IPI549调控小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用研究

论文摘要

目的:研究IPI549特异性抑制PI3Kγ对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法:构建C57BL/6J小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型和RAW264.7巨噬细胞缺氧复氧模型,给予IPI549（PI3Kγ抑制剂）干预,以ALT、HE染色、TUNEL判断肝脏损伤情况,Western blot检测组织和原代细胞p110γ（PI3Kγ）蛋白表达变化和RAW264.7细胞缺氧复氧过程TNF-α、JNK、p-JNK蛋白表达情况,ELISA检测细胞上清TNF-α水平。结果:相比于原代肝细胞,枯否细胞明显高表达p110γ。与Sham组比较,IR组肝组织中p110γ的蛋白水平降低;使用PI3Kγ特异性抑制剂（IPI549）干预小鼠,可加重小鼠肝脏缺血再灌注后肝组织损伤和肝脏组织细胞凋亡,而利用GdCl3预处理封闭枯否细胞,可使得IPI549引起的肝组织细胞损伤和凋亡加重得到缓解。在体外实验中,IPI549干预使RAW264.7细胞缺氧复氧过程JNK磷酸化水平升高、TNF-α蛋白表达增加,细胞上清TNF-α分泌增多。结论:PI3Kγ抑制剂IPI549干预使小鼠肝脏缺血再灌注损伤加重,其机制与IPI549抑制枯否细胞中的PI3Kγ影响JNK信号通路的活化,发挥促炎作用有关。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1实验动物及试剂
•   1.2 模型建立
•   1.3 标本采集处理
•   1.4 细胞培养和处理
•   1.5 原代细胞提取
•   1.6 Western blot
•   1.7 ELISA
•   1.8 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 Western blot检测p110γ蛋白表达水平
•   2.2 IPI549抑制PI3Kγ对IR处理的小鼠血清中ALT的影响
•   2.3 HE检测肝脏组织病理学改变
•   2.4 TUNEL法检测肝组织细胞凋亡
•   2.5 Western blot检测RAW264.7细胞中JNK及TNF-α蛋白表达
•   2.6 ELISA检测细胞上清中TNF-α水平
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张雨驰,范晶,黄佐天,郑道峰,吴忠均

关键词: 肝脏缺血再灌注损伤,巨噬细胞

来源: 重庆医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 外科学

单位: 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,重庆医科大学附属第一医院急诊科

基金: 重庆市科委基金资助项目(编号:cstc2016shms-ztzx10006-5),重庆市卫生计生委医学科研项目面上资助项目(编号:2017MSXM017),重庆市研究生科研创新资助项目(编号:CYS17161)

分类号: R657.3

DOI: 10.13406/j.cnki.cyxb.002185

页码: 1628-1634

总页数: 7

文件大小: 2196K

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