导读:本文包含了慢粒白血病细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白血病,细胞,凋亡,粒细胞,细胞株,臭椿,低氧。
慢粒白血病细胞论文文献综述
莫运喜,刘丹莉,高顺利,殷小成[1]（2019）在《腺花素通过靶向Prx Ⅲ诱导急性早幼粒白血病细胞分化的研究》一文中研究指出目的:探讨腺花素(Adenanthin)靶向Prx Ⅲ诱导急性早幼粒白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)细胞分化。方法:以HL-60细胞株作为研究对象,取对数生长期细胞,分为对照、全反式维甲酸(ATRA)、Adenanthin和ATRA+Adenanthin,共4组。观察各组细胞形态的变化;用NBT还原实验分析细胞分化能力的变化;流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化;采用Western blot检测Prx Ⅲ表达的变化。结果:Adenanthin可诱导HL-60细胞分化;ATRA+Adenanthin组NBT还原阳性率明显高于ATRA组和Adenanthin组(P<0.05);ATRA+Adenanthin组CD11b阳性细胞百分率(43.62%±1.38%)均明显高于Adenanthin组(28.15%±1.78%)、ATRA组(36.72%±1.33%)及空白对照组(7.99%±1.78%)(P <0.05);Adenanthin组PrxⅢ蛋白水平明显高于空白对照组及ATRA组(P <0.05)。结论:腺花素能协同ATRA使HL-60细胞分化成熟,其作用机制可能与调控Prx Ⅲ的表达有关。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年04期）
王艺霖,王玲珍,孙健栋,李学荣,王志[2]（2019）在《紫外线在低氧条件下对急性早幼粒白血病细胞增殖的影响及机制研究》一文中研究指出目的观察280 nm波长紫外发光二极管照射在低氧条件下对急性早幼粒白血病细胞(HL-60增殖的影响,并探讨发生机制。方法取对数生长期的HL-60细胞为研究对象,分为对照组、低氧组、紫外线组及低氧+紫外线组。低氧组给予氯化钴(终浓度150μmol/L)处理,紫外线组用30 J/m~2能量的280 nm波长紫外发光二极管照射,低氧+紫外线组在氯化钴处理基础上用30 J/m2能量的280 nm波长紫外发光二极管照射,48 h后收集细胞于倒置显微镜下观察细胞形态变化。采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Annexin-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测Bcl-2基因mRNA的表达量。上述各实验均独立重复3次。结果与对照组相比,各实验组细胞皱缩、透亮度降低、排列紊乱,随着培养时间延长,细胞数量减少。各组细胞增殖抑制率及细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.01),其中低氧组+紫外线组细胞增殖抑制及诱导细胞凋亡作用最强,紫外线组次之,低氧组最弱。与对照组比较,低氧组、紫外线组及低氧+紫外线组Bcl-2mRNA的表达逐渐下调,且低氧+紫外线组Bcl-2 mRNA表达量较低氧组和紫外线组下调更明显(P<0.05)。结论低氧和紫外线作用均可抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,紫外线在低氧条件下对细胞的增殖抑制及凋亡作用较常氧条件下更明显,其机制可能与Bcl-2基因表达下调有关。[中国当代儿科杂志,2019,21(5):491-496](本文来源于《中国当代儿科杂志》期刊2019年05期）
丘杭娜,陈泓霖[3]（2019）在《抑制HL-60癌细胞(人早幼粒白血病细胞)药物的最新研究进展》一文中研究指出白血病是来源于造血干细胞的恶性疾病,一种常见的造血组织肿瘤性疾病,治愈率较低。开发针对白血病更有效、更安全的药物成为近年研究的焦点。人早幼粒白血病细胞(HL-60细胞)能够为研究药物的抗白血病作用持续提供人类癌细胞。近两年来,化学合成类药物研发步伐逐步加快,并推动绿色化学合成类药物发展,衍生出了生物合成类药物。随着化学与生物学科的结合发展,开辟了从微生物和海洋生物的获取抗癌药物的新方向。对已知化合物的结构改造和开发海洋生物资源,将为抗白血病药物的研发迎来非常好的前景。(本文来源于《广西师范学院学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
韦诚[4]（2019）在《臭椿苦酮抑制人早幼粒白血病HL-60细胞株增殖及其机制》一文中研究指出目的:臭椿苦酮是从传统中国药用植物臭椿中提取的苦木素类天然小分子化合物,臭椿苦酮已被证实具有抗肿瘤、抗艾滋、抗疟疾、抗过敏、消炎等多种活性。但是臭椿苦酮对人早幼粒白血病HL-60细胞株的抗增殖作用及其潜在机制尚未见报道。在本研究中,我们通过细胞分子生物学手段进行实验,目的是讨论臭椿苦酮在体外对HL-60细胞株的增殖抑制作用及其机制。方法:在体外通过MTT实验检测臭椿苦酮对HL-60细胞株生存活力的影响。通过Annexin V-APC/7-ADD染色细胞,运用流式细胞仪测定细胞凋亡比例。通过碘化丙啶(PI)染色细胞,运用流式细胞仪分析细胞周期变化。通过吖啶橙(AO)染色,在电子显微镜下观察臭椿苦酮能否诱导HL-60细胞出现自噬现象。通过蛋白印迹实验(WB)检测自噬相关蛋白的表达水平。通过添加自噬抑制剂,讨论臭椿苦酮诱导的自噬现象在其抑制HL-60细胞增殖过程中扮演的角色。结果:MTT实验显示臭椿苦酮对HL-60细胞具有很强的细胞毒性,并且对细胞的增殖抑制作用呈现浓度-时间依赖性,24、48、72小时半数抑制浓度(IC50)分别为12.18、8.497、5.986μmol/L。Annexin V-APC/7-ADD染色试验显示臭椿苦酮可诱导HL-60细胞发生凋亡,并且凋亡细胞数量呈浓度依赖性,5、10、20μmol/L臭椿苦酮作用48小时后,各组细胞凋亡率分别为42.02±0.54,52.05±2.27,59.69±0.25%;PI染色显示臭椿苦酮可通过上调G0/G1期细胞的百分比使HL-60细胞发生细胞周期阻滞,各组G0/G1期细胞比例分别为53.54±0.88,58.42±0.31和65.57±3.16%。AO染色提示臭椿苦酮可诱导HL-60细胞的细胞质中酸性自噬囊泡的形成,提示臭椿苦酮可诱导HL-60细胞发生自噬,运用BaF-A1预处理可以显着减弱这个过程。WB实验显示臭椿苦酮以剂量依赖的方式上调了HL-60细胞中beclin-1和LC3-II蛋白并下调了LC3-I和p62蛋白的表达水平。通过MTT实验进行细胞活力测定和Annexin V-APC/7-ADD染色进行细胞凋亡测定,运用BaF-A1预处理的方式进行对比,发现臭椿苦酮对HL-60细胞的抗增殖作用可能部分归因于诱导自噬介导的细胞凋亡。结论:臭椿苦酮对人早幼粒白血病HL-60细胞具有很强的细胞毒性,可能与其能诱导HL-60细胞凋亡、周期阻滞和自噬有关。臭椿苦酮可能通过促进自噬核心蛋白beclin-1的表达,抑制p62蛋白表达,并且促进LC3-I蛋白向LC3-II蛋白转化来诱导HL-60细胞发生自噬性细胞凋亡。(本文来源于《皖南医学院》期刊2019-03-01）
黄凤霞,苏媛媛,李海燕,黄君华[5]（2018）在《早幼粒白血病细胞受肿瘤坏死因子α增强全反式维甲酸诱导而凋亡的分析》一文中研究指出目的分析肿瘤坏死因子α增强全反式维甲酸诱导早幼粒白血病细胞凋亡的相关影响。方法选择NB4人急性早幼粒白血病细胞,利用全反式维甲酸单独作用,并选择肿瘤坏死因子α联合全反式维甲酸作用,测定细胞增殖以及细胞凋亡情况。结果早幼粒白血病细胞分化的逐渐进行,单一组、联合组的细胞增殖速度均慢慢下降;早幼粒白血病细胞分化的逐渐加深,单一组、联合组细胞凋亡率慢慢升高;分化2天,联合组细胞CD11b阳性率明显高于单一组,P<0.05。结论全反式维甲酸具有诱导早幼粒白血病细胞分化、凋亡的作用,而肿瘤坏死因子α会增强全反式维甲酸这一作用。(本文来源于《2018年《国际检验医学杂志》学术年会论文专集》期刊2018-11-22）
魏婧昕,丁兰,刘扬,李佩蔚,刘国安[6]（2018）在《Rabdosin B对急性早幼粒白血病细胞HL-60分化的诱导作用》一文中研究指出目的研究螺环内酯型对映-贝壳杉烷型二萜rabdosin B(RB)诱导HL-60向成熟粒细胞分化的特征及机制。方法采用台盼蓝染色、吉姆萨染色、硝基四氮唑蓝(NBT)还原力测定及流式细胞术检测RB对HL-60细胞增殖、细胞周期、NBT还原力、细胞吞噬及细胞表面抗原CD11b表达的影响。结果 RB在1.0、3.0、5.0μmol/L下抑制HL-60细胞增殖,引起HL-60细胞G0/G1期阻滞,增加HL-60细胞肾形核和分叶核细胞比率,并伴随细胞NBT还原力和吞噬能力显着增强以及CD11b阳性细胞率明显上升。进一步检测显示,活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,300μmol/L)及NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(APO,100μmol/L)和二联苯碘锚(DPI,0.1μmol/L)不仅可显着抑制RB诱导的细胞内ROS升高,并且可显着抑制RB诱导的HL-60细胞分化的各项特征指标的改变。结论 RB可通过上调HL-60细胞NADPH氧化酶活性,升高胞内ROS浓度,诱导HL-60细胞向成熟粒细胞分化。(本文来源于《中草药》期刊2018年11期）
何青焱[7]（2018）在《b-AP15克服慢粒细胞白血病对伊马替尼耐药的体内外研究》一文中研究指出研究背景及目的慢性粒细胞性白血病(CML),简称慢粒,与造血干细胞的染色体异常有关,最典型的是费城染色体长臂上9号染色体与22号染色体的易位,这种易位导致BCR-ABL融合基因的产生,同时产生大量的BCR-ABL融合蛋白,同时酪氨酸激酶被异常激活。BCR-ABL可以改变骨髓祖细胞,并且驱动95%慢性粒性细胞白血病(CML)病例的发展。BCR-ABL通过激活能够提高细胞增殖和生存的下游通路来促进慢性粒细胞白血病的发展,这些通路包括RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT、JAK/STAT等。慢粒的临床分期是:慢性期、加速期、急变期。伊马替尼作为CML和其他表达BCR-ABL的白血病的一线临床用药,它可以与ABL激酶位点结合,进而抑制其底物磷酸化,大部分病人用伊马替尼治疗后,他们在疾病的慢性阶段获得了完整的细胞遗传学反应。然而,在使用伊马替尼治疗病人的分子研究结果表明:仍可检测到BCR-ABL高表达;并且停用伊马替尼治疗后,疾病很容易复发。使用伊马替尼治疗后常常存在许多不良反应,其中比较常见的副作用有肠道反应(恶心、呕吐、腹泻)、水肿、肌肉痉挛、皮疹。骨髓抑制,肝酶水平升高,特别是在慢性粒细胞白血病中,骨髓抑制更常见。伊马替尼作用的时间也很有限,研究还发现伊马替尼耐药可以出现在慢性粒细胞白血病的任何阶段。而伊马替尼耐药会导致疾病复发和病情恶化。伊马替尼耐药有多种机制,而BCR-ABL依赖型的慢性粒细胞白血病的耐药机制是由于ABL基因位点发生了突变(其中最主要的是T315I突变),最终使得伊马替尼不能成功地与ABL激酶位点结合,最终使得下游的通路异常活化。为了克服这种耐药,随后又研究出了第二代酪氨酸激酶抑制剂,最典型的是尼罗替尼、达沙替尼。与伊马替尼相比较,尼罗替尼更能有效地抑制野生型BCR-ABL细胞系和BCR-ABL突变细胞系的增值。同时,它更能减少白血病负担(二者的有效使用剂量都要比伊马替尼小),延长患者的生存期,但是对T315I点突变型确无效。但是与伊马替尼一样,使用尼罗替尼后会引起副作用:3到4级骨髓抑制,同时会引起胆红素和脂肪酶升高。达沙替尼,可以与丝氨酸/苏氨酸激酶(比如TCL家族激酶、促分裂原活化蛋白激酶、受体酪氨酸激酶)结合。达沙替尼能够有效地对抗伊马替尼耐药活性构象的问题(因为它与酪氨酸家族激酶有更好的亲和力)。和尼罗替尼一样,达沙替尼可以抑制大部分野生型和BCR-ABL突变细胞系的增值和激酶活力,但是对T315I位点突变体仍然无效。同时,它也有副作用,尤其是在疾病的急变期,容易引起3-4级骨髓抑制。最近获得批准的帕纳替尼,已经证明了对难治性的慢性粒细胞白血病患者有疗效,帕纳替尼是唯一一个能治疗伴T315I突变患者的酪氨酸激酶抑制剂。但是它的副作用也很明显,它与动脉高压(有时是严重的)和严重的动脉闭塞、静脉血栓栓塞事件的风险增加有关。酪氨酸的持续激活导致慢性粒细胞白血病出现了几种异常变化:改变细胞粘连,抑制细胞凋亡,抑制蛋白酶体降解,有丝分裂原下游通路信号异常激活。所以,如果从BCR-ABL下游通路着手,可能是一个很好的治疗方法。泛素蛋白酶体系统(UPS)对细胞内蛋白的降解有着严格的调控作用。主要包括信号转导,基因表达,细胞周期,复制,分化,免疫反应,细胞的应激反应等等。癌细胞的主要特征是失去了细胞周期的调控,癌细胞失去了DNA修复功能,同时获得的基因的高度突变。最后产生大量的、错误折迭的蛋白,而这些都是具有细胞毒性作用的物质。为了弥补这个严重的问题,癌细胞增强了蛋白酶体系统的高表达,从而消除这些蛋白(也就是说癌细胞的蛋白酶体系统比正常细胞的UPS更活跃)。与没有特异性的溶酶体降解相反的是,蛋白酶体对体内蛋白的降解具有高度的选择性,只有那些被小分子泛素标记过的蛋白方可被降解。泛素蛋白酶体降解蛋白是一个复杂的过程,该过程包括泛素,3种酶,蛋白酶体的参与。其中,泛素是一种具有76个赖氨酸残基的高度保守的蛋白,泛素与底物的赖氨酸结合成一个异肽键,即形成单泛素化底物,随后,底物可以被更多的泛素标记,形成多聚泛素化链。泛素分子有7个赖氨酸,但是与底物蛋白结合的是赖氨酸48号残基,最终导致靶蛋白的降解。泛素其他的残基则负责蛋白的入核出核、DNA修复、基因表达、信号转导、胞吞等作用。蛋白降解的第一步便是泛素与泛素活化酶E1链的形成,这个过程需要ATP水解供能。然后活化的泛素被转运到酶E2(泛素结合酶),复杂的E2酶激活泛素并与特定的E3(泛素连接酶)结合,并将泛素转运到相应的底物。最后一步,就是蛋白酶体降解的过程。蛋白酶体是一种蛋白水解物,细胞核和细胞质中都有。蛋白酶体由叁部分组成,其中主要单元是位于中央的空柱状多酶核20S。20S由4个环组成,其中有2个相同的非催化亚基α环,2个催化亚基β环,一起形成了一个αββα结构,20S主要负责底物的降解。另外2个调节单元(19S),二者结构相同,位于20S的2端。19S由2部分组成:外部的是一个盖子,它负责识别被泛素标记的多聚泛素化底物,并对泛素进行移除。而19S的内部(基底部),通过6个ATP亚基的作用,负责相关底物的变性。在最后的降解过程中,白蛋白被19S识别并被19S移去多聚泛素链,然后被转入到20S水解中心,目的蛋白最后被其降解为10-12个氨基酸的短肽结构。被FAD批准的具有选择特异性的第一线蛋白酶体抑制剂是硼替佐米(PS-341)。它是一个以硼为双肽的结构,能够可逆地抑制20S上糜蛋白酶的活性,同时还能轻度抑制20S上半胱天冬蛋白酶活性(也就是说硼替佐米是一个20S蛋白酶体抑制剂)。从力学上来看,酸性物质硼替佐米与β亚基内部的亲核羟基侧链形成了共价结构。硼替佐米最初被批准用于初诊的多发性骨髓瘤,复发/难治性多发性骨髓瘤,套细胞淋巴瘤。硼替佐米抗肿瘤的机制多种多样,其中包括:抑制NF-κB信号通路、抑制抗凋亡靶基因,抑制几种抗凋亡蛋白(如Bcl-XL、bcl-2和STAT-3);下调DNA修复相关蛋白的表达,诱导内质网应激(ER)和促凋亡蛋白反应(UPR)。硼替佐米有很好的化疗作用,同时还可以克服传统的耐药问题,当其与其他药物合用的时候。尽管硼替佐米在血液恶性肿瘤中,取得了很好的治疗效果,但是许多病人在疾病好转后又很容易复发,同时,使用硼替佐米后存在许多细胞毒性(比如:神经毒性),并且还出现了耐药现象。这些因素就促使了研究这去寻找其他的蛋白酶体抑制剂:能够克服硼替佐米耐药、具有更好的性能、更小的细胞毒性、更广的抗癌反胃谱。继而研制出了第二代更好性能的硼替佐米衍生物:卡非佐米(Carfilzomib)。卡非佐米在2012年被FAD批准用于复发性和难治性多发性骨髓瘤。卡非佐米与β5亚基形成共价结构,从而抑制20S上糜蛋白活性。除了卡非佐米,其他的蛋白酶体抑制也正在临床试验的积极研究之中,比如Marizomib。Marizomib是一种天然乳胞素的衍生物。和硼替佐米及卡非佐米不同的是,Marizomib可以以不可逆的方式与蛋白酶体的叁个亚基(β1,β2,和β5)结合,以更持久、更强的方式抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶的活性。值得一提的是,Marizomib可以克服多发性骨髓瘤及慢性淋巴瘤对硼替佐米的耐药。与硼替佐米相比,Marizomib的这一临床特性可能归功于其对诱导凋亡的Caspase-8有更强的特异性。19S为调节颗粒,它的作用是将靶蛋白上的泛素去除,然后将靶蛋白输送至20S核心颗粒中进行降解。如果蛋白的去泛素化过程被阻断,那么蛋白便不能被降解,因为20S核心颗粒上狭窄的通道不允许多聚长链的泛素蛋白进入催化部位。由此可见,去泛素化酶抑制剂可能会干扰蛋白酶体的活性。去泛素化酶在许多疾病(比如遗产癌症和神经退化病)发挥很重要的作用,这些酶参与DNA的损失应激、DNA的修复及转导等过程。去泛素化酶根据它们的结构可以分为2大类:金属蛋白酶和半胱蛋白酶。所有的金属蛋白酶(包括POH1)都含有相同的泛素-蛋白酶结构域JAMM。半胱蛋白酶又分为4类:USP、UCH、OTU、MJD。这两类酶的分类反应了它们对多聚泛素链的特异亲和性。其中,USP家族(比如USP14)特异性识别泛素自由羟基末端的两个甘氨酸。因此,USP14只能去除单个的泛素,而不能去除靶蛋白上的整条泛素链。另一方面,UCH37(它是UCH家族成员),能特异性识别底物上的二聚泛素。而POH1可以切除从未折迭蛋白酶体底物伸展开来的整条多聚泛素化链。深入研究表明,敲出POH1会干扰酶体的组装,而去除UCH37或者USP14仅仅影响蛋白底物的降解。这表明,在蛋白酶体降解蛋白的过程中,POH1酶对大多数的去泛素化至关重要,而UCH37和USP14则扮演更特殊的角色。然而双重敲除UCH37和USP14后,蛋白酶体的活性也会受到抑制,这也使得它们成为药物候选的对象。虽然还没有发现POH1的抑制剂,但是最却发现了UCHL5和USP4的小分子抑制剂:b-AP15。b-AP15最初是在小分子的筛选中被发现的,它可以诱导溶酶体引起的凋亡,而这一过程并不依赖于肿瘤抑制抑制因子p53。这个化合物可以抑制许多针对Ub-AMC底物的DUB活性,但是它并不影响20S水解蛋白中心的活性。体内实验研究表明,b-AP15可以影响肿瘤的进展。此外,b-AP15还可以抑制对伊马替尼耐药的多发性骨髓瘤细胞的增值,同时,它在多种实体瘤的治疗中也有很好的效果。正因为这个小分子抑制剂取得了如此良好的效果,并且其临床副作用也比较小,所以研究者期待进行更深层次的探究,看其是否能够治疗更多种的疾病,当然也期待其治疗疾病的机制。为此,我们课题的研究目的:探讨b-AP15在慢性粒细胞白血病伊马替尼敏感型和伊马替尼耐药型细胞中的作用,为b-AP15在CML中的应用提供理论基础。结果1.b-AP15降低Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型细胞的活力。2.b-AP15诱导Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型细胞凋亡。3.b-AP15诱导Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型细胞凋亡与caspase激活及抗凋亡蛋白表达下调相关。4.b-AP15通过抑制19S的去泛素化酶USP14和UCHL5的活性,抑制蛋白酶体功能,随后细胞发生死亡。5.b-AP15诱导的蛋白酶体抑制与内质网应激及细胞凋亡相关。6.b-AP15下调Bcr-Abl蛋白水平的表达,并抑制其下游信号通路。7.b-AP15抑制USP14蛋白水平,使β-catenin水平也下调,进而使Bcr-Abl减少,引起CML细胞死亡。8.b-AP15在慢性粒细胞白血病病人原发性单核细胞中,也能抑制细胞的活力,诱导细胞凋亡。9.b-AP15抑制Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型细胞裸鼠移植瘤的生长。结论1.b-AP15抑制Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型细胞的活力并诱导其凋亡。我们的研究证实b-AP15诱导这2类型细胞死亡是伴随于b-AP15对蛋白酶体的作用的,同时其诱导的细胞死亡也是caspase依赖的,19S蛋白酶体相关去泛素化酶在凋亡过程中起着关键作用。我们在这里提出了一种通过下调Bcr-Abl表达而克服伊马替尼耐药的非传统治疗方案,为慢性粒细胞白血病克服伊马替尼耐药的治疗提供重大的临床意义。2.b-AP15通过抑制USP14,使WNT通路中的β-catenin水平下调,进而使Bcr-Abl蛋白水平下降,最后引起细胞死亡。3.b-AP15对Bcr-Abl野生型和Bcr-Abl-T315I突变型两种类型的裸鼠移植瘤均有抑制作用。(本文来源于《广州医科大学》期刊2018-06-01）
马慧[8]（2017）在《槐耳清膏对人早幼粒白血病HL-60细胞株增殖与凋亡的影响研究》一文中研究指出目的探讨不同浓度的槐耳清膏对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞株的增殖、凋亡的影响。方法将人早幼粒白血病细胞株HL-60培养至对数生长期,以不同浓度槐耳清膏(0mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml)分别培养HL-60细胞24h,48h和72h,0mg/ml为对照组,2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml为实验组,收集各分组的细胞,台盼蓝染色后进行细胞计数初步判读槐耳清膏对HL-60细胞增殖的影响;采用CCK-8细胞增殖活性检测法检测上述浓度槐耳清膏培养细胞24h,48h和72h后的吸光度,分析槐耳清膏对HL-60细胞的增殖抑制作用;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测分析槐耳清膏对HL-60细胞凋亡的影响。结果1.在倒置显微镜下观察加入槐耳清膏培养48h后,发现随着药物浓度的升高,作用时间的延长,HL-60细胞形态发生变化,细胞密度下降,折光性减低,胞体变小,细胞皱缩、破裂。2.通过细胞计数方法,不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)分别作用于HL-60细胞24h、48h和72h后,实验组除2mg/ml组在48小时外,其余各槐耳清膏浓度组HL-60细胞数在各个时间均较对照组相应时间的细胞数减少,变化具有统计学差异(P<0.05)。3.CCK-8增殖活性检测实验结果显示,不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16mg/ml),对HL-60细胞的抑制率与阴性对照组相比,均有显着性差异(P<0.001)。在一定浓度范围内(2-8mg/ml),随着药物浓度的增加,作用时间的延长,抑制率明显升高。16mg/ml槐耳清膏组48小时与72小时的抑制率相比,结果没有统计学意义(P>0.05)。4.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析研究槐耳清膏对HL-60细胞诱导凋亡的结果显示,不同浓度(2、4、8和16 mg/ml)的槐耳清膏分别作用于HL-60细胞24h,48h和72h,细胞凋亡率高于对照组,有统计学意义(P<0.01)。培养时间在24h和48h时间点,细胞凋亡率随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐升高。当培养时间达到72小时,各不同浓度实验组凋亡率与对照组相比,细胞凋亡率均增加,统计学有差异;但各不同浓度组实验组之间两两比较,结果均无统计学差异(P=0.0784)结论1.不同浓度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml),可抑制HL-60细胞增殖,在一定浓度范围内(2-8mg/ml),随着药物浓度的增加,作用时间的延长,抑制率逐渐升高。2.不同浓度槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)对HL-60细胞有诱导凋亡作用,低浓度组(2mg/ml和4mg/ml)随着时间的延长,凋亡率呈线性升高。高浓度组(8mg/ml和16mg/ml),其48小时的细胞凋亡率较24小时的凋亡率明显升高,72小时的凋亡率较48小时组下降。3.槐耳清膏可在体外抑制HL-60细胞的增殖,并促进其凋亡。(本文来源于《青岛大学》期刊2017-05-26）
叶梦滢[9]（2017）在《急性早幼粒白血病耐药细胞株靶向肽的鉴定及肽体的构建与表达》一文中研究指出急性早幼粒细胞白血病(Acute promyelocytic leukemia,APL)是急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)M3 亚型。全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)与蒽环类药物联合使用,是新诊断APL患者的标准治疗方案,完全缓解率可达到或超过90%,治愈率接近80%。但仍有部分患者因ATRA耐药的发生而导致治疗最终失败,ATRA耐药成为APL患者诊治过程中需要解决的关键问题之一。多肽免疫原性弱、组织渗透性好和半衰期短等特点是其成为疾病体内诊断及靶向治疗制剂的有利因素,目前人们利用噬菌体展示文库筛选技术(Phage display technology)已获得多种肿瘤的靶向多肽,并成功用于疾病的特异性诊断及治疗。在多肽基础上构建的肽体指由多肽与免疫球蛋白IgG的Fc段铰链区融合而成的蛋白,肽体保持了多肽与靶分子的结合特异性,同时兼具免疫球蛋白的半衰期长及具有细胞毒性、生产简易、易于纯化,已经在生物制药领域,尤其是在抗癌药物领域发挥着重要作用,目前已有许多肽体结构药物处于临床不同阶段研究当中。本实验室前期采用浓度递增间歇诱导法,对急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60进行体外诱导筛选,获得相应耐药细胞株,命名为HL-60R。之后采用基于微流控的噬菌体展示随机肽库筛选技术,以HL-60细胞为负筛细胞、HL-60R细胞为正筛细胞进行全细胞消减筛选,获得了四个能够与HL-60R特异性结合的噬菌体克隆:No.26、No.27、No.5R5、No.5R13,展示的外源十二肽序列分别为:pepNo.27(SPTSSFQVGTFA)、pepNo.26(TLTTHGRLFESN)、pepNo.5R5(WAITKPAPAAHP)、pepNo.5R13(TSTTFKSHLDHH),并初步验证了噬菌体-肽与耐药细胞株的结合特异性。在此基础上,本研究根据噬菌体-肽克隆展示的多肽序列进一步合成了相应荧光标记多肽,验证其细胞结合特异性,并构建相应肽体。获得的主要试验结果如下:1、根据噬菌体-肽克隆No.26、No.27、No.5R5、No.5R13的外源插入序列,委托公司合成相应的荧光标记多肽。为了使人工合成多肽与相应噬菌体多肽保持一致的空间构像,我们在人工合成多肽的羧基端增加GGGSK序列以模拟噬菌体PIII蛋白的游离末端,并于赖氨酸上偶联荧光素5-TAMRA,合成相应的荧光标记试验肽及对照肽(GGGAGGGAGGGAK)。流式细胞术及细胞免疫荧光结果显示,四种试验肽均与HL-60R细胞特异性结合,且与其他肿瘤细胞及人胚肾细胞无结合。竞争抑制试验结果显示,未偶联荧光素的试验肽能够有效竞争相应的荧光标记多肽,进一步证实pepNo.27、pepNo.26、pepNo.5R5、pepNo.5R13的结合特异性。pepNo.5R13与正常人外周血有核细胞不结合,提示其具备临床应用潜能。2、根据pepNo.27、pepNo.26序列,设计并合成两端带有EcoR I和Nco I酶切位点的目的片段,与EcoR I和Nco I双酶切的pFUSE-hIgG2-Fc2质粒连接,转化至DH5 α中,挑取阳性菌落提质粒测序。测序结果显示重组质粒pFUSE-hIgG2-Fc2-26,pFUSE-hIgG2-Fc2-27构建成功,将重组质粒转染至293T细胞进行肽体的真核表达,收取上清,Western blot验证肽体Peptibody-26、Peptibody-27 成功表达。3、生物信息学预测pepNo.27、pepNo.26、pepNo.5R5、pepNo.5R13四个肽段的理化性质及叁维空间结构。文献检索白血病耐药相关分子,通过GeneCards数据库明确它们的亚细胞定位以确定候选分子在细胞膜存在表达。利用PepSite2软件预测多肽与它们的对接情况,基于对接P值,候选靶蛋白NCAM与pepNo.5R5有对接可能(P<0.05)。候选靶蛋白P-gp与四种靶向肽均有对接可能,结合可能性分别是pepNo.26(P=0.04336)、pepNo.27(P=0.04421)、pepNo.5R5(P=0.03271)、pepNo.5R13(P=0.02861)。候选靶蛋白 Bcl-2 与 pepNo.26、pepNo.5R5 和 pepNo.5R13具有结合可能,结合可能性分别是pepNo.26(P=0.02514)、pepNo.5R5(P=0.008697)和 pepNo.5R13(P=0.03774)。综上所述,本研究根据前期筛选获得的噬菌体克隆展示外源多肽序列,合成了四个荧光基团5-TAMRA标记的相应多肽。随后细胞免疫荧光结合实验、竞争抑制试验、流式细胞术等多个实验进一步证实了四种多肽与急性早幼粒细胞白血病耐药细胞系HL-60R的结合特异性。同时我们还成功构建了 pepNo.26、pepNo.27的相应肽体并在真核细胞表达。上述研究结果有望可以提供新的ATRA耐药性APL细胞检测及靶向治疗策略,为探索ATRA耐药性APL细胞耐药机制,开发新的ATRA耐药逆转策略提供重要实验基础。(本文来源于《东南大学》期刊2017-05-24）
姚仕菲,刘北忠,陈敏,赵毅,李连文[10]（2018）在《EGCG通过PTEN增强ATRA对早幼粒白血病细胞株的分化作用》一文中研究指出探讨PTEN在表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)增强维甲酸(ATRA)诱导的急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化中的作用。我们分别将ATRA、EGCG及两种药物联合应用于NB4与HL-60细胞72 h,从形态学上观察细胞核的变化;Western blotting检测PTEN及髓系分化标志CD11b的表达;免疫荧光检测PTEN的入核情况;CCK-8检测细胞增殖率。结果显示,ATRA与EGCG联合作用于NB4与HL-60细胞后,PTEN与CD11b的表达较单独应用ATRA时增加。PTEN特异性抑制剂SF1670作用于NB4后,细胞分化明显减少;PI3K抑制剂LY294002作用后,PTEN及CD11b表达增加。这些均表明EGCG能够增强ATRA诱导APL细胞株的分化作用,且这种促进作用与PTEN的增加是相关的。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年05期）
慢粒白血病细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察280 nm波长紫外发光二极管照射在低氧条件下对急性早幼粒白血病细胞(HL-60增殖的影响,并探讨发生机制。方法取对数生长期的HL-60细胞为研究对象,分为对照组、低氧组、紫外线组及低氧+紫外线组。低氧组给予氯化钴(终浓度150μmol/L)处理,紫外线组用30 J/m~2能量的280 nm波长紫外发光二极管照射,低氧+紫外线组在氯化钴处理基础上用30 J/m2能量的280 nm波长紫外发光二极管照射,48 h后收集细胞于倒置显微镜下观察细胞形态变化。采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Annexin-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测Bcl-2基因mRNA的表达量。上述各实验均独立重复3次。结果与对照组相比,各实验组细胞皱缩、透亮度降低、排列紊乱,随着培养时间延长,细胞数量减少。各组细胞增殖抑制率及细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.01),其中低氧组+紫外线组细胞增殖抑制及诱导细胞凋亡作用最强,紫外线组次之,低氧组最弱。与对照组比较,低氧组、紫外线组及低氧+紫外线组Bcl-2mRNA的表达逐渐下调,且低氧+紫外线组Bcl-2 mRNA表达量较低氧组和紫外线组下调更明显(P<0.05)。结论低氧和紫外线作用均可抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,紫外线在低氧条件下对细胞的增殖抑制及凋亡作用较常氧条件下更明显,其机制可能与Bcl-2基因表达下调有关。[中国当代儿科杂志,2019,21(5):491-496]
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
慢粒白血病细胞论文参考文献
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[2].王艺霖,王玲珍,孙健栋,李学荣,王志.紫外线在低氧条件下对急性早幼粒白血病细胞增殖的影响及机制研究[J].中国当代儿科杂志.2019
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[7].何青焱.b-AP15克服慢粒细胞白血病对伊马替尼耐药的体内外研究[D].广州医科大学.2018
[8].马慧.槐耳清膏对人早幼粒白血病HL-60细胞株增殖与凋亡的影响研究[D].青岛大学.2017
[9].叶梦滢.急性早幼粒白血病耐药细胞株靶向肽的鉴定及肽体的构建与表达[D].东南大学.2017
[10].姚仕菲,刘北忠,陈敏,赵毅,李连文.EGCG通过PTEN增强ATRA对早幼粒白血病细胞株的分化作用[J].基因组学与应用生物学.2018
论文知识图
