导读:本文包含了大引物论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:引物,突变,基因,链式反应,病毒,组合,基因工程。
大引物论文文献综述
赵广荣,梁玲玲,刘春杰,祝琳琪[1]（2010）在《邻近多位点基因突变的组合大引物PCR策略(英文)》一文中研究指出报道了一种新的组合多位点突变策略,通过单管中叁阶段聚合酶链式反应(PCR)得以实现。在第一阶段,PCR扩增出多位点突变大引物,然后在第二阶段延伸大引物,在第叁阶段获得全长突变基因序列。基于退火温度与热循环参数的组合大引物反应的优化,叁个阶段中退火温度差异小(低于10°C),成功扩增出多位点突变基因序列和比邻突变序列。是一种简单、高效的多位点突变方法。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2010年07期）
谢振华,史小军[2]（2009）在《快捷的定点突变效率近100%的大引物PCR方法(英文)》一文中研究指出报道了一种新的PCR突变方法,它不需要纯化大引物或设计特别的旁侧引物.利用一个诱变引物和两个测序引物(Tm≤58℃)作为旁侧引物.第一轮PCR产物12.5μl直接加入到50μl的第二轮PCR反应体系作为模板和大引物,在开始第二轮PCR反应时,增加在68℃退火温度下进行10个循环的不对称PCR,这一步骤大大提高了通过600bp或800bp大引物所导致的突变效率.结果表明,该方法的产物能够达到高保真、97%～98%的突变效率和高产率.(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2009年11期）
赵松子,沈向群[3]（2009）在《用滚环扩增与大引物PCR法高效构建定点突变序列》一文中研究指出建立了一种简单、快捷的高效定点诱变方法。第一轮PCR反应中,上游引物和突变引物先以1∶10的比例进行不对称PCR,提高大引物突变比例。第二轮PCR反应以滚环扩增产生的单链DNA作为大引物PCR反应的模板,不需要优化PCR反应的条件,通过一般的反应条件就可得到大量PCR产物,并且诱变的成功率可达100%。(本文来源于《江西农业学报》期刊2009年08期）
张碧乾,邓会群,宫彩霞,杨青,彭建新[4]（2009）在《大引物PCR定点突变方法的改进》一文中研究指出对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突变,可以减少操作步骤,提高突变频率.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2009年01期）
莫秋华,杨翠兰[5]（2003）在《大引物PCR定点诱变技术的研究进展》一文中研究指出PCR技术自问世以来发展迅速 ,现已成为细胞生物学及分子生物学研究中常用的方法。而基于 PCR的定点诱变技术又成为研究基因的生物学特性 ,探索蛋白质结构和功能相关关系的强有力工具。其中的大引物 PCR定点诱变技术因其简便高效而倍受研究者欢迎。本文从该技术的每一层面入手 ,对此方法的研究进展进行概述(本文来源于《国外医学.遗传学分册》期刊2003年02期）
何金生,王健伟,董京芳,温乐英,洪涛[6]（2002）在《用大引物PCR法获得轮状病毒VP4基因的突变体》一文中研究指出目的 对A组轮状病毒主要结构抗原VP4基因中PacⅠ的识别序列进行无义突变以便于用腺病毒Ad Easy载体系统进行表达。方法 采用大引物PCR方法 ,通过 3条引物 ,两轮PCR反应 ,获得VP4基因的突变体 ,并经核酸序列分析证实。结果 PacⅠ识别的 8个碱基序列TTAAT TAA ,突变为CTGATCAA。结论 大引物PCR是对核酸进行突变的一种简便、快速的方法(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2002年01期）
莫秋华,徐湘民,钟雄霖,刘忠英[7]（2002）在《一种改进的大引物PCR定点诱变方法》一文中研究指出目的 建立一种改进的、简便易行的大引物 PCR定点诱变技术。方法 在两轮 PCR中设计了两种不同的质粒 DNA模板 ,两者分别缺少正向或反向外侧引物可结合的互补序列 ;当两种模板和两条外侧引物同时存在于一个反应管时 ,可以完全避免对野生型目的基因全长的扩增。第 1轮 PCR由正向外侧引物和突变引物合成大引物 ,这一产物无需凝胶纯化而直接用于第 2轮 PCR。第 2轮 PCR的第 1阶段由大引物延伸合成全长突变终产物 ,两条外侧引物则在第 2阶段指数扩增 ,所有终产物均含所需致突变位点。结果 用此方法对中国人 β地中海贫血 15种稀少突变类型进行定点诱变 ,并将诱变得到的全长人 β珠蛋白基因克隆到 p GEM○R- T载体后全长测序 ,所有克隆均鉴定为所需突变型。结论 这种改进的大引物PCR定点诱变技术省时、省工 ,诱变的成功率可达 10 0 % ,适于实验室常规应用。(本文来源于《中华医学遗传学杂志》期刊2002年01期）
大引物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
报道了一种新的PCR突变方法,它不需要纯化大引物或设计特别的旁侧引物.利用一个诱变引物和两个测序引物(Tm≤58℃)作为旁侧引物.第一轮PCR产物12.5μl直接加入到50μl的第二轮PCR反应体系作为模板和大引物,在开始第二轮PCR反应时,增加在68℃退火温度下进行10个循环的不对称PCR,这一步骤大大提高了通过600bp或800bp大引物所导致的突变效率.结果表明,该方法的产物能够达到高保真、97%～98%的突变效率和高产率.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
大引物论文参考文献
[1].赵广荣,梁玲玲,刘春杰,祝琳琪.邻近多位点基因突变的组合大引物PCR策略(英文)[J].中国生物工程杂志.2010
[2].谢振华,史小军.快捷的定点突变效率近100%的大引物PCR方法(英文)[J].生物化学与生物物理进展.2009
[3].赵松子,沈向群.用滚环扩增与大引物PCR法高效构建定点突变序列[J].江西农业学报.2009
[4].张碧乾,邓会群,宫彩霞,杨青,彭建新.大引物PCR定点突变方法的改进[J].湖北大学学报(自然科学版).2009
[5].莫秋华,杨翠兰.大引物PCR定点诱变技术的研究进展[J].国外医学.遗传学分册.2003
[6].何金生,王健伟,董京芳,温乐英,洪涛.用大引物PCR法获得轮状病毒VP4基因的突变体[J].安徽医科大学学报.2002
[7].莫秋华,徐湘民,钟雄霖,刘忠英.一种改进的大引物PCR定点诱变方法[J].中华医学遗传学杂志.2002
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