含Cry1Ab/Ac基因的白僵菌工程菌的构建

论文摘要

以来源于苏云金芽孢杆菌的Bt-Cry1Ab/Ac基因为目的基因,以潮霉素Hyg为抗性标记基因,以绿色荧光蛋白基因GFP为报告基因的真菌表达载体,采用农杆菌介导真菌遗传转化（ATMT）法,将Cry1Ab/Ac基因插入白僵菌基因组中,先后用潮霉素B抗性筛选、荧光检测、真菌基因组PCR分子检测法、Bt-Cry1Ab/Ac基因检测试纸条多种方法进行转基因工程菌株鉴定,结果证实了目的基因成功插入白僵菌基因组,为白僵菌杀虫活性的深入研究奠定了基础.

论文目录

• 1 材料及方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 供试菌株及质粒
•     1.1.2 所用主要培养基及抗生素
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 基因克隆
•     1.2.2 融合表达载体的构建与鉴定
•     1.2.3 潮霉素B （Hygromycin B） 对白僵菌菌株抑制效果测定
•     1.2.4 农杆菌介导法 （ATMT） 遗传转化白僵菌
•     1.2.5 转化子的鉴定及检测
• 2 结果与分析
•   2.1 含有Cry1Ab/Ac基因及GFP基因的白僵菌工程菌株构建
•   2.2 白僵菌工程菌株的转化子鉴定
•     2.2.1 白僵菌绿色荧光蛋白的遗传转化检测
•     2.2.2 白僵菌工程菌株的PCR分子检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 程云清,孙贺

关键词: 白僵菌工程菌,基因,绿色荧光蛋白

来源: 吉林师范大学学报(自然科学版) 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,农业基础科学,植物保护

单位: 吉林师范大学生命科学学院

基金: “948”国家林业局引进项目(20150423),吉林省产业创新专项资金项目(2016C092)

分类号: Q78;S476.12

DOI: 10.16862/j.cnki.issn1674-3873.2019.02.019

页码: 101-105

总页数: 5

文件大小: 278K

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