导读:本文包含了单克隆论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:单克隆抗体,细胞,胶质,杂交瘤,活性,密码子,蛋白。
单克隆论文文献综述
欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩[1]（2019）在《重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备》一文中研究指出目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原核表达质粒,转化大肠杆菌Rostta(DE3)。通过在30℃0.2mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导蛋白表达,经过纯化获得重组人Lp-PLA2;免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体;并通过酶联免疫吸附试验法测定效价,检测抗体特异性。结果通过NotⅠ和SalⅠ双酶切及测序证实原核表达质粒构建成功;经纯化得到47×103左右的蛋白,与Lp-PLA2抗体进行蛋白免疫印迹法杂交呈阳性,表明已得到重组人Lp-PLA2。通过对小鼠免疫,最终获得单克隆抗体,效价为1∶2×106,与纤维蛋白原、C-反应蛋白无交叉反应。结论成功获得重组人Lp-PLA2,并制备得到了效价较高的单克隆抗体,为后续Lp-PLA2检测试剂盒的开发奠定了基础。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年22期）
孙琦,李晓冰,何晓静,菅凌燕[2]（2019）在《自身免疫性疾病治疗中单克隆抗体药物的研究现状》一文中研究指出近年来,单克隆抗体药物已经成为治疗自身免疫性疾病的主要选择,在有关人类疾病的生物学方面取得了实质性进展。相关单抗药物的研发已成为自身免疫性疾病研究的热点。单克隆抗体通过不同的机制发挥作用,包括结合可溶性细胞因子和生长因子,受体阻断,调节受体和受体信号传导,以及通过抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用、抗体依赖性细胞吞噬作用、补体依赖性细胞毒作用诱导细胞凋亡及介导细胞信号等。从这些抗体中汲取的经验为未来治疗性抗体的研发奠定了基础,本文就治疗自身免疫性疾病的单克隆抗体药物的研究进展作一综述。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2019年22期）
董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚[3]（2019）在《重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显着抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24～144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05～0.01),与标准品抑制效果相似.(本文来源于《吉林大学学报(理学版)》期刊2019年06期）
韩月然,陈妍,杜向瑞,吕品,刘博[4]（2019）在《前蛋白转化酶枯草溶菌素9单克隆抗体生物学活性荧光染料标记法的建立、优化及验证》一文中研究指出目的建立并优化前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)单克隆抗体生物学活性的荧光染料标记检测法,并进行验证。方法对建立的荧光染料标记法的细胞铺板密度(1×10~5、5×10~5和1×10~6个/mL)、PCSK9蛋白浓度(5、20、40、80μg/mL)、荧光标记的低密度脂蛋白(low density lipoprotein labeled with 1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate,Dil-LDL)浓度(10、16、20μg/mL)、单克隆抗体的浓度梯度(200、52、20、12、8、4、0. 8μg/mL,200、30、10、6、4、1、0. 2μg/mL,200、28、9、6、4、2、0. 2μg/mL)进行优化,并对优化方法的专属性、准确度、精密度、线性范围、耐用性进行验证。结果最适方法检测条件:铺板密度为5×10~5个/mL,PCSK9蛋白和Dil-LDL浓度分别为20和16μg/mL,单克隆抗体的浓度梯度为200、52、20、12、8、4、0. 8μg/mL。该方法可特异性检测PCSK9单克隆抗体;供试品检测回收率在70%～130%之间;供试品检测结果的相对标准偏差(RSD)均<10%;供试品效价在50%～150%之间时,检测值与理论值呈良好的线性关系,线性拟合方程为y=1. 002 x-0. 006 7,R~2=0. 997 8;耐用性检测活性均在70%～140%范围内。结论本实验建立的方法具有良好的专属性、准确度和精密度,可用于PCSK9单克隆抗体的生物学活性测定。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年11期）
李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛[5]（2019）在《山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出制备山羊乳酪蛋白单克隆抗体可以为检测乳品中山羊乳成分提供免疫学检测手段。以山羊酪蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术,制备特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体,对获得的阳性杂交瘤细胞进行连续传代和反复冻存以测定其稳定性,并对其分泌的单克隆抗体应用ELISA进行抗体特异性分析,对特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体进行抗体亚型鉴定和染色体组型分析。最终,成功的筛选出可以分泌特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,被命名为7H。经染色体组型分析,染色体数目为102条;单克隆抗体7H类别为IGg1,轻链为κ;经连续传代和反复冻存,ELISA检测细胞上清抗体发现其OD450nm值无显着性差异。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
傅雅娟,陈苏星,蔡少丽,林莉莉,林清强[6]（2019）在《从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体》一文中研究指出为研究环鸟苷酸-腺苷酸合成酶入核的机制,利用兔外周血B细胞筛选抗人cGAS蛋白单克隆抗体.针对已叁次免疫人cGAS(161-522)蛋白的新西兰兔,运用流式细胞术得到阳性效应B细胞,在单管里对单细胞裂解,得到总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增同一个B细胞来源的抗体重链和轻链可变区序列,抗体基因扩增成功率高达80%以上.293T重组表达兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体并鉴定,获得1个具有较好结合特异性的兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体,ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶10 000.(本文来源于《福建师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期）
蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽[7]（2019）在《人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究》一文中研究指出目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通路与肿瘤侵袭、耐药等功能表型密切相关。结论成功构建从形态、功能表型到基因背景具有显着差异的U87单克隆细胞株CF5、G11,为研究GBM异质性和基因功能奠定了基础。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2019年11期）
翟铭雅,徐雪,梁梅英,王建六[8]（2019）在《抗血小板单克隆抗体法构建妊娠合并免疫性血小板减少症动物模型》一文中研究指出目的探讨血小板单克隆抗体法建立妊娠合并免疫性血小板减少症(ITP)动物模型的可行性。方法选取Balb/c雌鼠与同龄Balb/c雄鼠配对,自妊娠第10天起,每日腹腔注射大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体-PBS溶液至分娩前。按照抗体的不同起始剂量分为实验一组(4μg)及实验二组(6μg),同期腹腔注射等量PBS溶液为对照组。动态监测给药后妊娠小鼠外周血中血小板计数、血红蛋白水平及死亡率,评价不同起始剂量下,血小板下降程度、维持时间及模型稳定性,并且记录各组小鼠子代出生情况及血小板计数。结果①与对照组相比,实验组妊娠小鼠于给药24小时后出现血小板显着降低(P <0.05),并在给药7天内持续维持低水平的血小板计数。②与实验一组相比,实验二组中妊娠小鼠死亡率增加(25%vs 0%),血红蛋白水平于妊娠晚期显着降低(P <0.05)。③与对照组相比,实验组中子代出现不同程度的皮肤瘀点及瘀斑,其血小板计数显着低于对照组(P <0.05),而产仔数、出生体重及死亡率均无显着性差异。结论腹腔注射血小板单克隆抗体可建立妊娠合并ITP被动型动物模型;以单克隆抗体4μg/天作为起始剂量时对模型动物死亡率及血红蛋白影响最小。(本文来源于《中国妇产科临床杂志》期刊2019年06期）
高利萍,武月章,杨雪花,陈冬冬,肖康[9]（2019）在《MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究》一文中研究指出单线态氧产生者(mini singlet oxygen generator,miniSOG)是改造于拟南芥向光素2蛋白而获得的小分子荧光黄素蛋白,由106个氨基酸残基组成。miniSOG被广泛用于电镜及荧光显微镜,并被广泛用于发色团辅助的光灭活(Chromophore-assisted light inactivation,CALI)蛋白、DNA或RNA,并结合免疫光敏用于癌症的治疗,以及结合细胞消融用于神经科学、免疫生物学等。但是目前国内并无商品化的miniSOG抗体,为了辅助课题研究,制备抗miniSOG蛋白的单克隆抗体,本研究根据miniSOG基因的ORF区序列构建miniSOG-GST重组蛋白的原核表达载体PGEX-4T-1-miniSOG,然后将该重组质粒转化于BL21感受态大肠杆菌中,异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-DThiogalactoside,IPTG)诱导融合蛋白的表达,并经亲和层析方法进行纯化。将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。筛选获得稳定分泌抗miniSOG的单克隆抗体细胞株,最终选取性能最优的4F9细胞株进行小鼠腹水制备并纯化。单抗4F9亚型为IgG1/Kappa,腹水滴度达到1∶200 000,纯化抗体灵敏度达到5 ng/mL。并通过Western Blot、免疫荧光及免疫组化方法进行特异性鉴定,该单克隆抗体能特异性识别转染细胞和转基因小鼠脑组织中的miniSOG蛋白。本研究在国内首次制备了miniSOG单克隆抗体,将丰富其在其它方面的应用。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期）
郭忠建,于宪印,董现云,于萌涵[10]（2019）在《家蚕核型多角体病毒泛素蛋白单克隆抗体的制备》一文中研究指出泛素(ubiquitin,UB)是一种小分子质量蛋白。从氨基酸序列上看,杆状病毒UB与真核生物UB的差异体现在2段序列上,即第15～31个和第53～57个氨基酸,其余的序列高度保守。这种高度保守性使得许多商业化的抗泛素抗体难以特异地将二者区分开来。将人工合成的家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)UB(v-UB)多肽~(17)TEPAETVADLKQ~(28)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功制备了针对该多肽的特异性单克隆抗体,实现了对v-UB的特异性检测。利用该抗体,确定v-UB在细胞质中形成的斑点状结构为P62内涵体(inclusion body)。获得的单克隆抗体为今后v-UB的研究提供了实验基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2019年04期）
单克隆论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
近年来,单克隆抗体药物已经成为治疗自身免疫性疾病的主要选择,在有关人类疾病的生物学方面取得了实质性进展。相关单抗药物的研发已成为自身免疫性疾病研究的热点。单克隆抗体通过不同的机制发挥作用,包括结合可溶性细胞因子和生长因子,受体阻断,调节受体和受体信号传导,以及通过抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用、抗体依赖性细胞吞噬作用、补体依赖性细胞毒作用诱导细胞凋亡及介导细胞信号等。从这些抗体中汲取的经验为未来治疗性抗体的研发奠定了基础,本文就治疗自身免疫性疾病的单克隆抗体药物的研究进展作一综述。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单克隆论文参考文献
[1].欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩.重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备[J].国际检验医学杂志.2019
[2].孙琦,李晓冰,何晓静,菅凌燕.自身免疫性疾病治疗中单克隆抗体药物的研究现状[J].中国临床药理学杂志.2019
[3].董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚.重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定[J].吉林大学学报(理学版).2019
[4].韩月然,陈妍,杜向瑞,吕品,刘博.前蛋白转化酶枯草溶菌素9单克隆抗体生物学活性荧光染料标记法的建立、优化及验证[J].中国生物制品学杂志.2019
[5].李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛.山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].动物医学进展.2019
[6].傅雅娟,陈苏星,蔡少丽,林莉莉,林清强.从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体[J].福建师范大学学报(自然科学版).2019
[7].蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽.人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究[J].医学研究生学报.2019
[8].翟铭雅,徐雪,梁梅英,王建六.抗血小板单克隆抗体法构建妊娠合并免疫性血小板减少症动物模型[J].中国妇产科临床杂志.2019
[9].高利萍,武月章,杨雪花,陈冬冬,肖康.MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究[J].病毒学报.2019
[10].郭忠建,于宪印,董现云,于萌涵.家蚕核型多角体病毒泛素蛋白单克隆抗体的制备[J].蚕业科学.2019
论文知识图
