濒危植物鄂尔多斯半日花组织培养及植株再生

论文摘要

鄂尔多斯半日花（Helianthemum ordosicum Y.Z.Zhao,Z.Y.Zhu et R.Cao）为珍稀濒危的第三纪古地中海植物区系残遗种,种群分布面积狭小。本研究以鄂尔多斯半日花无菌苗和成体植株为实验材料,在适宜培养环境中通过改变外源激素的浓度和配比控制外植体定向分化获得试管苗,实验了各生长阶段的适宜培养基种类和激素组系,探讨了光照、pH、外植体种类等因素对半日花组织培养的影响,成功构建了多种外植体组织培养植株再生体系。这一研究对半日花物种保护和种质资源保存有重要意义。主要结果与结论如下:1.半日花无菌苗子叶,真叶,茎尖,带芽茎,无芽茎,成体植株叶片,茎尖,带芽茎,幼嫩无芽茎可以通过组织培养获得再生苗;无菌苗根,成体植株木质化茎段和根不能通过组织培养获得再生苗。2.半日花外植体诱导增殖培养最适光照强度为43-58μmol·m-2·s-1,分化培养最适光照强度为45-58μmol·m-2·s-1,生根培养最适光照强度为55-70μmol·m-2·s-1,加大红光比例可抑制愈伤组织褐化;外植体诱导、增殖、分化、生根最适pH为5.8。3.依次使用75%酒精浸泡30 s,0.5%NaClO4浸泡8 min,0.1%升汞浸泡8 min消毒处理的外植体愈伤组织诱导成活率最高。外植体消毒的难易程度受到材料幼嫩程度和季节因素影响,幼嫩外植体消毒效果优于老化外植体,6-8月取材外植体消毒效果最好。4.以无菌苗子叶、真叶、无芽茎为外植体,愈伤组织诱导增殖最优培养基为MS+8.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,不定芽分化最优培养基为MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA;生根最优培养基为MS+0.20 mg/L IBA;以成体植株叶片和幼嫩无芽茎为外植体,愈伤组织诱导最优的培养基为MS+2.0 mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA,不定芽分化最优培养基为MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,生根最优培养基为MS+0.2mg/L IBA;以无菌苗和成体植株带芽茎和茎尖为外植体,芽分化最优培养基为MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,生根最优培养基为MS+0.2mg/L IBA。5.无菌苗和成体植株带芽茎和茎尖外植体组织培养形态发生途径为直接器官发生;无菌苗子叶,真叶,无芽茎组织培养形态发生途径为胚状体发生;成体植株幼嫩无芽茎组织培养形态发生途径尚未明确。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 一、前言
•   1.1 选题背景与研究意义
•   1.2 组织培养技术研究进展
•     1.2.1 植物组织培养基本概念和理论基础
•     1.2.2 植物组织培养技术研究新方向
•   1.3 半日花研究进展
•     1.3.1 半日花生物学特性研究进展
•     1.3.2 半日花生态适应性研究进展
•     1.3.3 半日花繁殖方式研究进展
•     1.3.4 半日花组织培养研究进展
•     1.3.5 半日花其他方面研究进展
•   1.4 科学问题与研究内容
•     1.4.1 科学问题
•     1.4.2 研究内容
•     1.4.3 主要技术路线
• 二、材料与方法
•   2.1 研究区概况
•   2.2 实验材料
•     2.2.1 实验材料获取
•     2.2.2 实验试剂
•     2.2.3 实验仪器
•   2.3 实验方法
•     2.3.1 培养基的配置
•     2.3.2 外植体采摘及消毒
•     2.3.3 愈伤组织诱导
•     2.3.4 外植体和愈伤组织分化
•     2.3.5 分化苗生根
•     2.3.6 炼苗及移栽
•     2.3.7 培养基p H筛选
•     2.3.8 光照条件筛选
•   2.4 数据处理
• 三、结果与分析
•   3.1 光照与p H对半日花组织培养的影响
•     3.1.1 不同光照条件下半日花组织培养效率
•     3.1.2 培养基不同p H对半日花组织培养影响
•   3.2 无菌培养体系的建立
•     3.2.1 不同消毒方案下半日花叶片外植体消毒效果
•     3.2.2 半日花不同生长阶段叶片消毒效果
•     3.2.3 半日花不同外植体取材时间消毒效果
•   3.3 诱导和增殖培养
•     3.3.1 半日花六种外植体愈伤组织诱导最适激素组合
•     3.3.2 不同外源激素组合对半日花不同外植体愈伤组织诱导效率
•     3.3.3 半日花不同分化程度外植体愈伤组织诱导效率
•     3.3.4 不同取材季节下半日花愈伤组织诱导效率
•   3.4 分化培养
•     3.4.1 不同外源激素下无菌苗子叶、真叶、无芽茎和成体植株叶片、无芽茎分化效率
•     3.4.2 不同外源激素下无菌苗和成体植株带芽茎分化效率
•     3.4.3 不同外源激素下无菌苗和成体植株茎尖分化效率
•   3.5 生根培养
•     3.5.1 不同培养基种类下半日花生根效率
•     3.5.2 不同外源激素下半日花生根效率
•   3.6 炼苗及移栽
• 四、讨论
•   4.1 半日花组织培养适宜的外部环境条件
•     4.1.1 半日花组织培养的培养基营养物质组成与p H条件
•     4.1.2 半日花组织培养光照条件
•   4.2 激素对半日花组织培养的影响
•     4.2.1 内源激素对半日花组织培养的影响
•     4.2.2 外源激素对半日花组织培养的影响
•   4.3 外植体种类对半日花组织培养的影响
•     4.3.1 半日花外植体分化程度影响愈伤组织诱导条件
•     4.3.2 半日花不同种类外植体植株再生途径
•   4.4 半日花无菌体系建立原则与操作规范
•     4.4.1 外植体种类对消毒效果的影响
•     4.4.2 实验操作规范与污染防控
•     4.4.3 消毒剂和消毒时间选择
• 五、结论与展望
•   5.1 研究结果与结论
•   5.2 研究展望
•   5.3 研究不足
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 论文选题来源
• 项目来源和攻读学位期间发表的学术论文

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 韩瀛

导师: 梁存柱,王向华

关键词: 鄂尔多斯半日花,组织培养,植株再生,外植体种类,外源激素

来源: 内蒙古大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学,生物学

单位: 内蒙古大学

基金: 科技部国家重点研发计划项目:“荒漠化退化草地治理技术及示范”第3课题“干草原区退化草地修复与可持续利用技术研发与示范(2016YFC0500503)”,内蒙古自治区科技厅科技计划项目:内蒙古荒漠生态系统保护与利用规范(20140409)

分类号: Q943.1

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