miR-155通过Wnt/β-catenin信号通路影响溃疡性结肠炎结肠组织E-cadherin及snail的表达

论文摘要

目的通过检测小鼠结肠组织中miR-155、Wnt/β-catenin、E-cadherin及snail等相关指标变化,探讨miR-155通过激活Wnt/β-catenin信号通路介导上皮-间充质转化,影响溃疡性结肠炎（UC）的机制。方法将32只C57小鼠随机分为4组:正常组、模型组、miR-155抑制剂组、阴性对照组。除正常组外,其余各组予以3%葡聚糖硫酸钠（DSS）自由饮用1周制备UC模型,从第5天开始,miR-155抑制剂组及阴性对照组分别腹腔注射miR-155抑制剂或其阴性对照制剂（80 mg/kg）,正常组和模型组予以等量磷酸盐缓冲液（PBS）腹腔注射,连续给药3 d。自造模第1天起,每天记录小鼠体质量变化、粪便性状、血便等情况。第8天处死全部小鼠,对小鼠进行疾病活动指数评分（DAI）;测量结肠组织长度变化;HE染色法检测结肠组织病理结构变化;原位杂交技术检测结肠组织中miR-155含量;实时荧光定量PCR法、Western blot及免疫组化法检测结肠组织miR-155、Wnt1、β-catenin、Cyclin D1、E-cadherin及snail的表达量。结果与正常组相比,模型组结肠组织黏膜及黏膜下层可见大量炎性细胞浸润、杯状细胞减少且排列紊乱、黏膜缺损及溃疡形成等,DAI评分显著升高（P<0.01）,结肠长度显著减少（P<0.01）,结肠组织miR-155含量明显升高,Wnt1、β-catenin、Cyclin D1和snail mRNA及蛋白质表达水平均明显升高（均P<0.01）,E-cadherin表达量则明显降低（P<0.01）;然而,与模型组相比,miR-155抑制剂组结肠组织病变明显改善,DAI评分显著降低（P<0.01）,结肠长度显著增加（P<0.01）,结肠组织miR-155含量明显降低,Wnt1、β-catenin、Cyclin D1和snail mRNA及蛋白质表达水平均明显降低（均P<0.01）,E-cadherin表达量则显著升高（P<0.05）。结论 miR-155可通过激活Wnt/β-catenin信号通路,下调E-cadherin并上调snail表达,介导上皮-间充质转化,加重溃疡性结肠炎。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•     1.1.1 动物
•     1.1.2 主要试剂与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 造模、分组及给药
•     1.2.2 疾病活动指数评分（DAI）
•     1.2.3 HE染色观察结肠组织病理变化
•     1.2.4 原位杂交检测结肠组织miR-155表达
•     1.2.5 Real-time PCR检测小鼠结肠组织中miR-155及Wnt1、β-catenin、E-cadherin、snail等mRNA的表达
•     1.2.6 蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠结肠组织E-cadherin及snail蛋白的表达
•     1.2.7 免疫组织化学法检测小鼠结肠组织Wnt1、β-catenin、Cyclin D1、E-cadherin及snail蛋白的表达
•   1.3 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 miR-155抑制剂对UC小鼠DAI评分的影响
•   2.2 miR-155抑制剂对UC小鼠结肠长度的影响
•   2.3 miR-155抑制剂对UC小鼠结肠黏膜病理学改变的影响
•   2.4 miR-155抑制剂对小鼠结肠组织miR-155及Wnt1、β-catenin、E-cadherin和snail mRNA表达量的影响
•   2.5 miR-155抑制剂对小鼠结肠组织Wnt1、β-catenin、Cyclin D1、E-cadherin及snail蛋白表达的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 朱凤,范恒

关键词: 溃疡性结肠炎,信号通路,钙黏蛋白

来源: 华中科技大学学报(医学版) 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 消化系统疾病

单位: 华中科技大学同济医学院附属协和医院中医科

基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81573784,No.81774093)

分类号: R574.62

页码: 631-636

总页数: 6

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