导读:本文包含了广西眼镜王蛇毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:磷脂,蛇毒,眼镜,酸性,基因,广西,复性。
广西眼镜王蛇毒论文文献综述
黄红坤,黎渊弘,李佳荃,黎肇炎[1]（2009）在《广西眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶体外抗NACC细胞活性研究》一文中研究指出目的:利用抑制肿瘤细胞增殖作用的体外实验方法,探讨广西眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)对培养人类腭部小涎腺样囊性癌细胞系(NACC)增殖的抑制作用。方法:采用MTT法、台盼蓝拒染法和集落形成法,以0.02M pH7.4 Tris-HCl为阴性对照,丝裂霉素C(MMC)为阳性对照,人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为正常细胞对照,观察LAAO不同浓度不同作用时间对NACC细胞系体外增殖的抑制作用。结果:NACC细胞经LAAO处理24h、48h及96h后,生长明显受抑制,浓度、时间效应关系明显(P<0.05)。结论:眼镜王蛇毒LAAO对NACC肿瘤细胞具有细胞毒性和生长抑制作用,对HUVEC细胞毒性作用的LAAO浓度为对NACC细胞的10.35倍。(本文来源于《中国民族民间医药》期刊2009年06期）
林文珍,舒雨雁,庄茂辛,林政炯,吴祥甫[2]（2007）在《广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1在不同载体的表达》一文中研究指出目的构建广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)在不同载体的重组表达质粒,在E.coli中表达APLA2-1并比较不同表达系统对APLA2-1的表达效果。方法将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(AP-LA2-1)基因克隆至表达载体pBLMVL2和pET28a(+),分别转化入大肠杆菌RR1和BL21,经过诱导表达,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)及Western blot观察重组蛋白表达情况。结果成功构建了重组质粒pBLMVL2-APLA2-1和pET28a-APLA2-1。pBLMVL2-APLA2-1在SDS-PAGE上没见明显表达带,在Western blot上可见一14 kD的表达带。pET28a-APLA2-1在SDS-PAGE上有一明显的18 kD表达条带,表达产物AP-LA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在。结论APLA2-1可在大肠杆菌中表达,pET28a(+)对APLA2-1的表达效果优于pBLMVL2。(本文来源于《蛇志》期刊2007年03期）
林文珍,庄茂辛,舒雨雁,林政炯,周元聪[3]（2007）在《广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化及性质研究》一文中研究指出目的:广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化和性质研究。方法:分离纯化采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析,Sephadex G-75凝胶过滤和CM-Sepharose CL-6B离子交换柱层析;通过电泳,磷脂酶A2(PLA2)酶活力测定,氨基酸组成分析,N端序列测定及药理实验进行性质研究。结果:从广西眼镜王蛇毒中分离到一种电泳纯的碱性蛋白(命名为CM-IV),相对分子质量约为14000,等电点约为8.65;PLA2的比活力为23μmol·mg-1/min。氨基酸组成分析表明,其分子中Cys的含量占6.85%;利用蛋白质直接测序N端序列为TKCYVTPDVK。药理实验表明它对实验用小白鼠有致死性(LD50约为0.2mg/kg),并具有心脏毒性,但无血小板抑制活性。根据Genebank Blast分析软件,它的N端序列与神经毒素具有高度的同源性。结论:这种碱性蛋白可能为神经毒素,但却拥有PLA2的活力。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2007年02期）
舒雨雁,林文珍,庄茂辛,林政炯,吴祥甫[4]（2003）在《广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1的表达》一文中研究指出将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2 - 1(APLA2 - 1)基因克隆至表达载体pET2 8a(+) ,转化入大肠杆菌BL2 1,经过诱导 ,SDS -PAGE检测 ,重组质粒pET2 8a-APLA2 - 1在 18KD有一明显的表达条带 ,表达产物APLA2 - 1约占细菌总量 3 0 % ,并以包涵体的形式存在 ,将产物变复性后用SephadexG - 75纯化 ,产物经过SDS -PAGE检测只有单一条带 ,通过Western -blot检测 ,证实纯化产物是酸性磷脂酶A2 .对表达的APLA2 进行酶活性和药理活性的测定 .至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2 ,这将为以后对PLA2 的结构与功能的研究打下了良好的基础 .(本文来源于《现代临床医学生物工程学杂志》期刊2003年01期）
林文珍,舒雨雁,庄茂辛,林政炯,吴祥甫[5]（2002）在《广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A_2的基因克隆与序列分析》一文中研究指出目的 研究广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2 (APLA2 )的基因克隆与序列分析 .方法 从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA ,根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒APLA2 两端非翻译区的保守序列设计引物 ,利用RT -PCR进行体外扩增 ,获得磷脂酶A2 基因 ,克隆至pMD18-T载体 ,经测序筛选出APLA2 - 1,APLA2 - 2及一个新的酸性磷脂酶A2 (命名为APLA2 - 3 ) .根据测序结果确定了APLA2 - 3基因的全序列 ,并由此推导编码的氨基酸序列 .结果 利用Antheprot4 3c蛋白质序列分析软件包计算它的等电点为 4 885 ,相对分子质量为 16 5 43kD ,并预测了它的二级结构和部分理化性质 .同源性比较表明 ,APLA2 - 3的 1～ 3 9位氨基酸残基序列与APLA2 - 2相同 ,其同源性为 64 % ,而 40～ 10 8位氨基酸残基序列与APLA2 - 1相同 ,其同源性为 69% ,10 9位氨基酸残基序列皆不同于这两种APLA2 .结论揭示了APLA2 具有基因多样性 ,可能与物种进化和生物活性有关 ,并为进一步研究PLA2 的结构与功能的关系提供更多的信息(本文来源于《现代临床医学生物工程学杂志》期刊2002年06期）
李其斌,黄光武,赵晓琴,渡庆次贺博,金城记代彦[6]（2002）在《广西产眼镜王蛇毒α-神经毒素基因的分子克隆及序列分析》一文中研究指出为获得眼镜王蛇 (Ophiophagus hannah ,简称 Oh)蛇毒 α-神经毒素 (α- NT)的基因序列 ,依据眼镜蛇科不同毒蛇种类来源的 α- NT基因有较高的同源性 ,设计 1对上下游引物 ,为克服引物带来模糊扩增 ,在蛋白编码部分再设计 1对上下游特异引物 ,用 Nacleospin RNA Kit法从 3条活眼镜王蛇毒腺中提取 m RNA,以 3′端引物合成的 c DNA作为模板进行 PCR扩增反应 ,测定产物的核苷酸序列 ,得到全长 4 74 bp的眼镜王蛇 c DNA基因核苷酸序列。该核苷酸序列的信号肽与眼镜蛇树属 Pseudonnaja textilis(Pt)、海蛇 L aticauda semif asciata (L s) 10 0 %同源 ,与眼镜蛇南洋亚种 N aja sputatrix (Ns)、银环蛇 (Bungarusmulticinctus) (Bm) 96 .8%同源 ;蛋白密码部分有83.3%与 Ns、79.2 %与 Pt、76 .4 %与 L s、74 .1%与 Bm同源。信号肽后紧接着的 72个氨基酸有 90 .3%与已发现的眼镜王蛇毒长链α- NT Toxin a同源 ,大约有 73.6 %与 Toxin b、6 9.7%与 Oh- 4、6 6 .7%与 Oh- 5、5 6 .9%与 Oh-6 A和 6 B同源 ,并与 α-银环蛇毒素 5 4 .2 %同源。说明新发现的眼镜王蛇 c DNA是一条长链 α- NT基因。(本文来源于《广西科学》期刊2002年03期）
林文珍[7]（2002）在《广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1的表达及杂合性酸性磷脂酶A_2的克隆及序列分析》一文中研究指出将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)基因克隆至表达载体pBLMVL2和 pET28a(+),分别转化入大肠杆菌RR1和BL21,经过诱导,SDS-PAGE检测,重组质粒pBLMVL2-APLA2-1无明显表达, pET28a-APLA2-1在18kD有一明显的表达条带,表达产物APLA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在,将产物变复性后用Sephadex G-75 纯化,产物经过SDS-PAGE检测只有单一条带, 通过Western-blot检测,证实纯化产物即是酸性磷脂酶A2 ，最后对表达的APLA2进行了酶活性和生物活性的测定，至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2 。此外，我们从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA，根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒酸性磷脂酶A2（简称APLA2）两端非翻译区的保守序列设计引物，利用RT-PCR进行体外扩增，获得磷脂酶A2基因，克隆至pMD18-T载体，经测序筛选出APLA2-1、APLA2-2及一个新的酸性磷脂酶A2（命名为APLA2-3）。根据测序结果确定了APLA2-3基因的全序列，并由此推导编码的氨基酸序列。利用Antheprot 4.3c蛋白序列分析软件包计算它的等电点为4.885，相对分子质量为16.543kD,并预测了它的二级结构和部分理化性质。同源性比较表明，APLA2-3的1~39位氨基酸残基序列与APLA2-2相同，其同源性为64%，而40~108位氨基酸残基序列与APLA2-1相同，其同源性为69%，109位氨基酸残基序列不同于这两种APLA2 ，这揭示了PLA2具有基因多样性，可能与物种进化和生物活性有关，并为进一步研究PLA2的结构与功能的关系提供更多的信息。(本文来源于《广西医科大学》期刊2002-05-01）
王秋雁,舒雨雁,庄茂辛,林政炯[8]（2001）在《广西眼镜王蛇毒一种新的酸性磷脂酶A_2的基因克隆和性质》一文中研究指出通过SephadexG 75 ,CM SepharoseCL 6B和DEAE SephadexA 5 0连续的柱层析 ,从广西眼镜王蛇 (Ophiophagushannah)蛇毒中分离到一种新的酸性磷脂酶A2 (pI 4 .0 ) ,命名为APLA2 2 .它的分子量约为 14 0 0 0 ,具有较高的磷脂酶活力 (4 2 9mol·g- 1·min- 1) .它对小鼠没有致死性 (LD50 >2 0mg·kg- 1) ,但具有抗血小板聚集功能及诱导水肿形成能力 .通过cDNA测序解决了它的完全的一级结构 .由cDNA推导的APLA2 2蛋白质全序列与福建眼镜王蛇和台湾眼镜王蛇蛇毒酸性磷脂酶A2 的同源性分别为73.9% ,64.7% ,它不存在 62～ 66位的“胰腺环” ,因而它可能是一种新的眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2 .APLA2 2基因克隆及其生化药理性质的研究 ,为探讨蛇毒活性蛋白结构与功能关系及蛇伤中毒机理创造了良好的条件 .(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2001年06期）
林文珍,王秋雁,舒雨雁[9]（2001）在《广西眼镜王蛇毒磷脂酶A_2的研究》一文中研究指出从广西眼镜王蛇毒中分离到两种酸性磷脂酶A_2,一种碱性磷脂酶A_2和一种中性磷脂酶A_2.通过Sephadex G-75,CM-Sepharosc CL-6B和DEAE-Sephadex A-50连续的柱层析,得至两种酸性磷脂酶A_2,分别命名为APLA_2-1和APLA_2-2.此外,通过两次CM-Sepharose CL-6B和一次Sephadex G-75连续的柱层析,分离到一种碱性磷脂酶A_2,命名为BPLA_2.并通过CM-Sepharose CL-6B、Sephadex G-75和DEAE-(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集》期刊2001-09-01）
王秋雁,舒雨雁,庄茂辛,林政炯[10]（2001）在《广西眼镜王蛇毒两种酸性磷脂酶A_2的cDNA克隆及序列分析》一文中研究指出从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA ,利用RT PCR进行体外扩增 ,获得磷脂酶A2 基因 (PLA2 ) ,克隆至PUCm T载体中 ,筛选出编码两种酸性PLA2 (命名为APLA2 1和APLA2 2 )的基因 ,经双向测序测定了它们基因的全序列 ,由此推导出编码的氨基酸序列 ,其中APLA2 1的N端 15个氨基酸残基序列同其蛋白质直接测序的结果完全一致。利用计算机软件推算出它们的等电点与实际测定的等电点较为吻合。同源性比较表明 ,APLA2 1与福建眼镜王蛇和台湾眼镜王蛇毒PLA2 成熟肽同源性极高 ,而APLA2 2与它们的同源性相对较低 ,并且APLA2 2与APLA2 1及其他两种眼镜王蛇毒PLA2 分子结构中有一个显着的差别即少一个 6 2～ 6 6位的“胰腺环” ,可能与物种进化和生物活性有关(本文来源于《生物化学与生物物理学报》期刊2001年03期）
广西眼镜王蛇毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)在不同载体的重组表达质粒,在E.coli中表达APLA2-1并比较不同表达系统对APLA2-1的表达效果。方法将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(AP-LA2-1)基因克隆至表达载体pBLMVL2和pET28a(+),分别转化入大肠杆菌RR1和BL21,经过诱导表达,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)及Western blot观察重组蛋白表达情况。结果成功构建了重组质粒pBLMVL2-APLA2-1和pET28a-APLA2-1。pBLMVL2-APLA2-1在SDS-PAGE上没见明显表达带,在Western blot上可见一14 kD的表达带。pET28a-APLA2-1在SDS-PAGE上有一明显的18 kD表达条带,表达产物AP-LA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在。结论APLA2-1可在大肠杆菌中表达,pET28a(+)对APLA2-1的表达效果优于pBLMVL2。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
广西眼镜王蛇毒论文参考文献
[1].黄红坤,黎渊弘,李佳荃,黎肇炎.广西眼镜王蛇毒L-氨基酸氧化酶体外抗NACC细胞活性研究[J].中国民族民间医药.2009
[2].林文珍,舒雨雁,庄茂辛,林政炯,吴祥甫.广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1在不同载体的表达[J].蛇志.2007
[3].林文珍,庄茂辛,舒雨雁,林政炯,周元聪.广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化及性质研究[J].广西医科大学学报.2007
[4].舒雨雁,林文珍,庄茂辛,林政炯,吴祥甫.广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1的表达[J].现代临床医学生物工程学杂志.2003
[5].林文珍,舒雨雁,庄茂辛,林政炯,吴祥甫.广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A_2的基因克隆与序列分析[J].现代临床医学生物工程学杂志.2002
[6].李其斌,黄光武,赵晓琴,渡庆次贺博,金城记代彦.广西产眼镜王蛇毒α-神经毒素基因的分子克隆及序列分析[J].广西科学.2002
[7].林文珍.广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2-1的表达及杂合性酸性磷脂酶A_2的克隆及序列分析[D].广西医科大学.2002
[8].王秋雁,舒雨雁,庄茂辛,林政炯.广西眼镜王蛇毒一种新的酸性磷脂酶A_2的基因克隆和性质[J].中国药理学与毒理学杂志.2001
[9].林文珍,王秋雁,舒雨雁.广西眼镜王蛇毒磷脂酶A_2的研究[C].中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集.2001
[10].王秋雁,舒雨雁,庄茂辛,林政炯.广西眼镜王蛇毒两种酸性磷脂酶A_2的cDNA克隆及序列分析[J].生物化学与生物物理学报.2001
论文知识图
