院)普外科

分类号: R737.9

页码: 1074-1078

总页数: 5

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