猪圆环病毒2型抗体胶体金免疫层析检测方法的建立

论文摘要

为建立便捷、快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的免疫层析方法,本研究利用G蛋白标记胶体金制备金标垫,以PCV2病毒样颗粒(VLPs)和兔Ig G分别作为检测线与质控线组装胶体金试纸条。检测结果显示,该试纸条与A型塞内卡病毒(SVA)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)等猪其它病毒抗体阳性血清无交叉反应,仅对PCV2抗体阳性血清具有高度的特异性;对PCV 2阳性血清最低检测限为1∶6 400稀释度,敏感性较高;批内、批间变异系数CV均小于5%,重复性较好。试纸条在4℃保存6个月,其特异性和敏感性无明显变化。对采集的100份临床血清样品进行检测,该方法与标准ELISA的总符合率为98%。表明本研究建立的PCV2抗体的胶体金免疫层析检测方法具有敏感、特异、稳定等特点,可以做为评价PCV2疫苗免疫效果及其感染筛查的检测方法。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•   1.2 PCV2 VLPs的制备与鉴定
•   1.3 胶体金的制备及质量检测
•   1.4 胶体金溶液最适p H与G蛋白最适标记量的选择
•   1.5 免疫胶体金的制备
•   1.6 PCV2抗体检测试纸条的制备及最佳蛋白包被量的确定
•   1.7 PCV2血清检测及结果判定
•   1.8 特异性试验
•   1.9 敏感性试验
•   1.1 0 重复性及稳定性试验
•   1.1 1 符合率试验
• 2 结果
•   2.1 PCV2 VLPs的制备与鉴定
•   2.2 胶体金的制备及质量检测
•   2.3 胶体金溶液最佳p H值与G蛋白最适标记量的选择
•   2.4 PCV2抗体检测试纸条的制备及最佳蛋白包被量的确定
•   2.5 特异性试验结果
•   2.6 敏感性试验结果
•   2.7 重复性及稳定性试验结果
•   2.8 符合率试验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张禹,张韵,孙世琪,马小军,张小丽,郭慧琛

关键词: 猪圆环病毒型抗体,病毒样颗粒,胶体金,免疫层析法

来源: 中国预防兽医学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜病病原生物学国家重点实验室/OIE/国家口蹄疫参考实验室

基金: 国家重点研发计划(2017YFD0501100,2016YFD0500700)

分类号: S852.651

页码: 705-709

总页数: 5

文件大小: 161K

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