大赖草SRAP-PCR反应体系的建立与优化

论文摘要

本研究以新疆大赖草为材料,利用单因素实验和正交设计实验相结合分别研究了模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度等对大赖草SRAP-PCR体系的影响,并对扩增体系进行了优化。最后确定SRAP-PCR反应体系（25μL体系）中各因素最佳浓度为:引物0.4 mmol/L,模板DNA 30 ng/μL,dNTP 0.16 mmol/L Mg2+1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶量1.0 U。经PCR反应体系验证和引物筛选试验表明,发现该体系适合于后续的大赖草遗传多样性研究。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 大赖草基因组DNA提取与质量检测
•   1.2 SRAP-PCR的单因子实验
•     1.2.1 DNA浓度对SRAP-PCR的影响
•     1.2.2 引物浓度对SRAP-PCR扩增的影响
•     1.2.3 Mg2+浓度对SRAP-PCR扩增的影响
•     1.2.4 d NTPs浓度对SRAP-PCR扩增的影响
•     1.2.5 Taq DNA聚合酶对SRAP-PCR扩增的影响
•   1.3 SRAP-PCR正交设计实验分析
•   1.4 大赖草SRAP-PCR体系验证分析
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 材料
•   3.2 大赖草DNA的获得
•   3.3 SRAP-PCR扩增反应体系
•   3.4 SRAP-PCR单因子实验
•   3.5 正交实验设计
•   3.6 SRAP-PCR反应体系的验证
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 代培红,寇小霞,吾买尔夏提·塔汉,李月,刘超,周桂玲

关键词: 大赖草,体系优化,单因素实验,正交设计

来源: 分子植物育种 2019年17期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 新疆农业大学农学院,新疆农业大学草业与环境科学学院

基金: 国家自然科学基金项目(31160038),国家自然科学基金项目(31160134)共同资助,新疆自治区级大学生创新项目(jqztp72013012)

分类号: Q943

DOI: 10.13271/j.mpb.017.005735

页码: 5735-5740

总页数: 6

文件大小: 1633K

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