食品过敏原牡蛎成分PCR检测方法的初步研究

论文摘要

目的:建立基于PCR技术的过敏原牡蛎成分快速检测方法,结合溶解曲线及特异的Tm值与Ct值,用于不同产品的牡蛎成分检测。方法:根据NCBI上的牡蛎线粒体序列,通过DNA Star等软件设计引物,分别采用普通PCR和SYBR Green I实时荧光PCR的方法建立食品过敏原牡蛎成分的检测方法,对十种牡蛎阳性样品和二十余种阴性样品进行实验,并且对几种牡蛎相关食品进行检测。结果:研究建立的检测方法可以检测出含牡蛎成分0.1%的样品,其中荧光PCR的灵敏度达到0.01 ng/μL,特征峰的Tm温度为80.08℃,能够检测出牡蛎相关食品中的牡蛎成分。结论:该方法是一种操作安全方便、成本较低、特异、灵敏的实时荧光PCR方法,对于收集到的食品相关产品以及保健品中牡蛎粉的检出率为100%,该方法可广泛应用于食品中牡蛎成分的快速鉴定。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 人工污染模拟样品
•     1.2.2 样品DNA的提取
•     1.2.3 引物设计及筛选
•     1.2.4 PCR扩增条件优化
•     1.2.5 PCR产物的测序验证
•     1.2.6 PCR检测灵敏度实验
•   1.3 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 引物筛选PCR检测
•   2.2 PCR扩增结果的测序验证
•   2.3 SYBR Green I荧光PCR结果分析
•   2.4 牡蛎成分的PCR检测灵敏度
•   2.5 不同牡蛎产品的检测
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张懿翔,曲勤凤,余顺吉,胡雪莲,熊薇,葛宇

关键词: 食品过敏原,牡蛎成分,定性检测

来源: 食品工业科技 2019年02期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 上海市质量监督检验技术研究院

基金: 上海市技术性贸易措施应对专项项目(16TBT004)

分类号: TS254.7

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.043

页码: 251-256

总页数: 6

文件大小: 2167K

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