陈福刚（黑龙江省克山县第一人民医院黑龙江克山161600）
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)10-0036-01
【关键词】血清胆固醇测定
胆固醇（cholesterol）是体内主要脂类之一。人体内胆固醇来源除由食物摄取外，也可体内合成。人体除脑组织外，几乎所有组织都合成胆固醇，其中肝脏是合成胆固醇的主要场所。肝脏不仅是合成胆固醇的主要场所，也是调节血浆胆固醇水平和胆固醇脂与游离胆固醇比例的场所。
血中胆固醇有两种形式，一种是和脂肪酸结合的，称为胆固醇酯，另一种是未和脂肪酸结合的，称为游离胆固醇。血浆脂蛋白分子中的游离胆固醇，可以通过卵磷脂-胆固醇酰基转移酶（LCAT）催化作用而接受卵磷脂β-碳位上脂酰基而生成胆固醇酯。LCAT是在肝脏中合成，因此，肝细胞损伤时，血浆胆固醇酯化作用减弱，血浆中的胆固醇酯浓度下降。
正常人血浆中胆固醇约1/3以a-脂蛋白的形式转运，2/3以β-脂蛋白形式转运，TC＝HDL-C+LDL-C+VLDL-C。
胆固醇是体内某些激素、维生素和胆汁酸等合成的原料。肝脏中的胆固醇，约80％直接转化为胆酸，胆酸又与甘氨酸或牛磺酸生成胆汁酸，随胆汁进入肠内，对肠内脂类的消化吸收起重要作用。肾上腺皮质内的胆固醇，经酶催化可转变成肾上腺皮质激素和性激素。此外，胆固醇在人体皮肤内可以氧化脱氢生成7-脱氢胆固醇，再经紫外线照射生成维生素D3，它能促进钙、磷的吸收，有利于骨骼的生成。
血清中胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标，但脂类代谢又常与糖类和激素的代谢密切相关，故在其他物质代谢异常时也可影响血清胆固醇的浓度。
【原理】（CHOD-PAP法，又称氧化酶法）
酯化的胆固醇经酶水解后，经胆固醇氧化酶氧化，所产生的H2O2与4-氨基安替比林和ESBmT反应生成紫红色色素，颜色深浅与胆固醇含量成正比。
【试剂组成】（液体双试剂）
1．4-氨基安替比林；胆固醇酯酶；过氧化物酶；缓冲液。
2．胆固醇氧化酶；ESBmT；缓冲液。
【操作方法】
1．样本/试剂体积比：S:R1:R2＝3:260:130。
2．反应类型：终点法、反应方向向上。
3．主波长/副波长＝600/700nm。
以OLYMPUSAU600型自动分析仪的操作方法为例：
标本+试剂①37℃测试吸光度Ⅰ+试剂②37℃测试吸光度Ⅱ，计算浓度。
3μl260μl3.5min130μl5min
吸光度Ⅰ，Ⅱ：600nm与700nm吸光度的差。
不同厂家生产试剂，试剂组成、分析参数略有不同。
【结果计算】
C——测定TC，mmol/L；
△A测定——标本管吸光度；
△A标准——标准管吸光度；
C0——校准血清TC浓度，mmol/L；
△A＝A2-A1。
【参考范围】
血清TC水平受年龄、家族、性别、遗传、饮食、精神等多种因素影响，因此很难制定统一的参考值。一般认为＜5.20mmol/L为合适水平，边缘水平：5.20～5.70mmol/L；危险水平≥5.72mmol/L。儿童＜4.4mmol/L。
【注意事项】
1．酶法测定TC反应达终点时间37％不应超过5分钟。
2．试剂空白吸光度A500nm≤0.05。
3．酶法测定TC时，当Hb＞2g/L会引起正干扰。胆红素＞0.1g/L或抗坏血酸＞170μmol/L会出现负干扰。抗坏血酸与甲基多巴浓度高于治疗水平时也使结果偏低。
4．酶法测血清TC时，由于血清中大部分Chol是酯化的，而且血清基质对这项酶促反应有明显的影响，故不宜采用纯胆固醇结晶配制的溶液作为TC酶法分析的标准液，而应以准确定值的血清作为标准参考物质。
5．临床上已很少采用游离Chol测定，如需测游离Chol，最简便的也是用酶法，即在上述TC测定用酶试剂中省去CEH（胆固醇酯酶）即可，一般游离Chol约占总TC的30％左右。
【临床意义】
影响TC水平因素有：
1．年龄与性别，TC水平往往随年龄上升，但到70岁或80岁后有所下降，中青年女性低于男性，50岁以后女性高于男性。
2．长期的高胆固醇、高饱和脂肪和高热量饮食可使TC增高。
3．遗传因素。
4．其他，如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
高TC血症是冠心病的主要危险因素之一。病理状态下高TC有原发的与继发的两类。原发的如家族性高胆固醇血症（低密度脂蛋白受体缺陷）、家族性ApoB缺陷症、多源性高TC、混合性高脂蛋白血症。继发的见于肾病综合征、甲状腺功能减退、糖尿病、妊娠、胆总管阻塞如患结石和肿瘤时胆固醇增高且伴有黄疸，但胆固醇酯与总胆固醇的比值正常。
低TC血症也有原发的与继发的，前者如家族性的无β或低β脂蛋白血症；后者如甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病等。低TC者容易发生脑出血，也可能易患癌症（未证实）。
肝脏是胆固醇及胆固醇卵磷脂酰基转移酶（LCAT）合成的器官，严重肝病患者血清TC不一定很低，但由于血清LCAT活力低下，血清胆固醇酯占TC的比例可低达50％以下。