美洲大蠊肠道内生分枝杆菌的分离鉴定及其抑菌活性的初步研究

论文摘要

目的对美洲大蠊肠道内生分枝杆菌进行形态学和分子生物学鉴定,初步研究其抑菌活性并筛选其次级代谢产物生物合成基因簇。方法采用平板划线法对美洲大蠊肠道内生分枝杆菌进行分离、纯化及革兰染色检查;PCR扩增其16S rDNA并测序,进行BLAST比对及系统发育树分析,对生物合成基因簇聚酮合酶(PKS I)基因、非核糖体肽合成酶(NRPS)基因与FADH2依赖型卤化酶基因进行初步筛选。采用牛津杯法初步测定分离菌对常见致病菌的抑菌活性。结果从美洲大蠊肠道分离到4株内生分枝杆菌,在高氏I号培养基上形成的菌落较小,颜色呈橘红色,革兰染色呈紫色;系统发育树分析表明,4株分枝杆菌与已知分枝杆菌相似度均在99%以上,且与植物、土壤及临床标本来源的分枝杆菌亲缘关系较近。4株美洲大蠊肠道内生分枝杆菌的生物合成基因PKS I表达均呈阳性,其中3株菌的NRPS基因表达呈阳性。抑菌试验显示,其中3株分枝杆菌均对8株常见致病菌表现出不同程度的选择性抑制作用。结论美洲大蠊肠道内生分枝杆菌具有抑菌活性,可能具有产聚酮类或多肽类等活性物质的潜力。

论文目录

• 材料与方法
•   1 材料
•     1.1 供试样品
•     1.2 培养基
•     1.3 供试菌株
•     1.4 主要试剂及仪器
•   2 方法
•     2.1 美洲大蠊内生分枝杆菌的分离纯化与形态特征观察
•     2.2 细菌16S rDNA系统发育树分析
•     2.3 美洲大蠊肠道内生分枝杆菌抑菌活性的筛选
•     2.4 菌株次级代谢产物生物合成基因簇的筛选
• 结 果
•   1 蜚蠊肠道内生分枝杆菌的分离纯化与形态学观察
•   2 菌株BLAST同源性比对及系统发育树分析
•   3 菌株发酵提取物抑菌活性的筛选
•   4 菌株次级代谢产物生物合成基因簇的筛选
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 区佩渝,刘凌燕,陈志宇,曾还雄,朱家勇,金小宝

关键词: 美洲大蠊,内生分枝杆菌,序列,系统发育树,抑菌活性

来源: 中国病原生物学杂志 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室

基金: 广东省公益研究与能力建设项目(No.2016A030303059,2017A020211008)

分类号: Q939.9

DOI: 10.13350/j.cjpb.190514

页码: 560-564+567

总页数: 6

文件大小: 1078K

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