导读:本文包含了前脑啡肽原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:前脑,基因,线粒体,细胞,综合征,电针,阿片。
前脑啡肽原论文文献综述
[1]（2017）在《急性心力衰竭患者的前脑啡肽原水平与肾功能不全及预后关系》一文中研究指出背景:前脑啡肽原(PENK)及其受体在人体内广泛分布。脑啡肽具有心脏抑制性且难以直接检测。PENK是一种可以替代检测的脑啡肽分解物,与肾功能呈负相关。急性心力衰竭(AHF)患者心肾综合征常见且提示预后不良。目的:评估PENK水平对AHF患者预后的预测价值,对临床决策的等级划分及心肾综合征的预测功能。方法:多中心研究检测1908例AHF(本文来源于《中华老年心脑血管病杂志》期刊2017年11期）
王艳,卢晓娥,赵品,姜静,姚立农[2]（2017）在《过表达前脑啡肽原(PPENK)增强线粒体自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤》一文中研究指出目的探讨前脑啡肽原-最低限度免疫定义基因表达-核定位信号(PPENK-MIDGE-NLS)基因载体后处理对大鼠心肌缺血再灌注线粒体自噬的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术对照组(sham)组:开胸不进行冠状动脉左前降支(LAD)血流阻断及再灌注;缺血再灌注(I/R)组、PPENK-MLDGE(MIDGE)-NLS载体(PPENK)组及Control-MIDGE-NLS载体(对照)组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水、PPENK-MIDGE-NLS 200μg及Control-MIDGE-NLS 200μg,股静脉注射各1.5 m L。再灌注24 h后取材。ELISA测定血浆心肌肌钙蛋白I(c Tn I)含量;2,3,5-氯化叁苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积;透射电镜下观察心肌细胞超微结构及线粒体自噬并分析线粒体损伤评分;Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、PTEN诱导推定激酶1(PINK1)、帕金森病蛋白(parkin)水平。结果 PPENK组血浆c Tn I含量降低,心肌梗死面积减少,线粒体损伤评分改善,心肌组织及线粒体超微结构明显改善,线粒体自噬体增多。线粒体PINK1、parkin、p62、LC3B表达增强。对照组与I/R组间无显着性差异。结论 PPENK-MIDGENLS基因载体处理后可减轻大鼠心肌I/R损伤,可能与增强线粒体自噬,保护线粒体结构完整有关。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2017年10期）
谢静涛,唐晋,王宏宝,罗佳辉,王洁[3]（2015）在《饥饿胁迫24h对小鼠认知功能及海马区前脑啡肽原表达的影响》一文中研究指出目的观察饥饿胁迫对小鼠认知功能和大脑海马区前脑啡肽原表达的影响。方法将40只小鼠随机分为对照组和饥饿24 h组(下称饥饿组),Morris水迷宫和八臂迷宫测试小鼠的认知功能。RT-PCR检测大脑海马区前脑啡肽原m RNA表达变化情况。结果饥饿组与对照组比较,1在Morris水迷宫测试中,饥饿组潜伏期明显缩短(P<0.05),通过原平台位置次数和穿越目标停留时间百分增加比(P<0.05);2在八臂迷宫测试中,饥饿组参考记忆错误和工作记忆错误减少(P<0.05);3在RT-PCR实验检测前脑啡肽原实验中,饥饿组小鼠大脑海马区前脑啡肽原表达明显降低(P<0.05)。结论 1饥饿胁迫可增强小鼠的认知功能;2饥饿胁迫通过降低小鼠大脑海马区前脑啡肽原来增强认知功能;3脑肠肽水平的调整可能是"脾藏意主思"功能实现的途径之一。(本文来源于《湖南中医药大学学报》期刊2015年04期）
白凤[4]（2014）在《慢病毒介导的人前脑啡肽原基因在HEK293细胞中的表达》一文中研究指出研究目的：构建含人前脑啡肽原基因(hPPE)的重组慢病毒载体,使其转染人胚胎肾细胞(HEK293),获得高效、稳定表达目的基因的细胞株并鉴定hPPE基因的表达情况。为后续转染人前脑啡肽原基因的HEK293细胞用于大鼠癌痛模型的生物镇痛研究提供实验材料。并为日后继续探讨内源性脑啡肽对慢性疼痛及癌性疼痛的治疗实验研究做好平台基础工作。研究方法：将本实验小组构建保存的重组质粒pcDNA3.1/hPPE经限制性内切酶Hind III,Not I剪切后获得hPPE基因片段,根据GenBank数据库中记载的hPPE基因序列设计均含有EcoR I酶切位点的上下游引物,通过PCR技术对目的基因进行扩增。用限制性内切酶EcoR I对表达载体(pLV-UbC-GFP-3FLAG)进行酶切,酶切产物经琼脂糖凝胶电泳后回收线性化的载体。将扩增的目的基因片段与线性化的表达载体,通过运用基因重组技术进行连接,转化大肠杆菌(E.coli)感受态细胞,鉴定转化子,接种阳性克隆,保存并送测序。测序结果无误的,进行接种抽提目的基因表达质粒。将含有目的基因的表达载体(pLV-UbC-hPPE-GFP), pCD包装质粒,pLTR-G膜蛋白表达质粒共同转染HEK293细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化,再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞。用Western blot免疫印迹法检测hPPE基因在转染后的HEK293细胞中的蛋白表达情况。研究结果：1.目的基因(hPPE) PCR扩增后得到DNA产物大小为838bp,经琼脂糖凝胶电泳可显示清晰明亮的条带。纯化的目的基因片段与线性化的表达载体进行连接,转化,菌落PCR鉴定,阳性克隆测序,结果表明：和GenBank数据库中记录的hPPE基因序列比对结果完全一致,说明成功构建了重组慢病毒表达载体。2.重组目的基因表达载体和空表达载体分别与pCD包装质粒,pLTR-G膜蛋白表达质粒共同转染HEK293细胞,转染后第二日可见所有细胞健康且密度接近60%-80%。经慢病毒的包装、纯化后,根据病毒滴度公式计算得到病毒滴度为3.39×108TU/ml。3.HEK293细胞感染UbC-hPPE-GFP-L.V.后,在荧光显微镜下未见到GFP荧光。HEK293细胞感染Ubc-GFP-L.V.空病毒后,可以看出细胞发出较强的荧光,感染率通过观察荧光显微镜下细胞中显现出绿色荧光蛋白的阳性率来表示,可达到100%。4.通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测转染后的HEK293细胞样品以及传代至第15代的HEK293细胞样品,均可以观察到阳性条带位于略大于55KDa处有,其大小和hPPE-GFP-FLag融合蛋白(29KDa+28KDa+2KDa=59KDa)相吻合,可以判断hPPE在HEK293细胞中稳定表达。研究结论：本研究成功构建了含有hPPE基因的重组慢病毒载体,使hPPE基因可以稳定表达于HEK293细胞中,为进一步关于脑啡肽物质在疼痛治疗中的应用研究奠定了基础。(本文来源于《山西医科大学》期刊2014-05-23）
刘雪琴,胡伊乐,郭绍芳,任亚丽[5]（2013）在《pIRES-GFP-前脑啡肽原载体在体内外的表达及生物学效应》一文中研究指出目的检测pIRES-GFP-前脑啡肽原载体在体内外的表达,以探索脑啡肽基因镇痛的生物学效应与临床应用的可行性。方法将大鼠前脑啡肽原基因与绿色荧光蛋白真核质粒连接构建重组质粒,体外转染机体细胞,通过阳性细胞绿色荧光表达的强弱与细胞上清液脑啡肽水平的放射免疫测定,观察重组质粒在细胞内的合成与表达;大鼠蛛网膜下腔注射重组质粒,观察大鼠热痛阈值的变化,确定重组质粒在机体细胞内合成外源性脑啡肽的生物学活性。结果体外试验表明重组质粒转染24 h后COS-7细胞内开始有绿色荧光表达,48 h达高峰,持续27 d开始减弱,动物实验大鼠热痛阈值的变化与体外试验基本相符。结论重组质粒在机体细胞内合成的外源性脑啡肽具有与内源性脑啡肽相同的生物学活性,可以作为一种长效的基因镇痛方法应用于临床。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2013年06期）
逄坤芳,陈鹤翔,杨辉,卜慧莲,刘希江[6]（2012）在《大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的构建大鼠δ阿片受体(delta opioid receptor,DOR)基因小发卡RNA(shRNA)及人前脑啡肽原基因(hu-man preproenkephalin gene,hPPE)双表达慢病毒载体并鉴定。方法根据大鼠DOR mRNA序列设计shRNA并合成包含正、反义靶序列的互补DNA链,退火后插入至shRNA表达载体pENTR/U6vector中,构建shRNA表达质粒,并转化至感受态细胞DH5α,抽提质粒后进行测序。合成hPPE基因序列并插入到表达载体pcDNA3.1(+)中,转化至感受态细胞DH5α,挑取多个单克隆进行测序验证。将hPPE插入已构建成功的pENTR/U6-shRNA载体中,再与慢病毒载体pLenti7.3/V5-DEST重组,构建慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA并转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序验证,保留测序验证正确的LR重组质粒。用构建的慢病毒表达载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA和包装质粒共转染293T细胞,包装病毒,并测定滴度。结果经测序验证重组质粒pENTR/U6-shRNA、pcDNA3.1(+)-hPPE和慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA均构建成功。大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒包装成功,病毒滴度为1×107 TU/mL。结论大鼠DOR基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体构建成功,为研究DOR和hPPE在吗啡耐受中的作用机制及探求更加合理的镇痛方式奠定了基础。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2012年03期）
杨保仲,李静,薛朝霞,白凤,潘宇飞[7]（2011）在《人前脑啡肽原在HEK293细胞中的表达》一文中研究指出转基因细胞移植镇痛为疼痛治疗带来新的方向,本研究成功构建含抗痛基因人前脑啡肽原重组载体,现报告如下。1材料与方法1.1细胞与主要试剂HEK293细胞(中国科学院细胞库),pcDNA3.1(+)/人前(本文来源于《中国药物与临床》期刊2011年07期）
李静[8]（2011）在《人前脑啡肽原真核表达载体构建及其在HEK293细胞中的表达》一文中研究指出目的：人前脑啡肽原(hPPE)作为内源性阿片肽的一种,其镇痛作用明确,同时较外源性阿片类镇痛物质相比副作用小,无成瘾性,为镇痛研究提供了物质基础。本课题通过基因工程技术获得人前脑啡肽原基因序列,构建人前脑啡肽原基因重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE,在转染试剂脂质体2000作用下实现重组载体在HEK293细胞中的表达,为后期的转移性骨肿瘤模型镇痛研究提供工具。方法：提取人脑组织总RNA,在反转录酶作用下合成DNA互补链即cDNA,依据Gene Bank中报道的前脑啡肽原基因序列设计上下游引物,以cDNA为模板PCR法合成hPPE基因序列后克隆于测序载体pMD-18T上,测序分析。hPPE基因序列测序分析正确后,限制性内切酶HindⅢ、NotⅠ双酶切pMD-18T/hPPE和真核表达载体pcDNA3.1(+),在T4DNA连接酶作用下连接hPPE基因和真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切凝胶电泳鉴定重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE后,转化大肠杆菌(JM109),扩增提取重组载体。在转染试剂脂质体2000作用下,重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE转染HEK293细胞。于转染后48h RT-PCR检测人前脑啡肽原基因,72h后放射免疫法检测人前脑啡肽原表达。结果：1 RT-PCR法成功扩增出人前脑啡肽原基因序列,经凝胶电泳鉴定可扩增出800bp左右基因片段与文献中报道一致；经测序分析与GeneBank中报道的人前脑啡肽原基因序列比对,同源性达100%。2限制性内切酶HindⅢ.NotⅠ双酶切重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE,凝胶电泳鉴定扩增出5400bp基因片段和800bp左右基因片段,与文献中报道的pcDNA3.1(+)、hPPE基因序列一致。3重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE、真核表达载体pcDNA3.1(+)分别转染HEK293细胞,于转染48h后搜集pcDNA3.1(+)/hPPE转染组、阴性对照pcDNA3.1(+)转染组、HEK293细胞组这叁组细胞。以B-action为内参,RT-PCR检测这叁组细胞中hPPE基因：结果可见pcDNA3.1(+)/hPPE转染组扩增出800bp左右的hPPE基因片段,阴性对照pcDNA3.1(+)转染组、HEK293细胞组未扩增出基因片段。4重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE.真核表达载体pcDNA3.1(+)分别转染HEK293细胞,于转染72h后搜集pcDNA3.1(+)/hPPE转染组、阴性对照pcDNA3.1(+)转染组、HEK293细胞组这叁组细胞上清液。放射免疫法检测这叁组细胞中人前脑啡肽原表达：结果可见阴性对照pcDNA3.1(+)转染组、HEK293细胞组未检测到人前脑啡肽原表达。pcDNA3.1(+)/hPPE转染组检测到人前脑啡肽原表达,其表达量可用pg级浓度表示。结论：成功克隆出人前脑啡肽原基因,成功构建了人前脑啡肽原基因重组载体pcDNA3.1(+)/hPPE,并实现了人前脑啡肽原在HEK293细胞中的表达,为后期转移性骨肿瘤痛模型镇痛研究提供了有力的工具。(本文来源于《山西医科大学》期刊2011-05-17）
郭长青,曹榕娟,孙红梅,Seyed,Javad,Mojtabavi,马惠芳[9]（2010）在《针刀松解法对第3腰椎横突综合征大鼠下丘脑前阿黑皮素mRNA、前脑啡肽原mRNA表达的影响》一文中研究指出目的:探讨针刀松解法治疗第3腰椎横突综合征的部分中枢镇痛机制。方法:SD雄性大鼠24只,随机分为正常组、模型组、针刀组及电针组。采用左侧第3腰椎横突尖部埋置明胶海绵法建立第3腰椎横突综合征模型,针刀组和电针组分别给予针刀松解和电针左侧"肾俞""腰阳关"治疗。应用原位杂交方法检测大鼠下丘脑前阿黑皮素(POMC)mRNA、前脑啡肽原(PPE)mRNA阳性细胞的表达。结果:造模后大鼠下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA的阳性细胞表达较正常组增多(P<0.01),针刀组和电针组大鼠下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA阳性细胞表达较模型组进一步增多(P<0.01)。结论:针刀松解法与电针可能通过促进下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA的表达,参与其镇痛过程。(本文来源于《针刺研究》期刊2010年05期）
李静,杨保仲,王维,洛珉,聂丽霞[10]（2010）在《pcDNA3.1(+)/人前脑啡肽原基因真核表达载体的构建》一文中研究指出目前慢性疼痛及癌症晚期疼痛的治疗方法仍主要依靠叁阶梯药物疗法,叁阶梯药物中以外源性镇痛药吗啡为主,其不良反应大,成瘾性高,限制了其大量使用,因此研究新的镇痛药及新的镇痛方法成为最近研究的热点。20世纪50年代以来,人们着力于研究新的镇痛物质,之后内源性镇痛物质[1]的发现及基因克隆技术[2]的应用为开辟新的镇痛研究奠定了基础。(本文来源于《中国药物与临床》期刊2010年10期）
前脑啡肽原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨前脑啡肽原-最低限度免疫定义基因表达-核定位信号(PPENK-MIDGE-NLS)基因载体后处理对大鼠心肌缺血再灌注线粒体自噬的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术对照组(sham)组:开胸不进行冠状动脉左前降支(LAD)血流阻断及再灌注;缺血再灌注(I/R)组、PPENK-MLDGE(MIDGE)-NLS载体(PPENK)组及Control-MIDGE-NLS载体(对照)组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水、PPENK-MIDGE-NLS 200μg及Control-MIDGE-NLS 200μg,股静脉注射各1.5 m L。再灌注24 h后取材。ELISA测定血浆心肌肌钙蛋白I(c Tn I)含量;2,3,5-氯化叁苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积;透射电镜下观察心肌细胞超微结构及线粒体自噬并分析线粒体损伤评分;Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、PTEN诱导推定激酶1(PINK1)、帕金森病蛋白(parkin)水平。结果 PPENK组血浆c Tn I含量降低,心肌梗死面积减少,线粒体损伤评分改善,心肌组织及线粒体超微结构明显改善,线粒体自噬体增多。线粒体PINK1、parkin、p62、LC3B表达增强。对照组与I/R组间无显着性差异。结论 PPENK-MIDGENLS基因载体处理后可减轻大鼠心肌I/R损伤,可能与增强线粒体自噬,保护线粒体结构完整有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
前脑啡肽原论文参考文献
[1]..急性心力衰竭患者的前脑啡肽原水平与肾功能不全及预后关系[J].中华老年心脑血管病杂志.2017
[2].王艳,卢晓娥,赵品,姜静,姚立农.过表达前脑啡肽原(PPENK)增强线粒体自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤[J].细胞与分子免疫学杂志.2017
[3].谢静涛,唐晋,王宏宝,罗佳辉,王洁.饥饿胁迫24h对小鼠认知功能及海马区前脑啡肽原表达的影响[J].湖南中医药大学学报.2015
[4].白凤.慢病毒介导的人前脑啡肽原基因在HEK293细胞中的表达[D].山西医科大学.2014
[5].刘雪琴,胡伊乐,郭绍芳,任亚丽.pIRES-GFP-前脑啡肽原载体在体内外的表达及生物学效应[J].新乡医学院学报.2013
[6].逄坤芳,陈鹤翔,杨辉,卜慧莲,刘希江.大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体的构建与鉴定[J].华中科技大学学报(医学版).2012
[7].杨保仲,李静,薛朝霞,白凤,潘宇飞.人前脑啡肽原在HEK293细胞中的表达[J].中国药物与临床.2011
[8].李静.人前脑啡肽原真核表达载体构建及其在HEK293细胞中的表达[D].山西医科大学.2011
[9].郭长青,曹榕娟,孙红梅,Seyed,Javad,Mojtabavi,马惠芳.针刀松解法对第3腰椎横突综合征大鼠下丘脑前阿黑皮素mRNA、前脑啡肽原mRNA表达的影响[J].针刺研究.2010
[10].李静,杨保仲,王维,洛珉,聂丽霞.pcDNA3.1(+)/人前脑啡肽原基因真核表达载体的构建[J].中国药物与临床.2010
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